Journal of Immune Based Therapies and Vaccines, 2005; 3: 7-7 (más artículos en esta revista)

Micobacterias síndrome inflamatorio de reconstitución inmune en la infección por VIH-1 después de la terapia antirretroviral se asocia con desregulado específico de células T respuestas: Beneficial efecto de la IL-2 y GM-CSF inmunoterapia

BioMed Central
A Pires (antonio.pires @ meditechmedia.com) [1], M Nelson (sandra.mead @ chelwest.nhs.uk) [2], AL Pozniak (anton.pozniak @ chelwest.nhs.uk) [2], M Fisher (martin.fisher @ bsuh.nhs.uk) [3], Gazzard B (eileen.whitney @ chelwest.nhs.uk) [2], M Gotch (f.gotch @ imperial.ac.uk) [1], N Imami (n.imami @ imperial.ac.uk) [1]
[1] Departamento de Inmunología Imperial College de Londres, Chelsea y Westminster Hospital, 369 Fulham Road, Londres. Reino Unido
[2] Departamento de VIH / GU Medicina, Hospital de Chelsea y Westminster, 369 Fulham Road, Londres, Reino Unido
[3] Departamento de VIH / GU Medicina, Royal Sussex County Hospital, Brighton, UK

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Resumen
Antecedentes

Con el advenimiento de la terapia antirretroviral (ART) los casos de síndrome inflamatorio de reconstitución inmune (IRIS) han sido cada vez más informado. IRIS ocurre generalmente en personas con un rápido aumento de CD4 de células T o porcentaje al inicio de ART, que desarrollen un mercado desregulado respuesta inmune a la infección con o sin reactivación de organismos oportunistas. En este sentido, se eleva evaluado en absoluto de las células T CD4, y específicos de células CD4 T-4 respuestas en el VIH-1 + con la presentación de los individuos asociados IRIS micobacteria que recibieron en conjunto con ART, IL-2, además de GM-CSF inmunoterapia.

Métodos

Se evaluaron CD4 T-células, el VIH-1 ARN cargas, el fenotipo de ingenuos y los marcadores de activación, y las respuestas de proliferación in vitro. Los resultados fueron comparados con los observados en el 11 acompañado, asintomáticos tratados con éxito clínico progressors (PC) sin evidencia de las infecciones oportunistas, y los controles no infectados.

Resultados

La mediana de CD4 de células T-IRIS en los pacientes aumentó de 22 células / μ l antes de iniciar el tratamiento antirretroviral, a 70 células / μ l después de 8 meses de tratamiento (mediana de 6,5 veces más). Esto coincidió con el diagnóstico de IRIS, niveles más bajos de la ingenuidad de las células CD4 T, incremento en la expresión de marcadores de activación inmune, y la debilidad de las células T CD4 respuestas. En contraste, CP tenía una mediana de CD4 de células T cuenta de 76 células / μ l en la línea de base, que se elevó a 249 células / μ l 6 meses después ART, cuando fuerte de células T respuestas se observaron en> 80% de los pacientes. El aumento en los niveles de expresión de marcadores de activación inmune se observaron en los pacientes IRIS comparación con los PC y UC (IRIS> CP> UC). La inmunoterapia con IL-2 y GM-CSF en paralelo la recuperación clínica.

Conclusión

Estos datos sugieren que la micobacteria IRIS está asociado con la insuficiencia de la reconstitución inmune vigorosa en lugar de células T específicas de las respuestas, y la administración conjunta de IL-2 y GM-CSF con inmunoterapia eficaz ART puede corregir o aumentar las células T en la inmunidad tales resultando en el establecimiento de clínicas Beneficio.

Antecedentes

El grado de reconstitución inmune observada en el VIH-1 + personas tras el inicio del tratamiento antirretroviral (TAR), es variable [1 - 4]. Aunque visto incluso en fases avanzadas de la enfermedad, es más prominente en los pacientes que el tratamiento comience en los primeros meses de la infección por VIH-1 antes de graves daños al sistema inmunológico, las respuestas sólidas donde se ven a menudo después del tratamiento [5 - 7]. Esas respuestas probablemente reflejan la vigilancia inmune efectiva, simulando el beneficio de células T no tratados visto en las respuestas a largo plazo no progressors, el VIH-1 seronegativos expuestos, pero las personas, y después de la vacunación terapéutica de los pacientes asintomáticos [8 - 10].

