Journal of Inflammation (London, England), 2005; 2: 1-1 (más artículos en esta revista)

Represión de la acumulación de neutrófilos en ratones por la aplicación cutánea de aceite esencial de geranio

BioMed Central
Naho Maruyama (sabe@main.teikyo-u.ac.jp) [1], Yuka Sekimoto (sabe@main.teikyo-u.ac.jp) [1], Hiroko Ishibashi (sabe@main.teikyo-u.ac . Jp) [1], Shigeharu Inouye (sabe@main.teikyo-u.ac.jp) [1], Haruyuki Oshima (sabe@main.teikyo-u.ac.jp) [2], Hideyo Yamaguchi (sabe @ Main.teikyo-u.ac.jp) [1], Shigeru Abe (sabe@main.teikyo-u.ac.jp) [1]
[1] Teikyo University Institute of Medical Mycology, 359 Otsuka, Hachioji, Tokyo 192-0395, Japan
[2] Departamento de Bioingeniería de la Facultad de Tecnología, la Universidad de Teikyo, 1-1, Toyosato-dai, Utsunomiya, Tochigi 320-0003, Japón

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Resumen
Antecedentes

Estudios anteriores sugirieron que los aceites esenciales suprimida la adhesión respuesta de los neutrófilos humanos in vitro y que la aplicación intraperitoneal de aceite de geranio suprimida la acumulación de neutrófilos en la cavidad peritoneal in vivo. Por lo general, los aceites esenciales se aplican en la piel a través de la aromaterapia en los síntomas inflamatorios. El objetivo de este estudio es evaluar los efectos de la aplicación cutánea de los aceites esenciales en la acumulación de neutrófilos en los sitios inflamatorios en la piel de ratones.

Métodos

La inflamación y la acumulación de células inflamatorias fue inducida por la inyección de curdlan, un (1 → 3) - β-D-glucano en la piel o la cavidad peritoneal de los ratones. Los aceites esenciales se aplican en piel de los ratones de inmediato y 3 horas después de la inyección intradérmica de curdlan. La piel con lesión inflamatoria fue cortado 6 horas después de la inyección de curdlan, y el homogeneizado se utilizaron para la mieloperoxidasa (MPO: un marcador de la enzima de neutrófilos gránulo) ensayo.

Resultados

La OPG actividad de la lesión de la piel inducido por curdlan fue suprimida dosis-dependiente de la aplicación cutánea de aceite de geranio. Otros aceites, como lavanda, el eucalipto y el árbol de té aceites también suprimida la actividad, pero sus actividades parecen más débiles que geranio. Juniper petróleo no reprimir la actividad

Conclusión

Cutaneous aplicación de los aceites esenciales, especialmente de aceite de geranio, puede suprimir el síntoma inflamatorio con acumulación de neutrófilos y edema.

Antecedentes

Aromaterapia es una medicina popular utilizando aceites esenciales. Recientemente, el uso clínico de los aceites esenciales a nivel mundial se ha expandido para incluir la terapia contra diversos tipos de enfermedades inflamatorias, como la alergia, el reumatismo y la artritis. Estas actividades han sido reconocidos principalmente a través de la experiencia clínica, sobre todo a través de la piel mediante la aplicación de masajes y pomada, pero ha habido relativamente poca investigación científica sobre sus acciones biológicas.

Varios autores han sugerido que el té árbol [1, 2] y de los aceites de lavanda [3] reprimidas síntomas alérgicos a través de la supresión de la liberación de histamina [4, 5], y la producción de citoquinas [6] in vitro e in vivo. Además, en humanos, la piel aplicación de árbol de té se informó de los aceites para reprimir el edema provocado por la inyección intradérmica de histamina [7]. Sin embargo, muy pocos informes [8, 9] se encuentran disponibles en el efecto inhibidor de aceites esenciales en la acumulación de células inflamatorias, que es un personaje reconocido histológico en enfermedades inflamatorias crónicas.

