Breast Cancer Research, 2005; 7(2): R194-R203 (más artículos en esta revista)

Alta expresión de la quinasa de adhesión focal (p125 FAK) en ganglios negativos de cáncer de mama está relacionado con sobreexpresión de HER-2/neu y Akt quinasa activada, pero no predecir resultados

BioMed Central
Klaus Jürgen Schmitz (klaus.schmitz @ uni-essen.de) [1], Florian Grabellus (florian.grabellus @ medizin.uni-essen.de) [1], Rainer Callies (rainer.callies @ uni-essen.de) [2], Friedrich Otterbach (friedrich.otterbach @ uni-essen.de) [1], Jeremias Wohlschlaeger (jeremias.wohlschlaeger @ medizin.uni-essen.de) [1], Bodo Levkau (bodo.levkau @ uni-essen . De) [4], Rainer Kimmig (rainer.kimmig @ medizin.uni-essen.de) [2], Kurt Werner Schmid (kw.schmid.pathologie @ uni-essen.de) [1], Hideo Andreas Baba ( Hideo.baba @ medizin.uni-esse.de) [1]
[1] Instituto de Patología, Hospital de la Universidad de Duisburg-Essen, Essen, Alemania
[2] Departamento de Obstetricia y Ginecología, Hospital de la Universidad de Duisburg-Essen, Essen, Alemania
[3] Centro de Cáncer de Alemania Occidental, Essen, Alemania
[4] Instituto de Fisiopatología, Hospital de la Universidad de Duisburg-Essen, Essen, Alemania

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Resumen
Introducción

Quinasa de adhesión focal (FAK) regula múltiples procesos celulares que incluyen un crecimiento, la diferenciación, de adhesión, la motilidad y la apoptosis. En carcinoma de mama, FAK sobreexpresión se ha relacionado con la progresión del cáncer, pero el pronóstico sigue siendo desconocido relevancia. En particular, con respecto a los ganglios linfáticos negativos de cáncer de mama es importante identificar los pacientes de alto riesgo que se beneficiarían de la terapia adyuvante más.

Métodos

Se analizaron 162 ganglios negativos casos de cáncer de mama para determinar el pronóstico pertinencia de FAK expresión, y se determinó la relación de la FAK con las principales vías de señalización asociados (HER2, Src, Akt y extracelular quinasas reguladas) por inmunohistoquímica y occidental blot.

Resultados

FAK elevada expresión no predecir resultados paciente, en contraste con la clasificación de tumores (P = 0,005), de activación de Akt (P = 0,0383) y estado del receptor de estrógeno (P = 0,0033). Significativas se observaron correlaciones positivas entre FAK elevada expresión y sobreexpresión de HER2 (P = 0,001), así como de fosfato Src Tyr-215 (P = 0,021) y fosfato Akt (P <0,001), pero no con fosfato ERK1 / 2 (P = 0.108). Western blot mostró una correlación significativa de FAK Tyr-861 de activación y sobreexpresión de HER2 (P = 0,01).

Conclusiones

FAK detección inmunohistoquímica de la expresión no es de importancia pronóstica en ganglios negativos, pero el cáncer de mama HER2 proporciona evidencia de que está implicada en tumor de malignidad y capacidad metastásica de un cáncer de mama a través de una nueva ruta de señalización que participan FAK y Src.

Introducción

El cáncer de mama es una de las principales causas de muerte entre las mujeres. Adyuvante sistémica puede mejorar considerablemente las tasas de supervivencia, sino que se asocia con graves efectos secundarios tóxicos. Especialmente en pacientes con ganglios negativos de cáncer de mama, los pros y los contras de la terapia adyuvante sistémica son siempre críticamente ponderados. La identificación de nuevos marcadores de ganglios negativos de alto riesgo los pacientes que se beneficiarían de la terapia adyuvante, por lo tanto, es de gran importancia. El objetivo del presente estudio fue evaluar la importancia pronóstica de la quinasa de adhesión focal (FAK) en la expresión ganglios negativos de cáncer de mama. Además, el presente informe fue diseñado para investigar la consecuencia de FAK expresión en los dos grandes objetivos (a saber, la Akt y Erk1 / 2), y para dilucidar su relación con la vía de señalización HER2.