Se ha postulado que después del tratamiento de la fase tardía de la infección por VIH-1, la recuperación y el aumento de la función inmune, y las respuestas a la anterior sub-clínicos de las infecciones con los agentes patógenos tales como Mycobacterium spp, la hepatitis By la hepatitis C virus, o citomegalovirus (CMV ) Puede dar lugar a enfermedades inflamatorias exacerbado [11 - 19]. Este fenómeno, descrito por otros como el síndrome inflamatorio de reconstitución inmune (IRIS), es visto en su mayoría profundamente pacientes inmunosuprimidos con CD4 de células T nadirs de menos de 100 células / μ l, que después de recibir rápidamente ART lograr una viremia indetectable en plasma, y disfrute de una experiencia Muy rápido incremento de las células CD4 T [12, 14]. Este complejo se presenta con el síndrome de las infecciones oportunistas, ya sea activa o recurrencia de infecciones previas.

Estamos investigando la calidad y la amplitud de las respuestas linfoproliferativas, en un grupo de VIH-1 en pacientes estables + ARTE> 6 meses con viremia suprimida, con diagnóstico complejo Mycobacterium avium (MAC) se asocia IRIS, que son insensibles a las convencionales, la terapia anti-MAC . Nos demostró que estos pacientes carecían de patógenos específicos in vitro de células T respuestas sugieren que el grado y la calidad de la reconstitución inmune tras tratamiento antirretroviral es insuficiente para eliminar las infecciones oportunistas. Además, la inmunoterapia con IL-2 y GM-CSF en combinación con una eficaz ART parece acelerar el aumento de los específicos de células T CD4 respuestas y aumentar la rapidez de la recuperación inmune subyacente que permite las infecciones oportunistas que se va a despejar y que conduzca a un mejor resultado inmediato y de la resolución De IRIS.

Métodos
Los sujetos estudiados

Quince VIH-1 + pacientes en el Hospital de Chelsea y Westminster, Londres, Reino Unido fueron estudiados. Cuatro presenta con MAC asociada a IRIS, y donde bacilos ácido-rápida se detectaron, los pacientes recibieron la terapia anti-MAC tan pronto como sea diagnosticado. Estos pacientes tenían una mediana de CD4 de células T, de 22 células / μ l (rango intercuartil (IQR) 6,3-50,3) antes de iniciar el tratamiento antirretroviral, el aumento a 70 células / μ l (IQR 63-123) después de 8 meses de tratamiento (Tabla 1 ). Para mayor claridad estos temas será denominado IRIS pacientes. En informes anteriores se define como un síndrome de IRIS se producen en los individuos con un aumento de CD4 de células T o porcentaje al inicio de ART, que desarrollen nuevas patologías clínicas, ya sea con una nueva presentación clínica o reactivación de organismos oportunistas [15, 16]. Carga viral era indetectable en todos los pacientes en la presentación de IRIS. IRIS pacientes (n = 4) recibió inmunoterapia como terapia de rescate que consiste en la IL-2 (Chiron Therapeutics, Uxbridge, Reino Unido) a los 5 millones de unidades por vía subcutánea dos veces al día durante 5 días, en tres ciclos de 4 semanas de diferencia. Durante el tercer ciclo de IL-2, GM-CSF concomitante (Novartis, Schering-Plough, Camberley, Reino Unido), se administró por vía subcutánea 150 μ g al día durante 5 días. El resto de los pacientes estaban asintomáticos progressors clínico (n = 11), recibiendo tratamiento por 6 meses, con una mediana de CD4 + de células T de 76 células / μ l (IQR 22,5-90) en la línea de base, el aumento a 249 células / μ l (IQR 187,5 -303,5) 6 meses después ART, y con los niveles de carga viral indetectable (80% de los pacientes) a 127 HIV-1 RNA copias / ml de plasma. Estos pacientes no desarrollaron efectos secundarios tras el tratamiento, y no tenían evidencia de las infecciones oportunistas y exacerbado la respuesta inmune. Dieciséis donantes sanos no infectados VIH se utilizaron como controles. El consentimiento informado se obtuvo de todos los pacientes para la administración de la inmunoterapia y las investigaciones llevadas a cabo, el comité de ética y se obtuvo la aprobación de los estudios descritos.