En documentos anteriores, que informó de que los aceites esenciales: hierba de limón, geranio y decir suprimida la adhesión respuesta de los neutrófilos humanos in vitro [10], y que la administración intraperitoneal de aceite de geranio a ratones reducido de neutrófilos reclutamiento en la cavidad peritoneal inducida por una quimiotaxis Agente, la caseína de inyección in vivo [9]. Dado que los aceites esenciales se aplican con frecuencia a través de la piel en aromaterapia para los síntomas inflamatorios, que considera que los efectos anti-inflamatorios cutáneos de la aplicación de estos aceites debe ser investigado en los experimentos con animales para obtener prácticamente valiosos conocimientos en este campo. En el presente estudio se investigó el efecto in vivo de la piel se aplica aceites esenciales, en especial el petróleo geranio, a reacciones inflamatorias en ratones incluyendo la acumulación de neutrófilos en la piel, que fue inducido por curdlan, una lineal (1 → 3) - β - D-glucano conocido como un estimulante sustancia común en los hongos.

Métodos
Aceites esenciales

Los aceites esenciales utilizados se enumeran en el cuadro 1 con su fabricante y principal mandantes. Cuadro 1 también indica la literatura referencias que muestran el uso clínico relacionado con síntomas inflamatorios [11 - 13]. Los aceites esenciales se compraron de Hyperplants, Ltd (Tokio, Japón). La constitución del aceite de geranio se determinó por cromatografía de gases en este laboratorio [14] utilizando un aparato de GC (Modelo 353B, GL Ciencias, Tokio) equipado con un DB-5 columna (0,5 mm × 30 m; J & W Científico, Folsom, LA , EE.UU.), y era la que contienen alrededor de 24% β-citronellol, el 10% citronellyl formato y el 7% geraniol y otros.

Para la inyección intraperitoneal, estos aceites esenciales son diluidos a 2,5, la solución al 5% por el 2,5% dimetil sulfóxido (DMSO) en solución salina y 50 μ l de Tween 20 se añadió a 4 ml de aceite esencial de la solución. Para la aplicación cutánea, cada aceite esencial se diluye a 5, 10, 20 y 50% en DMSO.

Agentes

Curdlan, un (1 → 3) - β-glucano purificado de la preparación de líquidos de la cultura Alcaligenes faecalis, fue comprado a Wako Pure Chemical Industries, Ltd (Osaka, Japón), y suspendido en 10 mg / ml de solución salina para la inyección intradérmica Y en 5 mg / ml para inyección intraperitoneal. Hexadecyltrimethylammonium bromuro (HTAB), la mieloperoxidasa (MPO), y tetramethylbenzidine (TMB) fueron adquiridos de Sigma-Aldrich Japón (Tokio). Polioxietileno (20) sorbitano monolaurato (Tween 20) fue de Wako Pure Chemical Industries, Ltd. Inyección prednisolona (10 mg / ml) fue de Mitaka farmacéuticos, Ltd (Tokio). Dulbecco's de búfer fosfato salino (PBS) fue de Invitrogen Corp (Carlsbad, CA, EE.UU.) y almacenados a 4 ° C. Diff-Quik fue de Reactivos Internacional Corp (Hyogo, Japón). Geraniol y linalool eran de Wako Pure Chemical Industries, Ltd. Terpinen-4-ol y β-citronellol eran de Tokio Kasei Kogyo Co, Ltd (Tokio). Cabello removedor, anchone ® fue de Imju Co, Ltd (Tokio).

Animales

Todos los experimentos con animales se realizaron de acuerdo a las directrices para el cuidado y uso de animales aprobado por la Universidad de Teikyo. Seis semanas de edad, las mujeres ratones ICR (Charles River Japón, Inc, Kanagawa, Japón) se utilizaron para todos los experimentos con animales salvo la utilización de 6 semanas de edad, las mujeres HR-1 ratones sin pelo (Hoshino animales de laboratorio, de Saitama, Japón). El fotoperíodos se ajustaron a 12 horas de luz y 12 h oscuridad cotidiana, y la temperatura ambiental se mantuvo constante a 21 ° C. Los ratones fueron mantenidos en jaulas de los animales y la vivienda 4-6 ad libitum se les dio acceso a los alimentos y el agua.