La invasión y metástasis de cáncer es un proceso complejo, incluidos los cambios en la adhesión celular y de la motilidad que permiten las células tumorales para invadir y migran a través de la matriz extracelular. Algunas de estas alteraciones se pueden producir en centros de adherencias, que son células / extracelular de la matriz que contiene los puntos de contacto asociada a la membrana, citoesqueleto y moléculas de señalización intracelular [1]. La supervivencia de las células epiteliales normales depende críticamente de la célula-célula y célula-matriz de contacto. Sin estos contactos mueren las células epiteliales a través de la controlada proceso de la apoptosis, denominada anoikis [2]. FAK es una tirosina quinasa considera una molécula central en la señalización mediada por la integrina, y es que participan en la motilidad celular y la protección contra la apoptosis [3 - 7]. La importancia de la FAK en la biología de las células epiteliales que queda subrayado por los resultados que las líneas de células epiteliales que expresan constitutivamente activa FAK sobrevivir en suspensión y que las células derivadas de FAK - / - embriones de ratón exposición reducido la migración [8, 9].

Los altos niveles de FAK se han encontrado en una variedad de tumores, incluido el cáncer de cabeza y cuello, carcinomas de ovario, los carcinomas de tiroides y carcinomas de colon [10 - 12]. Sólo dos estudios han descrito hasta la fecha FAK elevados de expresión en cáncer de mama humano y preinvasiva lesiones en contraste con lesiones benignas de mama en pequeñas cohortes [13, 14]. El valor pronóstico de la FAK expresión en el cáncer de mama sigue siendo poco clara. En cuanto a otros tipos de cáncer, tres estudios demostraron resultados diversos en el cáncer de colon, cáncer y carcinoma hepatocelular [15 - 17].

Estudios recientes han identificado HER2, un marcador pronóstico de la agresividad en el cáncer de mama, de influir en el comportamiento migratorio de las células del cáncer de mama in vitro a través de una novedosa vía de señalización de la fosforilación de FAK en 861 por tirosina quinasa aguas arriba de su c-Src [18, 19] . Estos hallazgos sugieren que la vía de señalización Her-2/neu pueden influir en la migración y la metástasis de cáncer de mama a través de la activación de las células Src / FAK vía de señalización. Hay varios de los objetivos de la FAK como Ras-ERK cascada de señalización, que se activa por extracelular, y con frecuencia ligandos mitógenos resultados en el aumento de la proliferación celular y la malignidad in vitro e in vivo [20, 21]. FAK también impactos en el phosphotidylinositol-3-kinasa (PI3K) / Akt-vía de señalización que desempeña un papel central en la tumorigénesis [22, 23]. En ganglios negativos de cáncer de mama, ya hemos demostrado que Akt activado pronóstico es un parámetro [24].

El objetivo del presente estudio fue evaluar la importancia pronóstica de la expresión de FAK ganglios negativos de cáncer de mama. Además, el presente informe fue diseñado para investigar la correlación de FAK expresión con dos importantes vías de señalización corriente abajo, y Akt Erk1 / 2, y para dilucidar su relación con la vía de señalización HER2.

Materiales y métodos
Los pacientes

El presente estudio participaron 162 pacientes con cáncer de mama (edad media, 59 años) del Departamento de Ginecología de la Universidad de Duisburg-Essen, Alemania, que se sometieron a cirugía y terapia adyuvante más entre 1989 y 1996. Completar la historia clínica y el seguimiento de la información se dispone en todos los casos. El estado de los ganglios linfáticos negativos fue confirmado por la disección axilar. Todo el material quirúrgico se fijó en formalina al 4% y procesan rutinariamente. Los tumores fueron clasificados de acuerdo con el sistema de pTNM (sexta edición), y se calificaron de acuerdo a Elston y Ellis [25]. Veintisiete de los 162 pacientes murieron durante el seguimiento, la causa de la muerte se desconoce en dos casos. Un total de 19 pacientes que murieron de cáncer de mama, y seis pacientes fueron excluidos de los análisis de supervivencia de haber fallecido a causa de otras, ya sea benigna o el cáncer de las enfermedades. El análisis estadístico se basó en un seguimiento medio plazo de 7,48 años. El cuadro 1 resume los clinicopathological parámetros de este estudio.