Plasma viral RNA ensayo

La carga viral se midió el tiempo en cada punto de recogida de muestras utilizando el Bayer ARN del VIH-1 3,0 ensayo (bDNA) (Bayer Diagnostics, Newbury, Reino Unido) con un menor límite de detección de 50 HIV-1 RNA copias / ml de plasma.

Linfocitos subconjunto cuantificación

El Epics XL-MCL (Beckman Coulter, High Wycombe, Reino Unido) se utilizó para cuatro colores análisis de citometría de flujo. Anti-humano CD3, CD4, CD8, CD45 y se utiliza para analizar subconjuntos de células T. Leucocitos se analizaron sobre la Epics XL-MCL flujo cytometer II utilizando el sistema de software en conjunto con el control de los reactivos (Beckman Coulter) que proporcionan compensación automatizada color, la luz y el color de dispersión intensidades.

La proliferación de las células T de ensayo

Células mononucleares de sangre periférica (PBMC) se cultivaron en triplicado con el VIH-1 o de otro tipo recordar / antígeno vírico en el fondo redondo placas microtiter (Greiner, Gloucester, Reino Unido) durante 5 días, tal como se describe anteriormente [20 - 22]. Los antígenos utilizados fueron: virus Herpes simplex (HSV), aviar proteína purificada derivada de la tuberculina (PPD), toxoide tetánico (TTox), el virus varicela-zoster (VVZ), Candida (CAN), y la infección por citomegalovirus (CMV), tal como se describe en la referencia 21. VIH-1 recombinante antígenos se obtuvieron del Consejo de Investigación Médica Centralised Facility Reactivos para el SIDA (Instituto Nacional de Estándares y Control Biológico, Potters Bar, Reino Unido) y compuesto por: el VIH-1 recombinante-nef, recombinante de VIH-1 y gp120 del VIH recombinante - 1-p24 (utilizado en todos los 10 μ g / ml concentración final) [22]. Adyuvante libre de Remune y sus nativos-p24 antígenos fueron un generoso regalo del Dr Ronald Moss (la Respuesta Inmune Corporation, Carlsbad, EE.UU.) y se utilizaron en el 3 μ g / ml para garantizar que anti-VIH-1 respuestas no se pasa por alto debido a clade Variabilidad. El día 5, de 100 μ l de sobrenadante fue recogido de cada bien y almacenados a -20 ° C para su posterior medición de citoquinas, las células fueron pulsados con [3 H] timidina (Amersham International, Amersham, Reino Unido) y 16 h más tarde células fueron cosechadas en De fibra de vidrio y filtermats contados (Wallac Oy, Turku, Finlandia). Los resultados se expresan como índices de estimulación (SI), con una respuesta positiva se define como un SI de 3 o más y Δ los cargos por minuto (CPM)> 600, tal como se describe anteriormente [21 - 23]. Control de pozos, para el cálculo de la actividad de fondo, que figuran sólo PBMC.

Medición de la producción de IL-4

Cincuenta μ l de sobrenadante proliferativa de las culturas se transfirió a 96 pozos con fondo redondo de las placas por triplicado para la cuantificación de IL-4 en el indicador de línea celular CT.h4S (un generoso regalo de Paul W., Bethesda, MD) que se describió anteriormente [ 20 - 22]. En pocas palabras, CT.h4S (5 × 10 3 células / así), se agregaron en 50 μ l con 50 μ l de sobrenadante para dar un volumen final de 100 μ l. Después de 24 h en la cultura, los pozos fueron pulsados con [metil-3H] timidina, y las células fueron cosechadas como se ha descrito anteriormente. Los resultados se expresan como la media de cpm triplicado las culturas, con un error de la media de ± 15%. Un resultado positivo se define como significativa por encima de la proliferación de la actividad de fondo y umbral de detección. En todos los experimentos, un nivel de titulación indicador de la proliferación de las células a una serie de IL-4 recombinante de 0,01 a 100 U / ml se incluyó. Control de los pozos para el cálculo del indicador de la actividad de fondo que figuran sólo las células.

