Reproductive biology and endocrinology : RB&E, 2005; 3: 44-44 (más artículos en esta revista)

Ratas inducida por esteroides con ovarios poliquísticos desarrollo de la hipertensión y el aumento de la actividad del sistema nervioso simpático

BioMed Central
Elisabet Stener-Victorin (elisabet.stener-victorin @ wlab.gu.se) [1], Karolina Ploj (Karolina.Ploj @ astrazeneca.com) [1], Britt-Mari Larsson (britt-mari.larsson @ wlab.gu . Se) [1], Agneta Holmäng (agneta.holmang @ wlab.gu.se) [1]
[1] Instituto Cardiovascular y Laboratorio Wallenberg, Academia Sahlgrenska, Universidad de Göteborg, SE-413 45 Göteborg, Suecia
[2] Departamento de Obstetricia y Ginecología, Hospital Universitario Sahlgrenska, Sahlgrenska, SE-413 45 Göteborg, Suecia
[3] Instituto de Terapia Ocupacional y Terapia Física, Academia Sahlgrenska, Universidad de Göteborg, SE-405 30 Göteborg, Suecia

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Resumen
Antecedentes

El síndrome de ovario poliquístico (SOP) es un complejo desorden endocrinos y metabólicos asociados con la disfunción ovulatoria, la obesidad abdominal, hiperandrogenismo, la hipertensión y la resistencia a la insulina.

Métodos

Nuestros objetivos en este estudio fueron (1) para estimar simpático-adrenal medular (SAM), la medición de la actividad de presión arterial sistólica (PSM) en ratas con estradiol valerate (EV) inducida PCO; (2) a la estimación de alfa alfa 1 bis y 2 bis Adrenérgicos expresión en un área del cerebro para mediar en el pensamiento central de PSM efectos en la regulación y en la médula suprarrenal; (3) para evaluar hipotálamo-hipofisario-adrenal (HPA) El eje de la regulación de medición de hormona adrenocorticotropa (ACTH) y corticosterone (CORT) en los niveles de respuesta A la novela y el medio ambiente de estrés, y (4) para medir la obesidad abdominal, los esteroides sexuales, y la sensibilidad a la insulina.

Resultados

El PCO ratas había PSM significativamente mayor que los controles, mayores niveles de los receptores adrenérgicos alfa 1 bis ARNm en el núcleo paraventricular hipotalámico (PVN), y niveles más bajos de ARNm de los receptores adrenérgicos alfa 2a en el PVN y la médula suprarrenal. Después de la exposición al estrés, PCO ratas tuvieron mayor CORT ACTH y niveles. Las concentraciones plasmáticas de testosterona son más bajos en las ratas PCO, y no las diferencias en la sensibilidad a la insulina o en el peso de los depósitos de grasa intraabdominal se encontraron.

Conclusión

Así, las ratas con EV-PCO desarrollo de la hipertensión inducida por el aumento y simpático y el eje HPA sin actividad reducida sensibilidad a la insulina, la obesidad, o hiperandrogenismo. Estos hallazgos pueden tener implicaciones para los mecanismos subyacentes a la hipertensión en pacientes con SOP.

Introducción

El síndrome de ovario poliquístico (SOP), una heterogénea trastornos endocrinos y metabólicos que afectan a un 6% a un 10% de mujeres en edad reproductiva, se asocia con una disfunción ovulatoria, la obesidad abdominal, hiperandrogenismo, y, en muchos casos, la hipertensión y la profunda resistencia a la insulina [1]. Varios de estos factores aumentan el riesgo de enfermedad cardiovascular (ECV) en las mujeres [2]. La prevalencia de la hipertensión en las mujeres con SOP es de alrededor del 40% [3, 4]. SOP también se asocia con un mayor riesgo de infarto de miocardio (riesgo relativo, 7,4) [4] y, en las mujeres jóvenes, un perfil cardiovascular comprometido, independiente de la obesidad [5]. Las mujeres con SOP y crear también una respuesta al estrés hiperactivo [6]. La heterogeneidad de la enfermedad sugiere que hay subpoblaciones dentro del síndrome. La hipertensión arterial y la resistencia a la insulina no están presentes de manera uniforme, y la hipertensión podrían estar ausentes a pesar de profunda resistencia a la insulina y viceversa [7]. No está claro si SOP aumenta el riesgo de ECV, independientemente del síndrome metabólico [8].