Inmunohistoquímica

Los anticuerpos primarios utilizados en este estudio se presentan en la Tabla 2. La inmunohistoquímica se realizó en secciones de parafina 5 μ m de espesor. La fosfatasa alcalina anti-fosfatasa alcalina método fue utilizado para la demostración de anticuerpos. Antígeno de recuperación se llevó a cabo con 0,01 M buffer citrato a pH 6,1 durante 20 min (fosfato Akt anticuerpos), de 40 min (fosfato ERK1 / 2) y 20 min (FAK, fosfato Src Tyr-215 y fosfato Src Tyr-416) en un baño de agua caliente (95 ° C). Los anticuerpos se incubaron durante la noche en una cámara de humidificado a 4 ° C. Se incluyeron controles positivos en la tinción de cada serie. No se observó tinción significativa en el uso de controles negativos inmunoglobulina ratón que sustituye a la primaria de anticuerpos. El DAKO HerceptTest ™ (DakoCytomation, Glostrup, Dinamarca) y un anticuerpo policlonal HER2/ErbB2 en una dilución de 1:50 (anticuerpos policlonales de conejo; Señalización Cell Technology, Beverly, MA, EE.UU.) se han utilizado para la detección de la expresión de la proteína HER2. El receptor de estrógeno (ER) estado de los tumores se determinó utilizando un monoclonal anti-anticuerpos humanos que se describió anteriormente [24].

Evaluación inmunoticción
ER y la proteína HER2 estado

El Her-2/neu se realizó de acuerdo con el sistema de evaluación de la HerceptTest ™. Para el análisis estadístico, negativo (DAKO puntuación de 0 y 1 +) y positivos (DAKO Resultado 2 + y 3 +) se crearon grupos. Un tumor se considera ER-negativo si ninguno o menos del 10% de las células del tumor mostró débil o desaparecidos inmunoticción nuclear.

Western blot

Total de la proteína celular de los siete representante humanos congelados cáncer de mama se extrajeron muestras en buffer de lisis y la concentración de proteínas se midió a cargar cantidades iguales de proteínas. Cada carril constaba de 50 μ g de proteína, y fue fraccionado por electroforesis en tamaño, el 10% geles de poliacrilamida-SDS y electrotransferred a una membrana de fluoruro de polivinilideno con un tanque de secante sistema. Después de la tinción de las membranas con rojo Ponceau reversible solución para confirmar la igualdad de proteína de la carga, las membranas fueron bloqueadas con 5% seco lácteo no graso en solución salina tamponada de Tris-durante 1 hora a temperatura ambiente. Las membranas fueron incubadas con el anticuerpo anti-HER2/ErbB2 (HER2/erbB2 anticuerpo policlonal de conejo, 1:1000; Señalización Cell Technology, Inc), anti-FAK fosfato de anticuerpos (Tyr-861, anticuerpo policlonal de cabra, 1: 50; Santa Cruz Biotechnology, Inc, Santa Cruz, CA, EE.UU.) y anti-fosfato Src anticuerpos (Tyr 215, el anticuerpo policlonal de conejo, 1:2000; Sigma-Aldrich, Inc, St Louis, MO, EE.UU.) para 16 horas a temperatura ambiente. Después de incubar la membrana durante 1 hora con anti-rabbit/donkey cabra cabra de anticuerpos anti-conjugado con peroxidasa de rábano, el complejo antígeno-anticuerpo se visualiza por quimioluminiscencia (Amersham Biosciences, Piscataway, NJ, EE.UU.).