Análisis fenotípico de los linfocitos

PMBC fueron incubadas con un grupo de murino anti-humano mAbs (todos Beckman Coulter), durante 30 minutos a 4 ° C. Directamente conjugado anticuerpos utilizados fueron: isotiocianato de fluoresceína (FITC)-CD8, CD45RA; Phycoerytherin (PE)-CD38, HLA-DR, CD27, y CD45RA; PE-cyanine (PC-5)-CD4, todos utilizados de acuerdo a las instrucciones del fabricante . Las células fueron lavadas y fijadas en PBS que contenía 2% paraformaldehido (Sigma). En la adquisición, una puerta se estableció en torno a la población de linfocitos sobre un lado de dispersión versus dispersión dot parcela, y 10000 gated eventos recogidos para cada muestra. El análisis de los datos se realizó a través CELLQuest ™ Software (Becton Dickinson, Oxford, Reino Unido). Isotipo apropiado controles pareados se ejecute en paralelo para cada muestra.

Análisis estadístico

Los programas de computadora (Statview 5,01; Abacus, Berkeley, CA) fue usado para todos los cálculos estadísticos. Los datos se presentan como mediana (rango inter-cuartil IQR). El análisis de los datos entre los distintos grupos se realizó con un Mann-Whitney U-test y las variaciones intra-grupo se compararon mediante la prueba de los rangos con signos de Wilcoxon. Los valores de p inferior a 0,05 se consideró significativo.

Resultados
Los pacientes

Se estudió tanto IRIS y CP pacientes que habían recibido tratamiento antirretroviral eficaz por períodos similares. IRIS fue diagnosticado en una mediana de 10 meses (IQR 8-13) después de iniciar el tratamiento antirretroviral (Tabla 1]. Esto está de acuerdo con los informes anteriores [24]. Los pacientes no recuperarse de la infección subyacente MAC convencionales a pesar de recibir tratamiento contra el MAC, y se les dio IL-2 y GM-CSF en combinación con TAR como terapia de rescate, según se detalla en los materiales y métodos y como ha sido descrito previamente [9, 21] . El aumento de las células T CD4 desde la línea base a los cargos IRIS diagnóstico se observaron en todos los pacientes. Carga viral BDL alcanzado en todos los pacientes y se mantuvo indetectable a lo largo del estudio.

IRIS pacientes que reciben TAR más inmunoterapia

La inmunoterapia se inició para gravemente inmuno-comprometidos pacientes con infección por MAC exacerbado subyacente (IRIS), que no pudieron conseguir la remisión después de recibir tratamiento antirretroviral y terapia anti-micobacteriana. Cuatro pacientes con mediana de CD4 + T-células de 70 células / μ l (IQR 63-123) después de una mediana de 10 meses sobre ART, con la persistencia de la infección por MAC, recibieron IL-2 y GM-CSF (véase el cuadro 1 para el régimen farmacológico) . PPD específicos de las células T respuestas y las respuestas a otras recordar / antígenos virales estaban ausentes en todos los pacientes antes de la inmunoterapia (Fig 1a]. Después de la administración de la inmunoterapia, vimos un aumento de la mediana de CD4 + T-células a 171 células / μ l (IQR 128-302) (Tabla 1]. Por otra parte, se observó robusto antígeno-específica de células T respuestas a un grupo de antígenos incluidos PPD. Esas respuestas fueron a veces más enérgicas que las observadas en pacientes en tratamiento antirretroviral por sí sola (Fig. 1a], y fueron acompañadas de la remisión de la infección subyacente MAC. Además, la reconstitución inmune se caracteriza por un aumento de células T CD4 y las constantes viremia indetectable en plasma se logró. 4 paciente fue admitido con linfadenitis localizado MAC asociada del cuello y carecen de proliferación in vitro respuestas a PPD y otros antígenos de recordar a pesar de CD4 de células T de 280 células / μ l de sangre. Después de la administración de la inmunoterapia se observó una rápida recuperación de la función inmunológica (Fig 2a]. Las manifestaciones clínicas paralelo representado una mejora de la lesión de cuello después de la terapia IL-2 y la remisión completa después de la administración de IL-2, además de GM-CSF (Fig 2b-d]. También se observó un aumento de CD4 de células T de 280 a 601 células / μ l durante este período (Cuadro 1]. No se observaron cambios significativos en el VIH-1 específica de las respuestas de células T, que sigue siendo indetectable a lo largo del estudio (Fig 1b].