Acumulación de leucocitos en la cavidad peritoneal

Pieles en la región dorsal de ratones (n = 5), de aproximadamente 20 × 50 milímetros cuadrados, se retiró en el día -3. Los animales llevaban el cuello collares de -2 en el día para evitar su lamiendo de los aceites esenciales de la piel. En el día 0, 200 μ l de curdlan suspensión (5 mg / ml) fue inyectado intraperitonealmente. Un grupo control negativo de los ratones fueron inyectados con 200 μ l de solución salina en vez de curdlan suspensión. Inmediatamente y 3 horas más tarde, 100 μ l de 20% de aceite de geranio en DMSO cayó en la piel dorsal y suavemente repartidas en la zona de pieles de ser eliminadas mediante un difusor de vidrio. Para determinar el número de leucocitos, los ratones fueron sacrificados con dióxido de carbono 6 Horas curdlan después de la inyección. Tres ml de PBS, se inyecta en su cavidad peritoneal, y 2 ml de exudados fueron tomados de la cavidad para recoger los leucocitos. Después de la centrifugación a 350 × g a 4 ° C durante 5 min, el precipitado se suspendió en 2 ml de PBS con 10% de calor-suero de ternera fetal inactivado (PBS solución). El número de leucocitos se midió por un contador eléctrico de células; Celltac (Nihon Kohden Corporation, de Tokio). Esta suspensión de leucocitos se utiliza para la tinción de Diff-Quik y MPO ensayo que se describen a continuación.

Tinción de Diff-Quik

Neutrófilos recuperado de la cavidad peritoneal se fija sobre diapositivas de cristal por cytocentrifugation y teñidas por Diff Quik-tal y como se describe anteriormente [15]. En pocas palabras, la suspensión de leucocitos fue diluido a alrededor de 1 × 10 6 células / ml. Doscientos μ l de la suspensión se vierte en un tubo de plástico conectado a una diapositiva de cristal y cytocentrifuged en el 75 × g durante 5 min, la diapositiva gafas fueron manchados por Diff-Quik. El porcentaje y el número de neutrófilos se calculó contando el número de neutrófilos de más de 50 leucocitos / muestra.

Mieloperoxidasa (MPO) de ensayo para suspensiones de leucocitos

La OPG ensayo se basó en el método de De Young et al. [16] y en parte modificada. Un ml de la suspensión de leucocitos se centrifuga a 620 × g a 4 ° C por 2 min. Se suspende el precipitado en 1 ml de 80 mM buffer fosfato de sodio, pH5.4, un 0,5% HTAB (0,5% HTAB solución), la congelación-descongelación del producto 3 veces y se centrifuga a 1400 × g a 4 ° C durante 5 min. 30 μ l triplicado muestras de sobrenadante resultante se vierte en 96 y placas microtiter. Para ensayo, 200 μ l de una mezcla que contiene 100 μ l de buffer fosfato salino, 85 μ l de sodio 0,22 M buffer fosfato, pH5.4, y 15 μ l de 0,017% de peróxido de hidrógeno se han añadido a los pozos. La reacción se inició con la adición de 20 μ l de 18,4 mM TMB • 2 HCl en el 8% acuosa dimetilformamida. Las placas se agita y se incuba a 37 ° C por 3 min y luego colocado en hielo cuando la reacción se detuvo por otra parte a cada uno y de 30 μ l de acetato de sodio 1,46 M, pH3.0. La OPG valor se evaluó midiendo la absorbancia de las muestras a 620 nm (OD valor) y que se convierten en valores por MPO ratón. La OPG actividad fue expresada por valores relativos calculado por la siguiente fórmula: (OPG valor recuperado de los ratones tratados con aceite) / (OPG valor recuperado de control de ratones) × 100 (%)

Cuidado de la Piel preparación de los ratones con la inyección intraperitoneal de los aceites esenciales