Las anomalías detectadas en pacientes con SOP se han atribuido a defectos en la primaria hipotálamo-hipofisario-adrenal (HPA) del eje, el microambiente de ovario, la glándula suprarrenal, y la insulina / factor de crecimiento tipo insulina sistema de regulación metabólica [1]. Hipertensión y defectos en la acción de la insulina puede estar relacionado con una mayor simpático-adrenal medular de la actividad (SAM) [9]. El aumento de la actividad del sistema nervioso simpático puede estar asociado con una mejora de α-adrenérgicos, la respuesta, contribuyendo a la elevación de la presión arterial y la hipertensión [10, 11], y puede desempeñar un papel en la SOP [6, 12, 13]. Si es así, la α 1 bis y de los receptores adrenérgicos α 2 bis (AR) subtipos son de interés, ya que están fuertemente implicados en el control cardiovascular [14, 15].

La etiología de síndrome de ovario poliquístico es desconocida, probablemente refleja múltiples mecanismos fisiopatológicos, y un modelo animal aceptado de la enfermedad no ha sido establecida. Un reciente estudio concluye que los modelos múltiples puede ser necesaria, en función de si el objetivo es investigar la morfología de ovario o de un particular relacionada con el SOP trastorno [16]. En ambos estudios mecanísticos y de trato, y otros han utilizado un modelo en el que PCO es inducido por una única intramuscular (im) de inyección de estradiol valerate (EV) en 8 semanas de edad, las ratas [17]. Las ratas cesación ovulando y desarrollar las características de SOP humanos, incluidas las grandes quística folículos en los ovarios y una alteración de las concentraciones de hormona luteinizante [17].

Central de la actividad neuronal en la norepinefrina (NE) es el aumento de las neuronas en ratas con EV-PCO inducida [18], lo que sugiere una mayor central simpática salida. Aumento del tono simpático de ovario en ratas con EV-PCO inducida se ha puesto de manifiesto por las elevaciones en la actividad tirosina hidroxilasa y NE de concentración, downregulation de la β 2 AR, y el aumento de la producción ovárica de nervio del factor de crecimiento, un objetivo derivado de neurotrophin [19 - 25] .

La respuesta de estrés es en gran parte mediada por la SAM y ejes HPA. Activación del eje HPA aumenta la secreción de la hormona adrenocorticotropa (ACTH), y conduce a la liberación de glucocorticoides de la corteza suprarrenal. La HPA eje adrenal y dentro de los mecanismos de participación de la médula suprarrenal, también puede regular adrenocortical steroidgenesis. Además, los esteroides adrenocortical influir en el desarrollo y la función de las células cromafines adrenomedullary y viceversa [26]. La activación de la SAM eje, sin embargo, aumenta la liberación de epinefrina y NE de la médula suprarrenal, y estimula la norepinergic nervios simpático, el aumento de la secreción de NE.

Estos dos ejes son la clave eferentes eslabones de la "derrota" (eje HPA) y de "defensa" (SAM eje) reacciones [27, 28]. Crónica activación de cualquiera de eje puede dar lugar a enfermedades relacionadas con el estrés como la hipertensión, la diabetes y la obesidad [27, 28].

En este estudio, se determinó la actividad SAM-eje y eje HPA-regulación en ratas con EV-inducida PCO. Para estimar SAM actividad, que mide la presión arterial sistólica y de la expresión de α 1 bis - y α 2 bis-AR mRNAs en el núcleo paraventricular del hipotálamo (PVN) y la médula suprarrenal. Para evaluar la regulación del eje HPA-, que mide la ACTH y corticosterone (CORT), en respuesta a las concentraciones de novela y el medio ambiente de estrés. También mide la obesidad abdominal, los niveles de esteroides sexuales, y la sensibilidad a la insulina.

