Reproductive biology and endocrinology : RB&E, 2005; 3: 16-16 (más artículos en esta revista)

Lepidium meyenii (Maca), aumenta el tamaño de la camada de los ratones normales de mujeres adultas

BioMed Central
Ana C, Ruiz-Luna (09341@upch.edu.pe) [2], Stephanie Salazar (14251@upch.edu.pe) [2], Norma J Aspajo (07964@upch.edu.pe) [2], Julio Rubio (09008@upch.edu.pe) [2], Manuel Gasco (05931@upch.edu.pe) [2], Gustavo F González (iiad@upch.edu.pe) [1]
[1] Instituto de Investigaciones de la Altura, Universidad Peruana Cayetano Heredia, Lima, Perú
[2] Departamento de Ciencias Biológicas y Fisiológicas de la Facultad de Ciencias y Filosofía, Universidad Peruana Cayetano Heredia, Lima, Perú

Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons License (http://creativecommons.org/licenses/by/2.0], que permite el uso irrestricto, la distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que la obra original sea debidamente citada.

Resumen
Antecedentes

Lepidium meyenii, conocido como Maca, crece exclusivamente en los Andes del Perú a más de 4000 m de altitud. Se ha utilizado tradicionalmente para aumentar la fertilidad. Anteriores estudios científicos han demostrado que la maca aumenta la espermatogénesis y espermatozoides del epidídimo. El presente estudio fue dirigido a investigar los efectos de la Maca en varios parámetros de fertilidad de los ratones hembra en edad reproductiva.

Métodos

De mujeres adultas Balb / C ratones se dividieron al azar en tres grupos principales: i) grupo de los índices reproductivos, ii) Implantación sitios de grupo y iii) Evaluación de peso uterino en ratones ovariectomizadas. Los animales recibieron un extracto acuoso liofilizado de Maca Amarilla (1 g / Kg BW) o por vía oral como tratamiento de vehículos. Índices de fecundidad en el estudio, los animales recibieron el tratamiento antes, durante y después de la gestación. El índice de fertilidad, el índice de gestación, post-natal índice de viabilidad, la viabilidad índice de destete y el sexo fueron calculados. Se evaluó la maduración sexual en el sexo femenino en cachorros por la abertura vaginal (VO) día. En la implantación de estudio, las mujeres se revisaron para la implantación de sitios web en la gestación y el día 7 embriones fueron contados. En ovariectomizadas ratones, el peso uterino se registró al final del tratamiento.

Resultados

Lugares de implantación fueron similares en los ratones tratados con Maca y en los controles. Todos los índices reproductivos fueron similares en ambos grupos de tratamiento. El número de crías por cada presa en el momento del nacimiento y postnatal, en el día 4 fue significativamente mayor en el grupo tratado con Maca. VO día anterior se produjo como del tamaño de la camada fue menor. Maca no afectó VO día. En ovariectomizadas ratones, el tratamiento con Maca aumentó significativamente el peso uterino, en comparación con sus respectivos controles.

Conclusión

La administración de extracto acuoso de maca amarilla a los ratones hembra adulta aumenta el tamaño de la camada. Además, este tratamiento aumenta el peso uterino en ovariectomizadas animales. Nuestro estudio confirma por primera vez algunos de los usos tradicionales de la maca de mejorar la fertilidad femenina.

Antecedentes

Maca, crucíferas es una planta que crece exclusivamente entre los 4000 y 4500 msnm en los Andes Centrales del Perú [1]. El eje hipocotilo-raíz es la parte comestible de la planta, que se seca y se pueden almacenar en esta forma durante años. Este hipocotilo se ha utilizado durante siglos como nutrientes y por su potenciador de la fertilidad de la propiedad [2 - 4].

Los estudios científicos en ratas macho y ratones han demostrado que la administración oral de los extractos acuosos o etanólica de Maca hipocotilos mejora de la espermatogénesis [1, 5 - 7]. Además, la mejora de espermatozoides en los hombres se observó después de cuatro meses de tratamiento [8].