Pieles en la región abdominal de los ratones (n = 5-6) fue retirado en el día -3. En el día 0, 50 μ l de curdlan suspensión (10 mg / ml) en solución salina intradermaly se inyectó en la piel abdominal de los ratones. Inmediatamente y 3 horas después de la inyección curdlan, 200 μ l de la solución diluida de aceite de geranio se inyectó por vía intraperitoneal. Una dosis de solución 2,5% correspondió a 5 μ l de aceite puro. El grupo de control de ratones se recibió 200 μ l de solución 2,5% DMSO. Ciento μ l / flanco × 2 de prednisolona se inyecta por vía subcutánea a otro activo grupo de control de ratones 1 hora antes de curdlan inyección, en lugar de aceite esencial. Todos los ratones fueron sacrificados con dióxido de carbono 6 Horas curdlan después de la inyección. Cuidado de la Piel fue cortado en una zona de 6 mm de diámetro, pesan y se colocan en 1,05 ml de 0,5% HTAB solución, y se almacena a -20 ° C hasta el ensayo. El promedio de peso de la piel se calculó como un parámetro de edema.

Cuidado de la Piel preparación de los ratones después de la aplicación cutánea de aceites esenciales o sus componentes

Pieles en la región abdominal y dorsal de ratones (n = 15 para 5-20 μ l de aceite de geranio en el experimento se muestra en la Fig 3 (b], n = 3-6 por otros experimentos), excepto pelo ratones (n = 4-5) fue Eliminado en el día -3. Los animales llevaban el cuello collares de -2 en el día para evitar su lamiendo aceites esenciales de la piel. En el día 0, 50 μ l de curdlan suspensión (10 mg / ml) en solución salina intradermaly se inyectó a los ratones. Inmediatamente y 3 horas más tarde, 100 μ l de solución de un designados concentración del aceite esencial o de sus componentes cayó en la piel dorsal y suavemente repartidas en la zona de pieles de ser eliminadas mediante un difusor de vidrio. Un 20% de la dosis de solución corresponden a 20 μ l de aceite puro. El grupo de control de ratones se aplicó 100 μ l de DMSO. Su piel preparativos se obtuvieron 6 horas después de la inyección curdlan como se ha descrito anteriormente.

Mieloperoxidasa (MPO) de ensayo para la piel homogenado

Congelados muestras fueron descongelados a temperatura ambiente y homogeneizada durante 45 segundos a 0 ° C por Polytron (Kinematica AG, Lucerna, Suiza). El homogeneizado se vierte en los tubos de muestreo y se centrifuga a 12000 × g a 4 ° C por 15 min. El resultantes se utilizan para MPO ensayo tal como se describe más arriba. La OPG valor por cada muestra se calculó la piel.

Análisis estadístico

Los resultados fueron expresados por la media ± desviación estándar. Todos los análisis estadísticos se calculó utilizando el software StatView. El análisis estadístico se realizó de la siguiente manera; Estudiantes t-test en la figura 3 (c], después de ANOVA para Dunnett Fig 2 (a], 3 (a, b], 4 y 5, y después de Tukey Kramer-ANOVA de la figura 1. Coeficiente de correlación de Pearson se calculó para Fig 6.

Resultados
Inflamación de la piel por la inyección intradérmica curdlan

La piel la respuesta inflamatoria inducida por la intradermaly inyectado curdlan (0,5 mg/50 μ l), se investigó por primera utilizando dos parámetros, la OPG homogeneizado valor de la piel y la piel de peso. La OPG valor y la piel peso de la lesión de la piel 6 horas después de la inyección curdlan fueron 4,54 ± 2,43 unidades / lesión de la piel y 22,5 ± 8,3 mg (n = 49), que fueron significativamente más elevadas que las de inyección de solución salina, 0,21 ± 0,14 unidades / piel Lesión y 8,9 ± 1,4 mg, respectivamente (n = 4). Esto indica que la inyección curdlan causado la acumulación de neutrófilos, que fue supervisado por aumento de la actividad de MPO, la piel y el edema, que se observó en la piel por el aumento de peso.