Análisis estadístico

FAK, fosfato Erk1 / 2, Her-2/neu, phosph-Src Tyr-215/416 y ER immunostainings fueron evaluadas por un grupo de patólogos (KJS, FG, JWO, DE) en una prueba ciega-sin conocimiento de la moda El resultado clínico. En los casos de desacuerdo, las diapositivas fueron evaluadas por dos patólogos y se adoptó la decisión definitiva. Dos de los autores evaluaron el porcentaje de fosfato AKT-positivas las células tumorales y de la media del porcentaje de los dos se utilizó para el análisis estadístico. Tinción de las puntuaciones de ambos fosfato Akt anticuerpos (Santa Cruz Inc Biotecnología y Tecnología de Señalización Celular Inc) reveló un alto, significativo concordancia interobservador (r de Pearson = 0,671, P <0,001).

Los resultados obtenidos de fosfato Akt inmunoticción realizó con el anticuerpo de Santa Cruz presenta una menor tinción de fondo, y se utilizaron para el análisis estadístico. Todos los datos se convierten a un PC y estadísticamente analizados mediante el SPSS versión 10 para Windows (SPSS Inc, Chicago, IL, EE.UU.). Relaciones entre variables ordinales utilizando dos colas análisis de chi-cuadrado (o la prueba exacta de Fisher cuando el número de pacientes fue pequeño). La relación entre FAK expresión y el porcentaje de fosfato Akt-positivas las células tumorales se determinó a través de la prueba de Kruskal-Wallis. Las curvas de supervivencia global se calcula utilizando el método de Kaplan-Meier, y las diferencias en las curvas de supervivencia se compararon mediante la prueba de log-rank. Western blot resultados fueron digitalizadas con imágenes Master software de Amersham Biosciences.

Resultados
El análisis inmunohistoquímico de FAK

Tinción resultados se obtuvieron a partir de los 162 casos. En el epitelio mamario normal, a falta de una débil expresión FAK se detectó en la membrana celular y en el citoplasma. FAK fuerte sobreexpresión se detectó en 30 pacientes (18,5%), intermedios tinción en 119 pacientes (73,5%) y negativo en la tinción de 13 pacientes (8%). Superior FAK expresión se asoció significativamente con una peor diferencia de grado. No se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre los casos con diferentes tamaños de tumor o diferentes tipos de tumores (Tabla 1]. La intensidad de la tinción de un terreno adyacente en el componente es igual o más fuerte que la de los tumores invasivos, con sólo una muestra más débil que muestran una tinción FAK en el componente in situ que en el correspondiente carcinoma invasivo (Fig. 1].

Correlación entre la expresión y la supervivencia FAK

El impacto de la FAK expresión y clinicopathological características de la supervivencia de los pacientes fue evaluado en forma univariada de Kaplan-Meier de análisis de supervivencia. Con excepción de gradación histológica (P = 0,005), la condición de ER (P = 0,0033) y la activación de Akt (P = 0,0383), ninguno de los otros parámetros investigados - incluyendo FAK expresión (independientemente de expresión ER) o estado HER-2/neu -- Resultó ser de importancia pronóstica en los ganglios negativos de cáncer de mama examinados.

La correlación de la expresión de la proteína FAK con la condición de HER-2/neu, ER situación y fosfato Src Tyr-215 y fosfato Src Tyr-416 sobreexpresión

Un total de 159 tumores se analizaron para HER-2/neu la expresión de la proteína: 59 tumores (37,1%) fueron clasificados como negativos (0), 56 tumores (35,2%) como negativos (1 +), 21 tumores (13,2%) como Débilmente positiva (2 +) y 23 tumores (14,5%) como fuertemente positiva (3 +). Los tumores con un puntaje de 2 + y 3 + se define como Her-2/neu-positive. Un total de 51,7% de los tumores clasificados como muy positivo-FAK expuesto sobreexpresión de la proteína Her-2/neu, sino que los tumores intermedios clasificados totalizaron sólo 24,5% de los tumores Her-2/neu overexpressing. Todos de la FAK-negativos fueron los tumores Her-2/neu-negative. El estado ER se obtuvo de 152 tumores. El noventa por tumores (59,2%) mostraron una significativa expresión ER que 62 tumores (40,8%) fueron clasificados como negativos.