En 3 / 4 IRIS pacientes a los que llevaron a cabo bioensayos IL-4 en sobrenadantes cultura, en lugar de ELISA, con el fin de evaluar los niveles de citoquinas que se producen bioactivos. Hemos podido detectar la producción de IL-4 en las culturas con antígenos a los que los pacientes habían sido previamente expuestos incluyendo anti-PPD respuestas de 2 / 3 de los pacientes (Fig. 3]. Al inicio de la inmunoterapia se produjo una disminución en la producción de IL-4, que fue acompañado de restauración de la proliferativa específica anti-PPD-células T respuestas.

Linfoproliferativo de células T respuestas a recordar / antígenos virales en la clínica progressors asintomáticos y controles seronegativos

Se evaluó la proliferación de las células-T en el PC y los controles no infectados (UC) y de estos en comparación con las respuestas IRIS visto en los pacientes. CP presentó una mediana de 3,9 veces mayor en las células CD4 de células T-6 meses después del inicio de TAR de 76 células / μ l (IQR 22,5-90) a 249 células / μ l (IQR 187,5-303,5) (p <0,001) (Tabla 1 ). Estos pacientes permanecieron clínicamente asintomáticos y ha específicos de células T respuestas a recordar por lo menos un antígeno (Fig 4]. Todos UC mostró vigoroso respuestas a recordar los antígenos (fig. 4].

Citometría de flujo reveló mayores niveles de CD38 y HLA-DR expresión y niveles más bajos de células T CD4 ingenuo IRIS en pacientes asintomáticos que en la clínica progressors

En comparación con los PC, IRIS, los pacientes mostraron significativamente más altos porcentajes de CD4 + HLA-DR + linfocitos T (p <0,005), y significativamente más altos porcentajes de CD8 + CD38 + células T (p <0.05) (Tabla 2]. Cuando la activación se cuantificó en una base por célula, IRIS pacientes mostraron niveles más altos de activación de los CD4 y las células T CD8 comparación con los PC (p <0,02 yp <0,01, respectivamente), como se ha demostrado mediante el análisis de la media de los niveles de intensidad de fluorescencia Expresión de CD38 (Cuadro 2]. Además, la mediana del porcentaje de CD4 + naïve CD45RA + CD27 + T en células IRIS pacientes fue significativamente menor que en los PC y UC (p <0,005). Estas observaciones no son sorprendentes como IRIS pacientes inmuno-fueron más comprometida cuando la terapia se inició IRIS, lo que sugiere que puede ser asociada con la persistencia de ambos hyperactivation de CD4 y los linfocitos T CD8, y se asocia con una falta de células T CD4 ingenua posiblemente debido a la ausencia de timo Función.

Discusión

Reconstitución inmune después de iniciar el tratamiento antirretroviral puede ser concurrente con un aumento de la inmuno-respuesta patológica contra patógenos oportunistas y con la inducción de IRIS [11 - 19, 24]. El IRIS fenómeno ha sido atribuído a vigorosa respuesta inmune específica subyacente a los agentes patógenos, con manifestaciones clínicas relacionadas con la respuesta inmune contra esos agentes patógenos suscitado. Típicamente, los pacientes IRIS tiene una carga viral indetectable y CD4 de células T cuenta que han aumentado rápidamente, por 3 o 4 veces, poco después de iniciar el tratamiento antirretroviral. Estudios anteriores han utilizado de hipersensibilidad de tipo retardado (DTH) pruebas para evaluar la inmunidad celular de estos pacientes [12, 14, 15]. En cambio, hemos utilizado la incorporación de timidina ensayo para evaluar la proliferación de linfocitos. Esto permite la visualización in vitro de la función inmunológica de los linfocitos T en la sangre periférica y la comparación directa con asintomática por VIH-1 + asignaturas, así como los controles no infectados. Algunos informes han demostrado la falta de correlación entre estos dos ensayos [25], como funcionalmente de la proliferación de las células T y las respuestas DTH pueden divergir [26]. Por lo tanto, por la utilización de la incorporación de timidina ensayo, que demuestran la correlación entre los datos in vitro funcionales y clínicos de pruebas.

Hubo dos hallazgos importantes en este estudio. En primer lugar, los pacientes ingresados con IRIS carecían de antígeno-específica de células T respuestas. En segundo lugar, la administración de IL-2 y GM-CSF apareció rápidamente introducir estas respuestas y se asoció a la recuperación clínica en pacientes con avanzada infección por VIH-1.