Correlación entre la mieloperoxidasa (MPO), la actividad y la acumulación de neutrófilos

Examinamos la acumulación de neutrófilos en la cavidad peritoneal después de la inyección curdlan microscópicamente y enzimáticamente utilizando MPO actividad. El efecto de la aplicación cutánea de aceite de geranio en estos cambios se observó.

Figura 1 (a] muestra el número de leucocitos y de células en los diferenciales de exudado peritoneal, que se determinaron mediante la tinción de Diff-Quik. Acerca de 3,66 ± 0,49 × 10 6 leucocitos fueron recuperados de la cavidad peritoneal de los ratones inducida por solución salina, y la inyección de 200 μ l curdlan solución de este número aumentó a 9,48 ± 1,78 × 10 6 células. Neutrófilos rara vez se observa en las células de solución salina peritoneal de los ratones inyectados y el mayor contenido de leucocitos en curdlan peritoneal de los ratones inyectados fue principalmente neutrófilos. La OPG valor de la preparación de leucocitos obtenido 6 horas después de la inyección intraperitoneal curdlan fue 5,36 ± 1,86 unidades / ratón, que fue significativamente mayor que la de los ratones sin curdlan (0,064 ± 0,026 unidades / ratón) (Fig. 1 (b)].

La Figura 1 muestra también que, en comparación con el curdlan control, la aplicación cutánea de aceite de geranio a estos ratones reducido de manera significativa el número de leucocitos y neutrófilos (Fig. 1 (a)], así como el valor OPG (Fig. 1 (b)].

Estos resultados indicaron que la inyección intraperitoneal de curdlan eran a la vez la acumulación de neutrófilos en la cavidad peritoneal y aumento de la MPO valor, y que la aplicación cutánea de aceite de geranio reprimidas ambos. Por lo tanto, confirmó que el MOP actividad corresponde al número de neutrófilos y de la actividad que MPO se puede utilizar como parámetro para este número.

Efectos de aceite de geranio en la inflamación inducida por la inyección intradérmica curdlan

Los efectos del aceite de geranio administrados por vía intraperitoneal o en piel de la inflamación inducida por la inyección intradérmica curdlan fueron examinados.

Al principio, el aceite de geranio es inyectado por vía intraperitoneal a ratones. Prednisolona se utilizó como control activo. Como se muestra en la Fig. 2 (a], la administración de 2 mg de prednisolona por ratón suprimido la actividad de MPO a 7 ± 3%. De manera similar, pero en menor grado, el 5 y el 10 μ l de aceite de geranio reducido de manera significativa la actividad de MPO a 30 ± 15 y 14 ± 10%, respectivamente.

Desde el examen histológico (Fig. 2 (b)], se observó claramente que la prednisolona reprimidas neutrófilos curdlan acumulado tras la inyección. Geranio aceite también suprimida esta acumulación, sin embargo, la represión no fue tan fuerte como por la prednisolona.

En el segundo experimento, se examinó el efecto de la administración cutánea de aceite de geranio. Como se muestra en la Fig. 3 (a], 20, 50 y 100 μ l ratón por la aplicación de aceite de geranio reduce significativamente la actividad de MPO (24 ± 14, 13 ± 1 y 19 ± 13%, respectivamente). En este experimento, se observó que los ratones que recibieron 50 y 100 μ l de aceite de geranio exhibido un comportamiento atípico (sedado con pérdida de la condición normal de movimiento activo) después de la segunda administración. Por lo tanto, la dosis de aceite de geranio prueba se redujo a 5, 10 y 20 μ l (Fig. 3 (b)] y mostraban importantes supresión de la actividad de MPO (63 ± 40, 56 ± 32 y 37 ± 23%, respectivamente) . Estos datos se muestra en la figura 3 (a] y 3 (b] indican que el aceite de geranio reprimir la actividad MPO en una forma dependiente de la dosis.