El análisis estadístico reveló una relación significativa de los elevados FAK expresión (P = 0,001) con sobreexpresión de Her-2/neu (2 + y 3 +; Cuadro 3], pero no con la condición de ER. Fosfatado Src Tyr-215 tinción se obtuvo de 137 pacientes y fosfato Src Tyr-416 tinción se obtuvo de 140 muestras. Del tejido normal del seno no presentan ninguna fosfato Src Tyr-215 inmunoticción. Membranosa fosfato Src Tyr-416 inmunoticción sporadical se observó en células epiteliales. Ambos carecen de células mioepiteliales fosfato Src Tyr-215 y fosfato Src Tyr-416 inmunoticción. Muestras de tejido tumoral de las restantes muestras no estaba disponible debido a la falta de material de parafina. El análisis estadístico reveló una significativa correlación directa con la sobreexpresión de FAK fosfato Src Tyr-215 tinción resultados (P = 0,021) pero no con fosfato Src Tyr-416 tinción resultados (Tabla 3]. Por otra parte, la positiva fosfato Src Tyr-215 tinción se asoció significativamente con sobreexpresión de HER2 (P = 0,011), mientras que fosfatado Src Tyr-416 no fue. Representante coloraciones de inmunohistoquímica se muestran en Figs 2 y 3.

Correlación entre la expresión y la FAK Akt / activación de ERK

Del tejido normal del seno reveló principalmente un citoplasmáticos Akt-patrón de tinción, con un bajo porcentaje de células positivas teñidas nuclear en el tejido mamario normal, de 28%. Prominentes nucleares y citoplasmáticos parte fosfato Akt inmunoreactividad fue observado en las células tumorales. Tinción heterogeneidad se manifiesta de vez en cuando en el tumor invasivo frente. El porcentaje de fosfato AKT-positivas núcleos muestras tumorales en el rango entre 0% y 85%. Tumores con más de un 45% de núcleos positivos se clasificaron como fosfato Akt-positivos.

Erk1 / 2 inmunohistoquímica de muestras tumorales reveló inmunoticción nuclear fuerte, y en parte inmunomarcación citoplasmática, mientras que los no-tejido neoplásico sólo ocasionalmente reveló una tinción débil. Similar a fosfato Akt, heterogéneo inmunoticción de fosfato ERK1 / 2 se detectó en el frente de tumor invasivo. Fosfato-Akt positivos clasificados los tumores presentan una mayor intensidad de FAK inmunoticción con más frecuencia (P <0,001) que el fosfato Akt-clasificados tumores negativos.

No se observó correlación entre los diferentes FAK inmunoticción resultados y fosfato ERK1 / 2 inmunoticción resultados (P = 0,108) (Tabla 3]. El análisis estadístico reveló una significativa correlación directa de las diferentes intensidades de FAK inmunoticción con el porcentaje de fosfato Akt-positivas teñidas las células tumorales (P <0,001).

Correlación entre la sobreexpresión de la proteína HER2 y la fosforilación de FAK en Tyr-861 en el oeste de blot

Seguidamente, analizó la relación de sobreexpresión de HER2 con los niveles de fosfato Src Tyr-215, fosfato FAK Tyr-861 y el total de FAK utilizando siete muestras de los frescos-congelados de tejido de cáncer de mama. De las siete muestras analizadas, cuatro tumores con altos niveles de HER2 exhibió un aumento de los niveles de fosforilación de la tirosina FAK en 861 en comparación con los tumores sin sobreexpresión de HER2 (P = 0,01; Fig. 4]. El aumento del total de FAK y fosfato Src Tyr-215 fue detectado en el HER2 overexpressing tumores, pero no alcanzó significación estadística. Estos resultados aportan pruebas de que la HER / FAK Tyr-861 vía se activa en el cáncer de mama humano.