Estudios en los estudios revisados por la literatura científica sobre los efectos de esta planta nativa en el sistema reproductivo femenino son escasos. La única evidencia científica demostró que informó de Maca no modificó la tasa de implantación. En ese estudio, Maca fue mezclado en el alimento durante 30 días [9]. Por tal motivo, la dosis administrada no se pudo controlar.

El presente estudio fue investigar los efectos de un extracto acuoso de Maca en ratones hembra en edad reproductiva reproductiva de la mujer a través de varios índices, mediciones de peso uterino, el número de embriones implantados y la abertura vaginal (VO) día de la hembra con crías de una dosis fija Maca de administrarse a las presas.

Métodos
Animales

Tres meses de edad virgen de los ratones hembra Balb / C de la cepa obtenida de la Cámara de animales en el Instituto Nacional de Salud (NIH) en el Perú se utilizaron para este estudio. Los animales fueron divididos al azar en tres grupos principales: i) El primer grupo se utilizó para evaluar los índices de reproducción; ii) el segundo grupo de estudio estaba destinado a lugares de implantación y iii) el último grupo tuvo como propósito evaluar el efecto de la Maca en el peso uterino Ovariectomizadas en ratones.

Cada uno de los tres grupos principales se dividió en dos subgrupos: el grupo de control, que recibió 0,5 ml de agua destilada (vehículo) y el grupo tratado, que recibió el extracto acuoso liofilizado de Maca Amarilla oralmente por sonda. Este estudio se realizó de conformidad con la Universidad Peruana Cayetano Heredia Directrices y Ética en la Experimentación Animal.

Preparación del extracto acuoso de Maca

Secos Maca fue proporcionada por la empresa Santa Natura. El ecotipo utilizado para este estudio se Amarillo Maca. Maca se hipocotilos secas trituradas en un molino, diluido 1:3 w / v en agua destilada y hervida durante aproximadamente 2 horas. Después, se filtra y dejar a temperatura ambiente durante el enfriamiento. Extracto acuoso fue bloqueado en virtud de -70 ° C durante tres días y luego liofilizado. Un gramo de liofilizado Maca es equivalente a 2,19 g de maca seca hipocotilos. Liofilizado Maca fue diluida en agua destilada para obtener una dosis de 1 g / kg BW. Esta dosis se ha demostrado ser óptimo en un estudio dosis-dependiente [10].

Lugares de implantación

Mujeres ratones fueron tratados con extracto acuoso liofilizado de Maca Amarilla (1 g / Kg) o agua destilada (vehículo) por vía oral de 22-28 días (15 días antes de apareamiento y durante los siete primeros días del período de gestación). En el día 15 del tratamiento con Maca o vehículos, cada hembra de ratón fue acoplado con un solo resultado de la fertilidad masculina. La presencia de un tapón vaginal se consideró el primer día del embarazo. Las hembras fueron asesinados por dislocación cervical en el día 7 de la gestación y el útero se analizará para buscar lugares de implantación. Los embriones fueron contados y pesado.

Índices reproductivos

Ratones hembra que se administra por vía oral por sonda con agua destilada (vehículo) o extracto acuoso liofilizado de Maca (1 g / kg de peso corporal) durante 15 días antes del apareamiento, durante todo el período de gestación y 21 días después del nacimiento (período de lactancia). Se registró el peso corporal al día.

En el día 15 del tratamiento con vehículo o Maca, cada hembra de ratón estaba alojado con independencia del ciclo estral con la madurez sexual sin tratar de demostrar la fertilidad masculina. La presencia de una cópula tapón en la vagina es considerada como cópula con éxito y se consideró el primer día del embarazo. Para la confirmación del embarazo, los ratones fueron examinados por frotis vaginales para determinar la presencia de células etapa de diestro durante un período de 7 días después de la conclusión de un tapón vaginal.

Confirmación de la entrega, el número de cachorros se contabilizan. Ambos grupos de represas siguieron sus respectivos tratamientos durante todo el periodo de lactancia (21 días). El número de crías vivas en postnatal día 4 y 21, la VO día de las mujeres y los cachorros por sexo de ambos grupos se determinó también (fracción masculina).