Materiales y métodos
Animales

Dieciocho virgen de adultos en bicicleta ratas Wistar-Kyoto (B & K Universal AB, Suecia) con un peso 190 a 210 g se dividieron en dos grupos y alojados cuatro a una jaula en condiciones normales (21 ± 2 ° C, 50% a 60% de humedad, 12 horas light/12-hour oscuro ciclo) durante al menos 1 semana antes y en todo el estudio, con el libre acceso a la norma chow y el agua del grifo. El estudio fue aprobado por el Comité de Ética Animal de la Universidad de Göteborg y se lleva a cabo de conformidad con el NIH "Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio".

Tratamiento hormonal y procedimiento de estudio

Después de 1 semana de aclimatación, de 8 semanas de edad, las ratas (n = 10), cada uno recibió una inyección im de EV (Riedeldehaen, Alemania), 4 mg en 0,2 ml de aceite (arachidis con óleum, Apoteket AB, Umeå, Suecia), a Inducir PCO [17]; esta dosis induce estro persistente y permanente PCO, es decir, no fresca cuerpo lúteo, retrocede antiguo cuerpo lúteo y folículos atretic [22]. Los controles (n = 8) recibieron sólo vehículo. Las ratas se pesaron semanalmente. La media de presión arterial sistólica (PSM) y la frecuencia cardíaca (FC) se midió 2, 3, 5, y 7 semanas después de la inyección. Estrés pruebas se llevaron a cabo a las 6 semanas. Las muestras de sangre para la medición de la progesterona, el 17 β-estradiol, testosterona y se obtuvieron en la semana 7. Euglycemic hiperinsulinemia abrazadera pruebas se realizaron a las 10 a 11 semanas, momento en el tiempo PCO morfología es plenamente desarrollados [22].

Vaginal Mancha

Durante 10 días antes de las pruebas de estrés y de la abrazadera, ciclicidad estral fue supervisado por frotis vaginal obtenido entre 0800 y 1200 horas. La rata ciclo estral (estro, diestro 1, diestro 2, y proestro) suele durar unos 4 días. En los controles, el estrés y la abrazadera de las pruebas fueron ejecutadas durante el estro, y los niveles de hormonas sexuales fueron medidos durante el estro. En ratas PCO, todos los procedimientos de prueba y se realizaron muestras de sangre recogidas durante el estro o pseudoestrus como se describe [19]

La presión arterial y la medición de recursos humanos

La presión arterial sistólica y de recursos humanos se midieron entre 0800 y 1200 horas a 2, 3, 5, y 7 semanas después de la inyección EV con una cola brazalete monitor (RTBP Monitor, Aparatos de Harvard, South Natick, MA) con un diodo emisor de luz-y una Photoresistor conectado a una grabadora de doble canal. Las ratas fueron conscientes y se coloca sobre una placa térmica, y sus rabos eran calentado con una lámpara de calentamiento durante 10 minutos a causa de una vasodilatación óptima de la señal. PSM se calcula a partir de tres grabaciones estables.

Y de la secreción de ACTH CORT

A las 6 semanas, ACTH y CORT respuestas a la novela y el medio ambiente de estrés fueron evaluados como se describe [29]. Todas las pruebas se inició entre 0700 y 0900 h, y se trató de mantener inalteradas las ratas alimentadas y la noche antes del experimento. A la mañana siguiente, cada rata fue colocado en una novela medio ambiente (nueva prueba de jaula, fuerte ruido de fondo). La sangre (60 μ l) para la medición de ACTH y CORT se obtuvo de una cola vena antes y 15, 30, 60, 90, y 120 minutos después de la exposición a la novela medio ambiente.

Euglycemic hiperinsulinemia abrazadera de prueba

A las 10 a 11 semanas después de la inyección, las ratas se sometieron euglycemic hiperinsulinemia abrazadera de pruebas, tal como se describe [30]. La anestesia fue inducida con thiobutabarbital sodio (Inactin, 125 mg / kg de peso corporal; RBI, Natick, MA), y los catéteres se inserta en la arteria carótida izquierda para la toma de muestras de sangre y en la vena yugular derecha para infusiones de glucosa e insulina. Las ratas se colocaron en una placa térmica para mantener una constante temperatura rectal de 37,0 ± 0,1 ° C.