Los datos de los controles no infectados asintomáticos y tratados clínicos progressors, reveló la presencia de las respuestas linfoproliferativas a recordar / antígenos virales, en comparación con los pacientes IRIS, que confirma que los linfocitos T funcionales específicas están relacionadas con el control de las infecciones oportunistas. Así, el cuadro clínico presentado por nuestra cohorte de pacientes IRIS es probable que se asocie a la falta de linfoproliferación y la producción de IL-2 en vez de con la sólida antígeno-específica de células T respuestas. Esto sugiere una alternativa o mecanismo adicional para IRIS, que se diferencia de las anteriores hipótesis que sugieren que el IRIS es causada por patógenos específicos de las respuestas inducidas por el éxito de ART.

De la nota, en general, son la debilidad de las respuestas de proliferación observado en respuesta a otros patógenos, como CMV, que recupera después de iniciar el tratamiento antirretroviral [27, 28]. Aunque completo deterioro inmunológico parece estar confinado a VIH-1 y el PPD antígenos, otros estudios han informado de CMV-respuestas concretas a permanecer en general sin cambios en el VIH-1 + pacientes, independientemente de la de los pacientes la carga viral de VIH y estado clínico [29]. Diferentes razones pueden explicar esta observación: viremia por CMV es con frecuencia muy bajos o no detectables y, por tanto, no inducir las respuestas de células T robusto [29]; además CMV no se dirige ni a las células presentadoras de antígenos, como los macrófagos y las células dendríticas, por lo tanto, permitir la presentación de antígeno no infectada Células para realizar de manera eficiente el procesamiento y la presentación y para generar células T específicas de las respuestas - a diferencia de las micobacterias y el VIH-1 que son conocidos que atacan a las células presentadoras de antígenos. Además, nuestro grupo ha demostrado que, en general, y el VHS-CMV específicos de las respuestas de células T parece ser más sólida en ambas PC y LTNP [22, 28].

Los mecanismos detrás de IRIS sigue siendo difícil de alcanzar. A través de la célula a célula contacto, diversas y complejas interacciones moleculares y la producción de citoquinas, los linfocitos CD4 T helper modular la actividad de todas las células que participan en ambos innata y la inmunidad adquirida, incluidos los virus específicos de los linfocitos T citotóxicos CD8 [30 - 33]. Aunque la lucha contra el VIH-1 en las células T CD8 están presentes en las personas con infección crónica, que carecen de propiedades funcionales específicas, más probable es que las células T CD4 ayuda se altera [34 - 37]. El VIH-1 inducida por defecto de las células T CD4 respuestas es probable que sea un mecanismo causal de anergia y, posteriormente, IRIS, debido a un defecto en la presentación antigénica y la falta de células T ayuda.

El uso de la inmunoterapia en severamente inmuno-comprometidos pacientes ha demostrado tener efectos beneficiosos en la inversión de la parte de células T CD4 defectos ejercida por el VIH-1, cuando se administra concomitantemente con ART [9, 21]. Estos datos de acuerdo con nuestros resultados anteriores que la administración concomitante de ART y de la IL-2 plus GM-CSF invertido el tipo 2, de lucha contra la proliferación de citoquinas medio ambiente, la disminución de los niveles de IL-4 y la inducción de proliferación de patógenos específicos de las respuestas. Anteriormente hemos demostrado que esos regímenes inducir por VIH-1 específicos de proliferación de CD4 y IFN-γ secretora de células T CD8. En estos estudios, el VIH-1-proliferativa respuestas concretas acompañado de una mayor producción de IL-2, la capacidad de respuesta y hasta regulado expresión de la IL-2 específicos de ARNm se asociaron con la remisión de la enfermedad [21]. Es importante señalar que, en estudios previos, el GM-CSF se administró a dosis de dos veces el nivel de los que se describen aquí, de este modo, posiblemente, la inducción de VIH-1 específicos de la inmunidad. Esto puede explicar nuestra incapacidad para inducir detectables por VIH-1 de células T específicas de las respuestas a pesar de una disminución en la producción de IL-4. Independientemente, en nuestra cohorte de beneficiarios de la inmunoterapia, la remisión de MAC se produjo rápidamente, a pesar de profunda inmuno-represión.