Discusión

Varios estudios han demostrado upregulation de FAK expresión en los tumores malignos, incluidos el cáncer de mama, pero el valor pronóstico de la FAK expresión en cáncer humano sigue siendo poco clara. De los tres estudios que han analizado este, un estudio niega el valor pronóstico de la FAK en los adenocarcinomas de colon [16], mientras que los otros dos estudios han proporcionado pruebas para el valor pronóstico de immunohistochemically detectado FAK expresión en el carcinoma escamoso de esófago y en Carcinoma hepatocelular, respectivamente [15, 17]. El presente estudio es el primero en aclarar la importancia pronóstica de la expresión FAK en una cohorte de 162 invasoras ganglios negativos casos de cáncer de mama a largo plazo con seguimiento. Nuestros resultados demuestran que la sobreexpresión FAK no predecir el resultado en los pacientes este ajuste, aunque, escamosa similar a los cánceres de esófago, los niveles de FAK expresión más pobres fuertemente correlacionada con la diferenciación del tumor [17].

FAK es una proteína quinasa nonreceptor participan en la señalización mediada por la integrina que tiene un profundo impacto en la proliferación celular, la supervivencia y la migración. Uno de los objetivos es la vía de señalización PI3K/Akt. En el presente estudio se encontró una asociación significativa de los elevados FAK expresión con la fosforilación de Akt apoyo de la idea de que la Akt puede ser un blanco de abajo FAK señalización mediada [27]. Sin embargo, aunque la activación de Akt se asocia con un peor pronóstico en nuestro estudio de cohortes, FAK niveles de expresión no lo son. Esto puede ser debido a la función central de Akt en la tumorigénesis, donde una serie de estímulos y de las vías, además de contribuir a la FAK punto final común de una mayor actividad de Akt.

Akt, también conocido como proteína quinasa B, es una serina / threonine proteína quinasa que se ha demostrado que la regulación de las señales de supervivencia celular en respuesta a una diversidad de las señales generadas por los factores de crecimiento, citocinas y ras oncogénico. Alternativas de activación de los mecanismos de Akt además del factor de crecimiento mediada por la estimulación PI3K son mutaciones de PTEN inactivaciones o activación a través de la integrina-quinasa vinculadas [28 - 30]. La diferencia en la importancia pronóstica entre Akt FAK y pueden, por tanto, no es de extrañar. Varios estudios han demostrado upregulation de FAK en el cáncer humano incluido el cáncer de mama y han sugerido que la sobreexpresión FAK es un evento temprano en la tumorigénesis [13, 14]. Nuestros datos apoyan esta hipótesis como todos (menos uno) de los carcinomas in situ adyacente al cáncer invasivo expuesto FAK sobreexpresión. Curiosamente, en cada espécimen analizado el cáncer adyacentes preinvasiva mostraron un componente de igual o incluso mayor que la FAK inmunoticción correspondiente carcinoma invasor.

En estudios recientes, Vadlamudi humanos y colegas utilizaron líneas de células de cáncer de mama in vitro para establecer una nueva ruta de señalización de HER2, fosfato Src Tyr-215 y fosfato FAK Tyr-861, que aumente la motilidad celular [18, 19]. Los autores mostraron que heregulin inducida por la activación HER2 dado lugar a la fosforilación de la tirosina FAK en 861, mientras que seis muestras de tumor de mama exhiben mayor nivel de fosfato Src Tyr-215 en HER2 neu-overexpressing cánceres de mama. A partir de estos datos in vitro es tentador postula que el HER2 influye en la metástasis del cáncer de mama en vivo a través de una vía similar.

Para la prueba de la existencia de esta novedosa vía en un gran cohorte de cáncer de mama de tejidos humanos evaluamos total de la proteína FAK y fosfato Src Tyr-215 expresión, así como fosfato Src Tyr-416 por la expresión inmunohistoquímica. Asimismo, hemos investigado los niveles de fosfato FAK Tyr-861, fosfato Src Tyr-215 y Her-2/neu en un conjunto de siete de los recién congelado tejidos de cáncer de mama utilizando occidental blot. Nuestros resultados apoyan la hipótesis de que los tumores HER2-overexpressing muestran niveles más altos de fosfato FAK Tyr-861, sino también del total de los niveles de FAK. Esto también es apoyado por la inmunohistoquímica datos, cuando los niveles de expresión de la proteína Her-2/neu coinciden con la expresión de la proteína FAK. Curiosamente, el aumento de los niveles de fosfato Src Tyr-215, pero no de fosfato Src Tyr-416 se asociaron significativamente con sobreexpresión de HER2, el apoyo a la función de un activatory Src Tyr-215 fosforilación como intermediarios entre los HER2 y FAK señalización.