Después de una inyección en bolo (Actrapid, 100 U / mL, Novo, Copenhague, Dinamarca), la insulina es infundido a las 8 mU / kg por minuto. Un 20% de glucosa en solución salina fisiológica se administró para mantener la glucosa en plasma a las 7 mM, la tasa de infusión de glucosa se guió por las mediciones en 10 - μ L muestras de sangre obtenidas cada 5 minutos hasta que un estado de equilibrio se alcanzó (~ 60 minutos) y luego cada 10 minutos. La media de la velocidad de infusión se calcula a partir de los valores durante los últimos 60 minutos. A los 0 y 120 minutos, 250 - μ l se obtuvieron muestras de sangre para medir la concentración de insulina. Menos de 1 mL de sangre de cada una rata.

Tejidos

Después de la prueba de la abrazadera, las ratas fueron decapitadas, el hipotálamo fue rápidamente eliminado y disecado en el hielo seco en la frontera de-0,8 - 3,8 de acuerdo a las coordenadas estereotáxica cerebral de rata [31]. Tejido ponches centrado en PVN se tomaron de las secciones usando una aguja de calibre 18, y la suprarrenal medullae fueron disecados y broche de congelados en nitrógeno líquido hasta el ensayo. El parametrial, mesentérica, retroperitoneal, inguinal y los tejidos adiposos, uno de ovario y de los músculos de la extremidad posterior (extensor digitorum largo, soleus, y tibialis anterior) fueron disecados rápidamente por la misma persona y pesado.

Morfología ovárica

El ovario se extrae, se limpia de grasa del tejido conectivo adherentes, y fija en el 4% de amortiguación de formaldehído durante al menos 24 horas. Posteriormente, las muestras fueron deshidratadas y incrustada en parafina. Los ovarios fueron parcialmente seccionaron longitudinalmente (4 μ m, cada décima sección montado en el portaobjetos de vidrio) y teñidas con hematoxilina y eosina. Un patólogo con experiencia, cegados a la agrupación analizado folículo población a través del microscopio óptico. No había ninguna intención de cuantificar el número de folículos atretic o creciente, sino más bien para establecer si la ovulación con cuerpo lúteo formación se han producido dentro del plazo establecido. Según morfométricas (estereológicos) y principios estadísticos no hay necesidad de realizar un análisis estadístico en esta situación.

PCR en tiempo real de análisis

Total RNA PVN y de la médula suprarrenal se extrajo con RNeasy Mini Kits (Qiagen, Hilden, Alemania). Primera línea de cDNA fue sintetizado a partir del 1 μ g de RNA total con TaqMan transcripción reversa reactivos (Applied Biosystems., Foster City, CA). Cada 100 μ l de RT-PCR figura 1 μ g del total, 1 × TaqMan RT buffer, 5 mM MgCl2, 2,5 mM hexámeros al azar, 1 mM dNTPs, 0,4 U / ml RNasa inhibidor, y 1,25 U / ml Multiscribe RT (PE Applied Biosystems , Foster City, CA, EE.UU.). Transcripción reversa se llevó a cabo en un PTC-200 sistema de PCR (MJ Research., Boston, MA, EE.UU.) a 25 ° C durante 10 min, 48 º C por 30 min y 95 ° C durante 5 min. PCR se realizó con el ABI Prism 7700 secuencia sistema de detección y FAM-etiquetados sondas específicas para la AR α 1 bis (NM 017.191) y α 2 bis AR (rCT57545) (PE Applied Biosystems, Estocolmo, Suecia). Diseñado primers y una sonda VIC-etiquetados para GAPDH (NM_031144) fueron incluidos como patrones internos. CDNA se amplificó durante un ciclo de 50 ° C durante 2 minutos y 95 ° C durante 10 minutos, seguidos por 40 ciclos de 95 ° C durante 15 segundos y 60 ° C durante 1 minuto. Los niveles de mRNA se calcularon con el método de la curva estándar (Boletín de usuario 2, PE Applied Biosystems), y ajustada la expresión de GAPDH.