Durante la infección por VIH-1 es inmune hyperactivation acompañada de la regulación de la expresión de superficie CD38 y HLA-DR CD4 y CD8 en las células T [38 - 41]. Superior de la activación de células T en la cohorte IRIS comparación con los PC no es sorprendente, ya que las células T específicas de las respuestas fueron mucho más bajos en pacientes IRIS. Esto está en concordancia con los datos de Caruso et al describir la ocasional falta de correlación entre el porcentaje de células T que expresan marcadores de activación y de la incorporación de timidina [42]. Se sugiere que hyperactivation por el VIH-1 y de otros agentes patógenos en que se asocia a la muerte celular inducida por la activación y / o anergia [43]. Además, los altos niveles de HLA-DR son indicativos de un aumento de células T ↔ presentación de antígenos de células T, que está asociado con la inducción de anergia de células T / disfunción y el aumento de la producción de IL-4 [44, 45]. Esto está de acuerdo con nuestros resultados anteriores que anergised antígeno-específicos de las células T están presentes en la línea de base en pacientes inmunocomprometidos, pero la falta de proliferación / capacidad funcional [21]. Los niveles más bajos de células T ingenuas IRIS observada en los pacientes en comparación con los PC puede ser debido a un estado más inmunodeprimidos y posiblemente reflejan disfunción tímica / inactividad.

Nuestros datos sugieren que el grado de reconstitución inmune logrado con potentes solos ART depende de la etapa clínica de la paciente, cuando se inició la terapia. Además, hypothesise que, en algunos pacientes la fase tardía de la ART Mayo recabar la ampliación de los anormales / anérgicos clones de células T responsable de una errática respuesta inmune. La administración concomitante de la IL-2 y GM-CSF puede estar asociada con la provisión de señales de proliferación de timocitos inmaduros y / o rescate de las células T CD4 anérgicos para generar completamente funcional de células T respuestas. GM-CSF actúa directamente sobre células presentadoras de antígeno, incluyendo los macrófagos, lo que puede inducir y contribuir a una más rápida remisión de la infección intracelular [46 - 48].

Conclusión

En conclusión, la reconstitución inmune inducida ART restaura respuestas concretas, que pueden ayudar en la remoción de patógenos oportunistas. Sin embargo, la insuficiencia de la respuesta inmune observados en tratados fases avanzadas de la enfermedad, además de otros posibles de confusión, puede ser causal de IRIS. La administración de IL-2 y GM-CSF concomitantemente con ART en la fase tardía de los pacientes puede resultar en la proliferación de patógenos específicos de los linfocitos T CD4, lo que probablemente permitirá una mayor rapidez en la limpieza de patógenos intracelulares como Mycobacterium avium. Esas respuestas pueden estar asociados con un mejor resultado y, posiblemente, una recuperación más rápida, en pacientes inmuno-comprometidos que no alcanzan la reconstitución inmune con ART sola, lo que indica que este abordaje terapéutico como tratamiento de rescate inmuno-puede tener un impacto sobre la mortalidad a corto plazo. El pequeño número de pacientes-es digno de mención, no obstante, este es un interesante y provocadora conclusión de que merece mayor estudio prospectivo en un mayor número de pacientes similares.

Conflicto de intereses

Los autores declaran que no tienen intereses en conflicto.

Contribuciones de los autores

AP llevado a cabo ensayos de la proliferación, el análisis fenotípico, el análisis de datos, participó en el diseño del estudio y escribió el manuscrito. MN, ALP, MF y BG pacientes reclutados y participó en el diseño del estudio. FG participó en el diseño del estudio y participó en la redacción del manuscrito. NI concibe el estudio, llevado a cabo ensayos de proliferación y bioensayos, análisis de datos y el diseño, coordinación, el proyecto y la finalización del manuscrito. Todos los autores leído y aprobado el manuscrito final.

Agradecimientos

Nos gustaría agradecer a todos los pacientes y el personal en el Chelsea & Westminster Hospital que participaron en este estudio; Ron Moss de la Respuesta Inmune Corp, Carlsbad San Diego, CA, para el conjunto del VIH-1 y el antígeno "nativas" clade G p24. Esta labor fue apoyada por el Wellcome Trust (Grant número: 058700) y el Programa de la UE AVIP (Grant número: LSHP-CT-2004-503487).