Los siguientes índices fueron calculados reproductiva [11]: el índice de fertilidad, definida como las mujeres embarazadas n / n hembras con éxito cópula × 100; gestación índice, que se define como n de las hembras con crías vivas / n de las mujeres embarazadas × 100; posnatal viabilidad Índice, que se define como n º de cachorros vivos en el día 4 / No vivo de las crías × 100, y la viabilidad índice de destete, que se define como n º de cachorros vivos en el día 21 / n º de cachorros vivos en el día 4 × 100.

Ovariectomizadas ratones

Con el fin de evaluar un posible papel de Maca estrogénicos en el peso uterino, 3 meses de edad, los ratones fueron ovariectomizadas. Los animales fueron rasurados en la zona dorsal y la cirugía anestesiados con ketamide (40 mg / kg de peso corporal, ip). Un dorsal incisión se realizó y los ovarios fueron expuestos y eliminados. Tres meses después de la cirugía, 15 animales fueron expuestos en forma oral por sonda de agua destilada (n = 8; 0,5 ml de agua destilada) o amarilla Maca (n = 7; 0,5 g / kg de peso corporal) por un período de 42 días. Al final del tratamiento, los animales fueron sacrificados por dislocación cervical. Cuerpo uterino y húmeda se registraron pesos.

Análisis estadístico

Antes de los análisis, la normalidad de los datos se determinó a través de una muestra de Kolmogorov-Smirnov Test. De peso corporal, lugares de implantación, duración de la gestación y el tamaño de la camada variables se analizaron mediante t de Student. El análisis multivariado se utilizó para analizar la influencia de la Maca tratamiento en el número de crías y en la VO día. Reproductiva de los índices se analizó mediante el pareadas Proporción de prueba. Los datos se presentan como media ± SEM de datos sin distribución normal, como el día de apertura vaginal y el peso uterino fueron analizados utilizando el Test U de Mann-Whitney. Grupos se consideraron significativamente diferentes cuando P <0,05. Todos los cálculos y análisis estadísticos se generaron en STATA v 8.0 (Stata Corporation, College Station, TX, EE.UU.).

Resultados
Índices

Maca En ambos grupos de tratamiento y de control, el índice de fertilidad, el índice de gestación, el puerperio y el índice de viabilidad viabilidad índice de destete fueron similares entre los servicios de control y el grupo tratado con Maca (Tabla 1].

Peso corporal

En tanto la implantación y el estudio de los índices reproductivos estudio, el peso corporal no difirió significativamente entre el control y los grupos tratados con Maca. En el estudio de implantación, en el día 1, los pesos corporales fueron 34,68 ± 1,12 g en el grupo control y de 34,13 ± 0,62 g en el grupo tratado con Maca. Después de 17 días de tratamiento con extracto acuoso liofilizado de Maca Amarilla, el peso corporal fue similar a la observada en el grupo de control (grupo de control, 33,43 ± 1,18 g vs Maca grupo, 34,98 ± 0,72 g). Cambio de peso corporal entre el día 1 y el día 17 del tratamiento fue similar en los animales tratados y Maca en los controles (0,85 ± 0,30 vs -1,25 g ± 1,17 g, respectivamente).

En el estudio de los índices reproductivos, el peso corporal al día 1 de tratamiento con agua destilada (grupo control) fue 29,4 ± 0,57 g y con Maca fue 29,94 ± 0,82 g. En el día 15 de tratamiento, el peso corporal del grupo control fue de 30,77 ± 0,61 g, mientras que el grupo tratado con Maca mostró un peso corporal de 32,07 ± 1,27 g. No existieron diferencias entre los grupos de tratamiento en el día 1 o el día 15 se observaron.

Lugares de implantación

Los lugares de implantación fueron similares en el grupo tratado con Maca y los controles (11,56 ± 2,13 vs 9,67 ± 2,42, respectivamente).

La duración de la gestación

La duración de la gestación fue similar en el grupo tratado con Maca y el grupo control (19,88 ± 0,11 días y 19,92 ± 0,08 días, respectivamente).