RIA y ELISA

La sangre fue recolectada en tubos de EDTA de potasio (ACTH), heparinized microtubos (CORT e insulina), o simples tubos (esteroides) y se centrifuga inmediatamente a 4 ° C en una microcentrífuga. RIA kits se utilizan para medir ACTH (DSL-2300, Sistemas de Laboratorios de Diagnóstico, Webster, TX), CORT (RSL 125 I Corticosterone RIA kit; MP Biomedicals, Costa Mesa, CA), testosterona (DSL-4100, Sistemas de Laboratorios de diagnóstico), Progesterona (DSL-3400, Sistemas de Laboratorios de Diagnóstico), y de estradiol-17 β (doble anticuerpo estradiol procedimiento, DPC Scandinavia AB, Mölndal, Suecia). Los niveles de insulina se determinó por ELISA (Merkodia, Uppsala, Suecia).

Análisis Estadístico

Todos los análisis estadísticos se realizaron con el software SPSS 11,0. De peso corporal y hemodinámica datos fueron analizados por ANOVA medidas repetidas. La ganancia de peso, de tejidos de peso, la velocidad de infusión de glucosa y los niveles de glucosa e insulina, el estrés y las hormonas sexuales, y los niveles de mRNA fueron analizadas por dos colas t test. Los valores se expresan como media ± SE. P <0,05 fue considerado significativo.

Resultados
PCO ratas desarrollar hipertensión

A las 5 y 7 semanas, PSM fue significativamente mayor en el grupo PCO que en los controles (Figura 1]. A las 7 semanas, en materia de recursos humanos también fue significativamente mayor en el grupo PCO (405 ± 13,6 ± 10,0 frente a 345 latidos / minuto, P <0,001).

AR expresión de mRNA en el Hypothalamic Paraventricular Nucleus y suprarrenal Medulla

Expresión de α 1 bis AR ARNm en el PVN fue significativamente mayor, y la expresión de mRNA AR α 2 bis en el PVN y la médula suprarrenal significativamente menor, en el PCO grupo que en los controles (Figura 2].

ACTH y cort respuestas al estrés son más altos en las ratas PCO

Para evaluar los efectos de la exposición EV en el eje HPA, que mide la ACTH y CORT respuestas a la novela-el estrés en el entorno de 6 semanas (Tabla 2]. En la línea de base, niveles de la ACTH fueron similares en los dos grupos, mientras que los niveles de CORT tendido PCO mayor en las ratas. A las 15 y 30 minutos, los niveles de la ACTH fueron mayores en ratas PCO que los controles, pero la diferencia fue significativa (P <0,05) sólo cuando los dos puntos de tiempo se analizaron juntos (no se muestra). A las 30 y 60 minutos, CORT niveles fueron significativamente mayores en el grupo PCO.

PCO ratas han testosterona más bajos y más altos niveles de progesterona

El grupo había PCO significativamente inferiores de testosterona y progesterona mayores concentraciones que los controles (Tabla 3]. No hubo diferencias en el 17 β-estradiol concentraciones.

PCO ratas han normal sensibilidad a la insulina

La velocidad de infusión de glucosa y la insulina plasmática y las concentraciones de glucosa antes y durante la prueba de la abrazadera se muestran en la Tabla 4. La sensibilidad a la insulina no fue significativamente diferente en el PCO y grupos de control, como se refleja en la tasa de infusión de glucosa.

Morfología ovárica - 60 días de edad

Los ovarios en el grupo control mostró una apariencia típicamente normales con folículos y cuerpo lúteo en las diferentes etapas del desarrollo y la regresión. Los ovarios en el grupo PCO PCO mostradas típicos-como los cambios [17], y tanto el número como el tamaño del cuerpo lúteo en estos grupos se redujo en comparación con el grupo control. Normalmente, ningún joven cuerpo lúteo se presente en el PCO grupos. Las estructuras dominantes son atretic folículos, reduce antiguo cuerpo lúteo, y algunos de crecimiento "saludable" folículos en la primaria, secundaria, terciaria y de las fases (Figuras 3].

