Journal of Autoimmune Diseases, 2006; 3: 2-2 (más artículos en esta revista)

Activación de células endoteliales y neovascularización son prominentes en dermatomiositis

BioMed Central
Kanneboyina Nagaraju (knagaraju@cnmcresearch.org) [1], Lisa Rider G (riderl@mail.nih.gov) [2], Chenguang Fan (CFan@cnmcresearch.org) [1], Yi-Wen Chen (YChen @ cnmcresearch . Org) [1], Megan Mitsak (mmitsak1@jhmi.edu) [3], Rashmi Rawat (rrawat67@yahoo.com) [3], Kathleen Patterson (kathy.patterson @ seattlechildrens.org) [5], Cecilia Grundtman (Cecilia.Grundtman @ cmm.ki.se) [6], Frederick Miller W (millerf@mail.nih.gov) [2], Paul H Plotz (plotzp@arb.niams.nih.gov) [4], Eric Hoffman (EHoffman@cnmcresearch.org) [1], Ingrid E Lundberg (ingrid.lundberg @ medks.ki.se) [6]
[1] Children's National Medical Center, Research Center for Genetic Medicine, 111 Michigan Ave NW, Washington DC, 20010, USA
[2] Grupo de Autoinmunidad Ambiental, NIEHS, Institutos Nacionales de Salud, Departamento de Salud y Servicios Humanos, Bethesda, MD, EE.UU.
[3] John Hopkins School of Medicine, Baltimore, MD, EE.UU.
[4] Arthritis and Rheumatism Subdivisión, NIAMS, los Institutos Nacionales de Salud, Departamento de Salud y Servicios Humanos, Bethesda, MD, EE.UU.
[5] Children's Hospital Medical Center, Seattle, WA, EE.UU.
[6] Unidad de Reumatología, Departamento de Medicina, Hospital de la Universidad Karolinska, Solna, Estocolmo, Suecia

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Resumen
Antecedentes

Aunque inmune y alteraciones vasculares son frecuentes en menores y adultos dermatomiositis (DM), los cambios moleculares que contribuyen a estas anomalías no son claras. Por lo tanto, se determinó que las vías de facilitar la formación de nuevos vasos sanguíneos y la migración de células dendríticas en la dermatomiositis.

Métodos

Biopsias musculares de pacientes con DM (9 niños y 6 adultos) y los controles no miositis (6 adultos y 7 niños) fueron investigados por inmunohistoquímica utilizando anticuerpos que reconocen a los actuales (anti-CD146) y la recién formada vasos sanguíneos (anti-α V β3) y Madurar las células dendríticas (anti-DC-LAMP). Vaso sanguíneo cuantificación se realizó por el análisis de las imágenes digitalizadas. Adicional biopsias musculares provenientes de sujetos adultos con DM y no miositis controles se utilizaron para el mundial de perfiles de expresión génica experimentos.

Resultados

Un aumento significativo de la neovascularización se encontró en biopsias musculares de los pacientes diabéticos; neovascularización (α V β3 positivo y vasos capilares por fibra muscular) fue mucho mayor en los menores que en los pacientes diabéticos adultos (menores de control vs DM: La media ± SE: 0,06 ± 0,01 vs 0,6 ± 0,05, p <0,0001 y el control de adultos vs DM: La media ± SE: 0,60 ± 0,1 vs 0,75 ± 0,1, p = 0,051). La expresión de genes demostrado que los genes que participan no sólo en la angiogénesis, sino también en el tráfico de leucocitos y de la cascada del complemento fueron muy regulados hasta en DM muscular en comparación con controles pareados por edad. DC-LAMP positiva células dendríticas eran altamente enriquecido en inflamatorio perivascular en sitios de menores y adultos a lo largo de los pacientes con DM moléculas que facilitan la transmigración de células dendríticas e invertir el proceso de transmigración (CD31 y CD142).

Conclusión

Estos resultados sugieren neovascularización activa y en la activación de células endoteliales tanto de menores y adultos DM. Es probable que la estrecha asociación de los monocitos a las células endoteliales iniciar rápida maduración de las células dendríticas y una respuesta autoinmune en DM.

Antecedentes

Miopatías inflamatorias idiopáticas (polimiositis (PM), dermatomiositis (DM) y las condiciones) son un grupo heterogéneo de trastornos autoinmunes cuyas causas y patogénesis siendo poco claros. En DM, se producen cambios inflamatorios en el músculo y en la piel. Aunque no ha habido una comparación directa, los cambios patológicos en juveniles y adultos DM parecen ser similares, salvo que todas las características patológicas de base son más prominentes en la infancia. Las principales alteraciones histopatológicas en DM se encuentran en relación a los vasos sanguíneos del tejido conectivo del músculo, la piel y el tracto gastrointestinal. En DM, el exudado inflamatorio es predominantemente perivascular y perimysial y, en menor medida endomysial. En menores DM, intramuscular vasos sanguíneos también muestran hiperplasia endotelial, complejos inmunes y complemento de la deposición, y los coordinadores de la pérdida de los capilares [1]. Se cree que en los adultos DM, precede a la pérdida capilar otros cambios patológicos en el músculo, y que el endotelio capilar es una temprana y, posiblemente, blanco principal de ataque inmune [2, 3]. Una reacción fisiológica a la pérdida capilar sería la formación de nuevos vasos sanguíneos, pero las pruebas de tales neovascularización en los pacientes diabéticos no hayan sido previamente investigados.