Cachorros / Camada tamaño

La media de las crías en el parto y posnatal, en el día 4 en el grupo tratado con Maca fue mayor que sus respectivos controles (P <0.05) (Tabla 2]. El análisis multivariado mostró que el tratamiento con Maca aumento en el número de crías (3,18 ± 1,04; Coeficiente de regresión ± SE; P <0,05).

Relación de sexos

La fracción de las crías de sexo masculino en el grupo control y en el grupo de tratamiento no fueron estadísticamente diferentes entre Maca y el grupo de control (0,54 y 0,50, respectivamente) (Tabla 2].

Abertura vaginal

Con el fin de evaluar el efecto de la Maca en la maduración sexual femenina, la apertura vaginal (VO) días se evaluó. Durante el desarrollo postnatal de las crías, se observó que los que pertenecen a un mayor tamaño de la camada desarrolló y creció más lento en el tamaño y peso en comparación con las camadas más pequeñas (datos no presentados). El análisis estadístico demostró que el VO día fue ciertamente influenciado por el tamaño de la camada. Por lo tanto, las camadas se dividieron en dos subgrupos: camadas con igual o más de siete cachorros y camadas con menos de siete cachorros. Camadas con <7 cachorros presentaron menores VO día que con camadas camadas ≥ 7 (P <0,01). Maca grupo tratado producido una anterior VO día en camadas con menos de 7 cachorros que en los controles (P <0,01). En camadas con ≥ 7 cachorros, el VO día fue similar en el grupo tratado con Maca y en el grupo control. El análisis multivariado mostró que el tamaño de la camada, pero no se relacionó con el tratamiento VO día (R 2 = 0,37, P <0,01).

Discusión

Maca se ha descrito para mejorar la fertilidad desde hace muchos siglos [3]. Sin embargo, evidencias científicas en revistas revisadas por pares, se dispone desde el año 2000 [5 - 8, 12 - 14]. Los estudios demostraron que la Maca aumenta el comportamiento sexual masculino [11 - 13] y aumenta la producción de esperma [8].

En relación a la reproducción femenina, sólo hay un estudio que demuestra que Maca no aumentó la tasa de implantación en el ratón [9]. Hemos demostrado en el presente estudio que la tasa de implantación no fue mayor en los ratones después de la administración oral de 1 g / Kg de armas biológicas de un extracto acuoso liofilizado de Maca. Sin embargo, curiosamente, los ratones hembras que recibieron Maca emitido cachorros más que el grupo control. Esto sugiere que la Maca puede tener un efecto protector sobre el número de resorciones, con una menor incidencia de ellas entre el día 7 de embarazo y los días siguientes de embarazo en el grupo tratado con Maca. La suplementación en la dieta de Maca mejora de las tasas de crecimiento y la supervivencia de la trucha arco iris Oncorhynchus mykiss (Walbaum) alevins y los menores [15]. Algunos posibles mecanismos a través de los cuales podrán actuar Maca incluyen el aumento de la receptividad uterina, alteraciones inmunes funciones y efectos sobre el sistema vascular [16]. Se sabe que funcional linfocítica unión de la progesterona son necesarios para el mantenimiento de un embarazo normal, y que la inmunosupresión mediada por la progesterona es necesaria para el mantenimiento normal de la gestación [17].

Tamaño de la camada fue mayor en el momento del nacimiento y postnatal, en el día 4 en los grupos tratados con Maca que en los controles. Este efecto parece ser debido a una reducción de la resorción del embrión, ya que el número de lugares de implantación fueron similares en los ratones tratados con Maca que en los controles. Este efecto no parece ser debido a alguna actividad estrogénica de Maca, ya que la exposición al estradiol-17 beta o la proestrogen metoxicloro reducido tamaño de la camada [18].

Relación de sexos no se vio afectada tras el tratamiento con Maca. En el pescado, el período de la diferenciación de sexo es la más sensible a la posible acción de los fitoquímicos con esteroides actividad. Sin embargo, no hubo diferencias significativas entre los sexos en el control y la Maca grupo tratado de la trucha arco iris. P-nonyphenol, un medio ambiente tóxico con propiedades estrogénica no afecta a la relación entre el sexo de las crías en vivo [19]. Todos ellos sugieren que los efectos principales de la Maca no se deben a un aumento de la actividad estrogénica.