En el tercer experimento, el efecto similar de aceite de geranio en los ratones sin pelo fue examinado. En este experimento, el tratamiento de pelo removedor fue omitido. Figura 3 (c], muestra que la actividad de MPO en ratones sin pelo se redujo significativamente por la aplicación de geranio (32 ± 8%) como en el caso de las pieles de ser eliminadas ratones. Este indicó que el geranio suprimido la aplicación de pieles de la piel y eliminan la piel sin pelo del mismo modo normal, y el efecto de la quita-fue insignificante.

Efectos de la aplicación cutánea de diversos aceites esenciales

Se compararon los efectos de 10 μ l de diversos aceites esenciales (geranio, lavanda, árbol de té, eucalipto, y enebro) en contra de la actividad de MPO. Aunque todos los aceites de petróleo, excepto enebro redujo significativamente la actividad (Fig. 4], la actividad inhibidora de geranio de petróleo se estimó en más fuerte (34 ± 27%). Por otra parte, el aceite de enebro no reprimir la actividad significativamente (66 ± 7%).

Efectos de la aplicación cutánea de los componentes de los aceites esenciales

Se han comparado las actividades de los principales componentes de geranio, lavanda y aceites de árbol de té. Como se muestra en la Fig. 5, geraniol y terpinen-4-ol reducido la actividad de MPO (65 ± 23 y 68 ± 32%, respectivamente), pero no de forma significativa, y linalool y β-citronellol no reducía la actividad (126 ± 48 Y 89 ± 37%, respectivamente).

Correlación entre la actividad MPO y la piel de peso

Se midió el peso de la piel como un parámetro de edema para cada experimento. La correlación entre el peso y la piel MPO se examinó la actividad de todos los ratones de control y aplica todos los ratones con 20 μ l de aceite de geranio. Como se muestra en la Fig. 6, de la piel peso de cada ratón estrechamente correlacionada con la actividad de MPO (r = 0,757, p <0,0001).

El promedio de peso de la piel y la OPG valor fueron de 22,5 ± 8,3 mg y 4,54 ± 2,43 unidades / lesión de la piel en el control (n = 49), y 12,0 ± 3,7 mg y 1,16 ± 0,75 unidades / lesión de la piel para el geranio grupo (n = 26 ), Respectivamente. Esto indica que el aceite de geranio reprimidas tanto la acumulación de neutrófilos y edema inducido por curdlan.

Discusión

En este estudio, demostró que la aplicación cutánea de aceite de geranio (5-100 μ l) a los ratones reprimidas celular inducida por la inflamación curdlan forma dosis-dependiente, como la supervisión de la actividad de MPO cavidad peritoneal y la piel. Esta actividad represivas aceite de geranio parece muy potente en comparación con las de otros aceites esenciales: 10 μ l de lavanda, árbol de té, aceites de eucalipto y redujo significativamente la actividad, pero cada uno es más débil que la de aceite de geranio. Juniper petróleo no reprimir la actividad.

Se informó de que MPO, un marcador de la enzima gránulos de los neutrófilos, se puede utilizar como un parámetro de infiltración de neutrófilos en diversas inflamatoria experimentos con tejidos incluyendo piel [16 - 18]. Se confirmó aquí que el plan maestro de operaciones actividad está estrechamente relacionado con el número de neutrófilos, que se infiltraron en la cavidad peritoneal después de la inyección intraperitoneal de curdlan con o sin la administración de aceite de geranio. El examen histológico de la piel, en el que curdlan se inyectó 6 Horas antes, también mostró que el grado de infiltración de células inflamatorias (neutrófilos tal vez), al menos cualitativamente, correlacionado con el plan maestro de operaciones de valores de la piel homogeneizado. Estas observaciones indican la actividad de MPO puede utilizarse como un marcador de la acumulación de neutrófilos en nuestros experimentos.