Aunque Src comprende varios sitios de fosforilación, la fosforilación de la tirosina tirosina 215 y no 416, el «clásico» de la fosforilación activatory sitio, que parece ser esencial para la activación de FAK a través de HER2 [19]. Nuestros datos confirman la especificidad de esta vía como src fosforilación en tirosina 416 no se asoció ni con sobreexpresión de HER2. El presente estudio fue diseñado para investigar esta novedosa vía de señalización en vivo a través de un enfoque de inmunohistoquímica permite la determinación de HER2 y la expresión de la proteína FAK.

Un reciente estudio identificó frecuentes polysomic pautas para el cromosoma 1, el cromosoma 8 y el cromosoma 17 que son indicativos de una mayor malignidad tumoral en el cáncer de mama [31]. Como la quinasa de adhesión focal y el gen Her-2/neu se encuentran en el cromosoma 8 y el cromosoma 17, respectivamente, se puede concluir que tal polysomic causa una pauta combinada HER2/FAK sobreexpresión de la proteína. Sin embargo, la determinación de las posibles causales subyacentes a las alteraciones genéticas, debería ser un tema de una investigación más a fondo.

Nuestros resultados, proponemos que entre los muchos efectos biológicos de la sobreexpresión de Her-2/neu la activación de Akt supervivencia de la vía a través de la FAK Tyr-861-Src Tyr-215 vía podría contribuir a la conducta agresiva de los más Her-2/neu-overexpressing Cánceres de mama.

En resumen, FAK sobreexpresión no es un marcador pronóstico en esta serie de 162 ganglios negativos de cáncer de mama. Esto puede ser debido a la composición de nuestra cohorte, que contiene principalmente las primeras etapas de cáncer sin metástasis en los ganglios linfáticos. Estudios recientes demuestran un mayor nivel de expresión en FAK colorrectal metástasis hepáticas que en el tumor primario, y presentó pruebas de un upregulation de proteína FAK en el cáncer hepatocelular con portal de la invasión [15]. No obstante, FAK sobreexpresión de la proteína Her-2/neu coincide con sobreexpresión HER2 y puede mediar en la señalización a través de Src, lo que resulta en la activación PI3K/Akt. Estos datos podrían contribuir a la comprensión de cómo la sobreexpresión de Her-2/neu en el cáncer de mama afecta a humanos malignidad tumoral y las metástasis (Fig. 5]. Debido al número relativamente pequeño de las muestras de cáncer de mama que muestran sobreexpresión de la proteína FAK en la cohorte, sin embargo, estos prometedores resultados tienen que ser confirmados en las cohortes más grandes.

Abreviaturas

ER = receptor estrogénico; ERK = extracelular quinasa regulada; FAK = kinasa de adhesión focal; PI3K = phosphotidylinositol-3-quinasa.

Conflicto de intereses

No ha habido antes de la publicación del contenido de este estudio. Este documento no ha sido sometido a ninguna otra revista. No existe una relación financiera que podría dar lugar a conflictos en relación con el contenido de este estudio. El documento ha sido leído y aprobado por todos los autores. Los autores declaran que no tienen intereses en competencia.

Contribuciones de los autores

KJS llevó a cabo la evaluación primaria de tinción inmunohistoquímica, realizó el análisis estadístico y escribió el artículo. FG, y JW PARA llevó a cabo la evaluación secundaria tinción inmunohistoquímica para descartar interindividual observador discrepancias. RC y RK proporcionado los datos clínicos. BL contribuido de manera sustancial a la concepción y diseño del estudio y la redacción del manuscrito. KWS realiza revisión crítica del manuscrito de importante contenido intelectual. HAB siempre administrativa, técnica y material de apoyo y supervisión, y se analizaron los datos mancha occidental. Todos los autores leído y aprobado el manuscrito final.

Agradecimientos

La asistencia técnica de Dorothe Möllmann y Caroline Stang Se agradece. Esta labor fue apoyada por el fondo de investigación local (IFORES) de la Universidad de Essen.