La maduración sexual en las camadas fue evaluada por la abertura vaginal día. Los cachorros fueron divididos en dos grupos (<7 cachorros y cachorros ≥ 7). Fraternidad tamaño tiene un positivo efecto en los lineales edad a la abertura vaginal. Baja tamaño de la camada se relaciona a temprana edad en el día de apertura vaginal. Esto ha sido observado anteriormente [20]. Esta diferencia parece ser debido a diferencias en la densidad de energía alimentaria [21]. Al comparar los dos sub-grupos con sus respectivos controles, se observó que la Maca no tuvieron efecto sobre el VO día. Dietética fitoestrógenos se ha demostrado para acelerar el tiempo de abertura vaginal inmaduros en ratones CD-1 [22]. Desde Maca no afecta a la VO día, se sugiere que los fitoestrógenos presentes en Maca tiene poco efecto sobre los parámetros reproductivos evaluados en el presente estudio.

Maca contiene esteroles, tales como campesterols (27,3%), ergosterol (13,6%), de brasicasterol (9,1%) Δ 7,22-ergostadienol (4,5%) y sitosterol (45,5%) [23], esta última de haber fitoestrógenos actividad. Se ha sugerido que la β-sitosterol puede atravesar la placenta [24]. En humanos, se ha demostrado que sitosterol puede ser excretado en la leche y, por tanto, entrar en el recién nacido [25]. Maca composición química incluye sitosterol, este compuesto podría ejercer su efecto en cachorros.

El tratamiento con Maca también aumenta el comportamiento sexual masculino [12 - 14] y la producción de esperma en ratones y ratas [7]. Es probable que los principales efectos de la Maca aumento de peso del útero y del tamaño de la camada no se debe a un efecto estrogénico, pero a un progestágeno, similar a uno, desde Maca composición química, además de incluir otros esteroles fitoestrógenos sitosterol. La progesterona, sin duda, afecta a ambos, el peso del útero a través de los receptores de progesterona, así como evitar el aborto. En ratones y ratas, la progesterona es mucho más importante para mantener el embarazo que los estrógenos [16, 17]. Además, el nivel de progesterona fisiológica actos conjuntamente con andrógenos para facilitar la cópula en las ratas macho y ratones [26, 27]. Además, uno de los más potentes phytoestrogenic sustancia -6 - (1,1-dimethylallyl) naringenin (6-DMAN) - no tienen ningún efecto sobre peso húmedo uterino en ratas ovariectomizadas [28]. Nuestro estudio demuestra que la Maca aumenta el peso uterino. Se sugiere que esta actividad puede ser producido por una progestina como el efecto. Sin embargo, necesitamos más estudios que se realizó para aclarar este mecanismo propuesto.

Conclusión

En resumen, nuestros resultados sugieren que el extracto acuoso liofilizado de Maca Amarilla aumentar el número de cachorros en los ratones normales de mujeres adultas.

Contribuciones de los autores

AR concibe el estudio, participaron en su diseño, la coordinación, la ejecución, el análisis y la interpretación de los datos, y redactó el manuscrito.

SS participado en el diseño, la coordinación y la ejecución del experimento, el análisis y de la interpretación de los datos, y ayudó a redactar el manuscrito del estudio.

NA participó en el desarrollo de la prueba y revisó el proyecto de gravedad.

JR participó en el desarrollo del experimento, llevado a cabo el análisis y la interpretación de los datos, y revisó el proyecto de gravedad.

MG participó en el desarrollo de la prueba.

GG participó en el análisis y la interpretación de los datos, ayudó a redactar el manuscrito, lo revisó críticamente y dio la aprobación final de la versión.

Agradecimientos

Los autores desean agradecer a Sandra Yucra y Jessica Nieto por su apoyo técnico. Vicerrectorate de Investigación de la Universidad Peruana Cayetano Heredia con apoyo financiero este estudio.