Hasta donde sabemos, este es el primer informe que indica que experimental cutánea aplicación de los aceites esenciales, especialmente de aceite de geranio, efectivamente inhibe la acumulación de neutrófilos in vivo. Aunque algunos irritantes parece tener actividad antiinflamatoria, la acción del aceite de geranio no se puede explicar por tal manera, ya que el aceite de geranio no indujo la acumulación de neutrófilos por sí mismo que se informó anteriormente [9]. Recientemente, Brand et al. Informó de que el aceite del árbol de té inhiben la histamina inducida por edema [4], pero no cambió la infiltración de leucocitos en un modelo murino de dermatitis de contacto [1]. En nuestros resultados, la aplicación cutánea de 10 μ l de aceite de árbol de té disminuyó la actividad de MPO en curdlan-inyectado piel débilmente, pero significativamente (Fig. 4], aunque la administración intraperitoneal de petróleo no reprimir la acumulación de neutrófilos en la cavidad peritoneal [9] . Por otra parte, nuestro informe anterior mostró que el aceite de geranio de manera más efectiva la adhesión de neutrófilos reprimidas respuesta inducida por el TNF-α estimulación de aceite de árbol de té in vitro [10]. Todos estos hallazgos pueden indicar que el aceite de geranio tiene un tipo diferente de actividad represivas de la inflamación de la de aceite de árbol de té. Con el fin de obtener resultados concluyentes de las diferencias cuantitativas en las actividades anti-inflamatoria de los aceites esenciales, debemos examinar su actividad en una forma dependiente de la dosis y su biodisponibilidad sobre la base de su absorción por la piel.

Se utilizó curdlan, una lineal (1 → 3) - β-glucano, como un agente inflamatorio. Ya se ha informado de que curdlan causas locales de la inflamación y la acumulación de leucocitos polimorfonucleares induce [19], y que el número de neutrófilos en la cavidad peritoneal aumenta 6 horas después de la inyección intraperitoneal curdlan [15]. (1 → 3) - β-glucano es conocido para activar los complementos de la liberación C5a, un recuento de neutrófilos chemoattractant [20], y puede inducir la producción de citoquinas quimiotaxis a través de la interacción con los receptores tipo peaje-2,6 en macrófagos [21]. Por lo tanto, podemos suponer que curdlan puede inducir la acumulación de neutrófilos polysaccaride-a través de estos mecanismos de reconocimiento. Es posible que el aceite de geranio polysaccaride interfiere con estas medidas de reconocimiento, sin embargo, queremos señalar otra posibilidad: aceite de geranio puede suprimir la respuesta de neutrófilos en la acumulación de paso, ya que este aceite puede reprimir el reclutamiento de neutrófilos por caseína inyección in vivo que se informó anteriormente [ 9], y puede reprimir enérgicamente respuesta de los neutrófilos por TNF-α estimulación in vitro [10]. Los detalles de los mecanismos involucrados en la represión de la inflamación aún no se han aclarado.

Hemos probado el supresor de la actividad MPO respuesta de los principales constituyentes (5 μ l), de aceites esenciales, geraniol y β-citronellol (geranio), linalool (lavanda) y terpinen-4-ol (árbol de té). Geraniol y terpinen-4-ol aparentemente reprimido la actividad, pero los demás no. Así, geraniol, citronellol no β-, se piensa que es una activa componente del aceite de geranio. Por otra parte, linalool no mostró actividad, aceite de lavanda, si bien se redujo significativamente. Es posible que linalool no es un componente activo de aceite de lavanda. Nuevos exámenes sobre la actividad de varios otros componentes y sus combinaciones son necesarios para evaluar los principios activos de los aceites esenciales.

Cutaneaous la aplicación de aceite de geranio suprimida la actividad MPO forma dosis-dependiente. GC El análisis de la sangre 5 minutos después de la aplicación de aceite de geranio mostró picos de aceite de geranio como β-citronellol, indicó que algunos de los componentes del petróleo fueron absorbidos en la circulación de la sangre muy rápido (datos no presentados). Pensamos que la supresión de los aceites se realiza a través de la absorción por la piel, aunque también hay que tener en cuenta el efecto de la inhalación de aceites esenciales debido a su alta volatilidad. La OPG actividad utilizando ratones sin pelo también se reprimió a cerca de 30% de aceite de geranio, lo que indica que la represión no es la actividad interferido con el pelo removedor.