PCO ratas ganar menos peso corporal total

De 3 a 10 semanas, las ratas PCO pesaba menos de los controles, pero la diferencia fue significativa sólo entre las semanas 3 y 6 (Tabla 1]. En general, el grupo PCO adquirida significativamente menos peso que los controles.

No se observaron diferencias en los depósitos de grasa intraabdominal o posterior de los músculos esqueléticos

El depósito de grasa inguinal (en representación de la grasa subcutánea), fue significativamente más pesada en el PCO grupo que en los controles (4,36 ± 0,2 y 3,36 ± 0,2 g / kg de peso corporal, P <0,01). No se observaron diferencias en las ponderaciones de los mesentérica, parametrial, retroperitoneales y de los depósitos de grasa (en representación de la grasa intraabdominal) o de la extremidad posterior músculos esqueléticos (no se muestra).

Discusión

Este estudio muestra que las ratas con EV-PCO desarrollado hipertensión inducida, en consonancia con el aumento de la actividad simpática, como en humanos SOP. También tuvieron incremento en la expresión de mRNA AR α 1 bis en el PVN y la disminución de la expresión de mRNA AR α 2 bis en el PVN y médula suprarrenal, de conformidad con presión arterial elevada y el aumento de la actividad simpática, junto con la hiperactividad de los ejes HPA y SAM. Ratas con EV-inducida PCO no han reducido la sensibilidad a la insulina o ser obesas o hyperandrogenic.

La actividad simpática y la SAM Eje

Las mujeres con SOP tienen una alta incidencia de la hipertensión [3, 4], y están en mayor riesgo de ECV [32]. El sistema nervioso simpático podría desempeñar un papel crucial en el desarrollo de la hipertensión y las enfermedades cardiovasculares. Como ejemplo, la hipertensión arterial es frecuente en pacientes con enfermedad renal poliquística (PKD), y un estudio reciente realizado por Klein et al. Demuestra que su músculo simpático es el aumento de la actividad, independientemente de la función renal [11]. Esto apoya la hipótesis de que la hiperactividad simpática también puede contribuir a la patogénesis de la hipertensión en pacientes con SOP. Además, el exceso de la SAM eje aumenta la presión arterial [9]. Dado que la actividad simpática y la hipertensión están fuertemente correlacionados, que mide PSM y han observado que se incrementó en 5 y 7 semanas después de la inyección EV. Este hallazgo puede tener implicaciones en los mecanismos que subyacen al aumento del riesgo de desarrollar hipertensión, en particular la mayor incidencia de las enfermedades cardiovasculares en la vida adulta, en mujeres con SOP.

En el grupo PCO, α 1 bis AR expresión mRNA se incrementó en el PVN, y α 2 bis AR expresión se redujo tanto en el PVN y la médula suprarrenal, a entender claramente el aumento de la actividad simpática. En las ratas espontáneamente hipertensas, el aumento de centrales α 1 bis AR expresión y la disminución de α 2 bis AR expresión correlacionada con presión arterial elevada y el aumento de la actividad simpática [15]. En otro estudio, Peng et al. Mostró que la α 2 bis AR sympathoinhibitory tiene un papel en el cerebro [33]. Además, α 2 AR subtipos se ha demostrado que el control de la liberación de catecolaminas de los nervios simpático y de médula suprarrenal [34]. Desde el hipotálamo participa en la regulación central de la médula suprarrenal y el PSM interviene en la regulación de los SAM-eje, estos resultados apoyan la conclusión de que EV-PCO inducida se asocia con un aumento de la actividad simpática.