Debemos señalar que en estos experimentos, disolvente de aceite esencial de los tratamientos es DMSO. Se sabe que facilite la permeabilidad de algunas drogas. DMSO podrían modular los efectos de los aceites esenciales, a pesar de que informó de que la inyección intraperitoneal de aceites esenciales con el 2,5% DMSO como disolvente, que es relativamente más baja concentración de DMSO, redujo la acumulación de neutrófilos en el estudio anterior [9]. En experimentos adicionales, tenemos que examinar los efectos de los aceites esenciales que utilizan otros disolventes como aceites porteador.

En este estudio, que también examinó el efecto del aceite de geranio en el edema utilizando piel de peso, así como la actividad de MPO. Normal de la piel de peso fue de alrededor de 8,9 ± 1,4 mg y aumentó a 22,5 ± 8,3 mg por inyección curdlan. Esta diferencia indica el edema por la inflamación. Veinte μ l de aceite de geranio reducido el peso de 12,0 ± 3,7 mg, lo que indica que el petróleo firmemente suprime el edema inducido por curdlan inyección. Es bien sabido que el árbol de té y lavanda aceites reprimir el edema inducido por histamina [3, 4]. Como se muestra en la Fig. 6, edema está estrechamente correlacionada con la actividad de MPO, aceite de geranio y de la reducción de dos de ellos. El significado fisiológico de esta correlación debe aclararse.

En aromaterapia, la piel aplicación de los aceites esenciales a la escasez de partes del cuerpo o en un masaje de todo el cuerpo es popular y varios de estos aceites se utilizan como tratamiento terapéutico de los síntomas inflamatorios con acumulación de neutrófilos lesional: artritis reumatoide, aftas, y lesional bacteriana O infecciones por hongos [22]. En estos casos, la aplicación local de relativamente concentrada (más del 5%), los aceites de la lesión es efectiva. Pero masaje de cuerpo completo con una concentración relativamente baja (alrededor del 3%), de los aceites esenciales también se utiliza para algunos locales de las enfermedades inflamatorias. Estos usos clínicos de los aceites esenciales se han establecido tradicionalmente, pero sus eficacias farmacológicos no han sido plenamente confirmadas por la investigación científica. Los resultados aquí presentados sugieren que la aplicación sistemática de los aceites esenciales parece razonable, porque la acumulación de neutrófilos y el edema fueron reprimidas a través de la aplicación sistémica de aceite esencial de geranio en especial el petróleo, a pesar de que la concentración del aceite es mayor que la utilizada clínicamente. Esto sugiere que algunos aceites esenciales como el geranio puede suprimir los síntomas inflamatorios locales a través de la aplicación sistémica de piel en humanos.

El beneficio terapéutico de estos aceites esenciales y las funciones de la actividad antiinflamatoria en sus acciones terapéuticas es un tema urgente que se investigue.

Conclusión

Aplicación cutánea de varios aceites esenciales, en especial el petróleo geranio, a los ratones reprimidas celular inducida por la inflamación curdlan forma dosis-dependiente, como la supervisión de la actividad de MPO cavidad peritoneal y la piel. Esto sugiere que el uso de aceites esenciales de masaje aromaterapia Mayo suprime los síntomas inflamatorios relacionados con la acumulación de neutrófilos y edema.

Conflicto de intereses

Este trabajo fue apoyado en parte por una subvención del Fondo de Investigación de Medicina Kampo (Tokio) y una subvención (No.15590401) del Ministerio de Educación. Cultura, Deportes, Ciencia y Tecnología de Japón.

Contribuciones de los autores

NM participado en el diseño del estudio, llevado a cabo el estudio de los animales y análisis de GC, y escribió el manuscrito. YS y HO llevó a cabo el estudio de los animales y análisis de GC, y realizó el análisis estadístico. HI y HY ayudado para llevar a cabo el estudio de los animales. SI ayudado para llevar a cabo el análisis y el proyecto de GC el manuscrito. SA concebido del estudio, participó en su diseño y coordinación, y ayudó a llevar a cabo el estudio y escribir el manuscrito. Todos los autores leído y aprobado el manuscrito final.