El PCO ratas adquirida significativamente menos peso que los controles. Los resultados de una mayor producción adrenal de glucocorticoides siguientes a la inyección EV en el presente estudio podrían explicar la falta de aumento de peso en ratas PCO lipolítica a través de acciones. La activación de la α 1 y α 2 DA en el núcleo paraventricular hipotalámico inhibe el consumo de alimentos [35], lo que sugiere que la central dysregulated expresión de α 1 y α 2 técnicos en el PCO grupo era responsable de la diferencia en la ganancia de peso. La ingesta de alimentos no se midió. Es importante tener en cuenta que en las mujeres SOP no siempre es asociada con la obesidad [36]. Sin embargo, el aumento de la actividad simpática se ha asociado con un aumento de la actividad metabólica, el consumo de grasa, y disminución de peso corporal, pero no con la reducción de la ingesta de alimentos [37].

En un estudio de factores de riesgo cardiovascular, las mujeres jóvenes con SOP tenían una mayor prevalencia de hipertensión que los controles de la población [5] y un perfil de riesgo cardiovascular en peligro, incluso después del ajuste por su mayor índice de masa corporal. En un reciente estudio, la baja natalidad y el tamaño de la altura final previsto de alta actividad del nervio simpático en la edad adulta [38] y esto se correlacionó positivamente a la alta PSM. Curiosamente, el bajo peso al nacer ha sido señalado como un mayor riesgo de desarrollar SOP [39]. Así, el aumento de riesgo de ECV asociados con SOP no se puede explicar por sí solo la obesidad. Estos hallazgos sugieren que el mayor riesgo se refleja el aumento de la actividad del nervio simpático, que a su vez da lugar a la hipertensión.

Señales de hyperactivation en EV-inducida PCO incluir downregulation de AR β 2 en las células intersticiales del caso-[40]. La reducción de la expresión de la β 2 AR también aumenta la secreción de progesterona por quística ovarios en respuesta a isoproterenol en ratas con EV-PCO inducida [19]. En el estudio actual, el grupo había PCO significativamente más alta que las concentraciones de progesterona los controles. Además, los altos niveles de P, y los bajos niveles de T sugieren un cambio hacia corticosterone metabólicas de síntesis y secreción y una hiper-adrenal estado.

Todos estos cambios parece ser independiente de 17 β-estradiol, ya que se produjo sin ningún tipo de cambios en sus concentraciones [41]. En consonancia con este hallazgo, el 17 β-estradiol concentraciones fueron inalterada en el grupo PCO.

Interacciones entre los ejes HPA y SAM

La novela y el medio ambiente prueba de esfuerzo también proporcionó pruebas para el aumento de la actividad del eje HPA en EV-inducida PCO. El grupo había PCO CORT los niveles más altos en 30 y 60 minutos a más controles. Homone liberadora de corticotropina (CRH) y el locus ceruleus - NE (sistema nervioso simpático) se han señalado como componentes importantes del sistema de estrés, así como sus efectores periféricos, los ejes HPA y SAM [42]. La CRH y locus ceruleus - NE directamente los sistemas de modular la HPA y SAM ejes con el fin de mantener la homeostasis [42]. Ratas con EV-inducida PCO tienen mayores niveles de CRH en la eminencia media de los controles [43]. En el presente estudio, el desarrollo de la hipertensión, el aumento de la expresión de α 1 bis AR y la disminución de la expresión de α-2a AR ARNm, y el aumento de las respuestas al estrés CORT indican una estrecha interacción entre los ejes HPA y SAM, así como incrementos en su actividad . El resultado interesante que la respuesta al estrés CORT fue mayor que la ACTH respuesta fue menor, entonces espera puede explicarse por la estimulación directa de los glucocorticoides adrenales con menos pituitaria ACTH acción [44].

Resistencia a la insulina, Hyperandrogenism, y la obesidad

Según una teoría de la patogénesis de la SOP, un defecto en la acción de la insulina lleva a la hiperinsulinemia y la resistencia a la insulina [45]. La insulina abrazadera ensayos realizados 10 a 11 semanas después de la inyección EV, PCO típico cuando están plenamente desarrollados [17], no mostraron resistencia a la insulina en el grupo PCO.

¿Por qué no nuestro ratas con EV-inducida PCO desarrollar resistencia a la insulina? Una posibilidad es que la medición se realizó antes de la aparición de la resistencia a la insulina. Otra posibilidad es la ausencia de la obesidad intraabdominal, que se consideran un factor que contribuye [1]. La principal anomalía en la acción de la insulina en pacientes con SOP se cree que es una post-receptor defecto en la cascada de señalización de insulina en el músculo esquelético, lo que podría deberse a la interacción con la testosterona [1]. En los seres humanos, los niveles de insulina en ayunas se correlacionan positivamente con los niveles de andrógenos, y algunos estudios han demostrado que las causas hiperandrogenismo resistencia a la insulina en los seres humanos [46] y en la rata [30]. Plasma los niveles de testosterona son bajas en el grupo PCO, en consonancia con la falta de resistencia a la insulina o la hiperinsulinemia. Como se mencionó antes, los bajos niveles de T sugieren un cambio hacia corticosterone metabólicas de síntesis y secreción y una hiper-adrenal estado.

También es importante recordar que sólo el 50% de las mujeres con SOP tienen resistencia a la insulina y no más de alrededor del 40% son obesos [47]. Además, hay dificultades en la evaluación de la resistencia a la insulina en pacientes con SOP, incluyendo la falta de consenso sobre lo que define SOP y "normal" de la sensibilidad a la insulina, étnicas y de la variabilidad genética, los factores de confusión tales como obesidad, el estrés y el envejecimiento, y las preocupaciones acerca de si simplificado Modelos de la sensibilidad a la insulina tienen la precisión para predecir las necesidades de tratamiento, las respuestas, y la morbilidad [48].

Perspectivas

Diferentes modelos de PCO son inevitables, y el modelo a utilizar depende de los objetivos del estudio. Hemos demostrado que las ratas con EV-PCO desarrollar hipertensión inducida, con un aumento de α 1 bis AR y la disminución de α 2 bis AR expresión mRNA, en consonancia con el aumento de la actividad simpática. También se encontró evidencia de aumento de la actividad del eje HPA.

Estos hallazgos pueden tener implicaciones para los mecanismos subyacentes a la hipertensión en las mujeres con SOP, ya que la hipertensión esencial se asocia con la hiperactividad simpática, que a su vez es conocido por incrementar el riesgo de ECV. Se demostró además que las ratas con EV-inducida PCO no han reducido la sensibilidad a la insulina y la obesidad no se desarrollan o hiperandrogenismo, que más tarde podría ser signos de hiperactividad simpática. Hiperglucemia de SOP pacientes diabéticos ha demostrado ser significativamente positiva con la hipersecreción de cortisol suprarrenal, dehydroepiandrostenedione (DHEA) y de sulfato de dehydroepiandrostenedione (DHEAS) [49]. Ellos sugirieron que el aumento de adrenocortical (HPA), la actividad puede ser factor importante en el desarrollo de la diabetes tipo 2 en mujeres con SOP. Desde que encontró exagerada la actividad en ambos ejes HPA y SAM en el presente EV inducida PCO modelo, que podría imitar a una primera fase de SOP.

Estos resultados podrían proporcionar importantes pistas para futuros estudios con el EV-inducida PCO modelo.

Contribuciones de los autores

ES-V participado en el diseño del estudio, llevado a cabo parte de la preparación de animales, realizó RT-PCR, realizó el análisis estadístico y redactó el manuscrito. KP participado en el diseño del estudio y se llevó a cabo la preparación de animales. BM lleva a cabo la preparación de animales. AH participado en el diseño del estudio y por escrito, el manuscrito. Todos los autores leído y aprobado el manuscrito final.

Agradecimientos

Este estudio fue apoyado por becas de Wilhelm y Martina Lundgrens del Fondo de Ciencia, Hjalmar Fundación Svensson, Tore Nilsons Stiftelse, Magnus Bergwalls Stiftelse, la Fundación Novo Nordisk, la Sociedad Médica de Gotemburgo, el Consejo Sueco de Investigación Médica (12206 2004-6399 Y -6.827), y el sueco Heart Lung Foundation.