El reclutamiento de leucocitos en la captura implica secuencial, a lo largo de móvil y la firme adhesión al endotelio microvascular, seguida de la transmigración de leucocitos a través de la pared de vasos, y más en la migración extra-vascular del tejido [4]. Los pasos de la contratación en cascada son orquestados por la moléculas de adhesión de los leucocitos y las células endoteliales; diferentes subconjuntos de moléculas de adhesión son responsables de los distintos pasos. Estudios anteriores han demostrado que las moléculas de adhesión que facilitan la transmigración de leucocitos están reguladas en los capilares de la MS tejido muscular, lo que sugiere una participación activa en la contratación del infiltrado inflamatorio en el tejido muscular [5]. Monocitos derivados de las células dendríticas juegan un papel fundamental en el control de la inmunidad mediante la activación de las células T ingenuas. Monocitos salir del torrente sanguíneo por las células endoteliales de transmigración, hundir los antígenos del tejido, diferenciarse a células dendríticas maduras, y, finalmente, invertir la transmigrate en los ganglios linfáticos para activar células T ingenuas. Recientes estudios in vitro demuestran que PECAM-1 (CD31) y factor tisular (CD142) juegan un papel fundamental en la transmigración y el reverso de transmigración respectivamente [6, 7].

Angiogénesis es un componente importante de la respuesta inflamatoria, durante el cual se forman nuevos vasos preexistentes de los brotes y no a través de mecanismos de la brotación. Debido a la situación de la angiogénesis en la miositis no se conoce, hemos centrado nuestra atención en la identificación de los procesos moleculares que faciliten la angiogénesis y de la respuesta inmune en la DM. Nuestro primer objetivo era demostrar si existen indicios de la angiogénesis en el tejido muscular de los pacientes con DM juvenil y de adultos. Un segundo objetivo es la identificación de vías moleculares que son relevantes para la angiogénesis por perfiles de expresión génica mediante biopsias musculares de los pacientes diabéticos adultos, y un tercer objetivo era investigar si las células dendríticas y las moléculas que facilitar su entrada y salida se presente en vivo en el inflamado Tejido muscular de los pacientes diabéticos.

Métodos
Los pacientes

Todas las muestras de tejidos humanos se gestionan de acuerdo con los Institutos Nacionales de Salud y la Johns Hopkins School of Medicine IRB directrices. Biopsias musculares de nueve menores DM pacientes no tratados (edad, años: 6,7 ± 3,2) y seis no miositis infancia controles (edad, años: 11,5 ± 2,9), junto con seis de los pacientes diabéticos adultos (años de edad: 39,4 ± 16,9) y siete Normal adulto controles (edad, años: 37,5 ± 13,9) fueron utilizados para inmunohistoquímica. Miositis pacientes cumplen con los criterios diagnósticos de Bohan y Peter [8]. Todos los pacientes diabéticos adultos habían erupción de la piel, debilidad muscular, elevación de los niveles séricos de las enzimas musculares y EMG positiva o una biopsia muscular positiva. El examen histológico reveló que la inflamación era irregular y algunas fibras musculares aguarda aparentemente normal en algunas biopsias. No es raro que algunas fibras musculares en una biopsia para buscar DM aparentemente normal. Biopsias musculares de un grupo de 5 mujeres adultos no tratados DM pacientes (edad, años: 48,5 ± 14,8) y fueron perfilados en comparación con el tejido muscular del músculo humano normal (NHM), de cuatro voluntarios sanos (edad, años: 43,5 ± 12,1). De perfiles de expresión de genes que no se hizo en pacientes menores de DM en este momento debido a la no disponibilidad de tejido muscular adecuada para la extracción de RNA.

Inmunohistoquímica

La inmunohistoquímica se realizó como se describió anteriormente [9]. La superficie celular CD146 molécula de adhesión ha sido identificado como un marcador de células endoteliales [10], mientras que la adhesión del receptor α V β3 se ha identificado como un marcador de angiogénicos tejido vascular [11]. Hemos utilizado anticuerpos anti-CD146 como un pan-endotelial marcador para evaluar todos los vasos sanguíneos y de la integrina α V β3 anticuerpos para evaluar la formación de nuevos vasos sanguíneos. Los siguientes anticuerpos primarios fueron utilizados para la detección de marcadores de células endoteliales (ratón anti-humano-α V β3 (1:50) (Chemicon); ratón anti-humano-CD146 (1:60) (Chemicon), anti-CD31 humano (1:20 ) (Dako), anti-humano CD142 (BD Pharmingen), y marcadores de células dendríticas (ratón anti-humano DC-LAMP (1:10) (Immunotech). Anti-ratón HRP (1:500) (Dako) y anti - Conejo HRP (1:500) (Dako) se utilizaron como secundario y terciario anticuerpos. Isotype concordancia Igs ratón y conejo normal suero se utilizaron como controles negativos. Biopsias musculares son seriados (8-10 μ m) y manchadas de CD146 (endotelial ) Y α V β3 anticuerpos. Digital de imágenes (Axiovision V3.1 software), de secciones teñidas fueron hechas con un microscopio (Axioscope, Carl Zeiss). Ocho a diez no superposición de los campos (objetivo 20X) por muestra se utilizaron para el análisis de imágenes. Todas las muestras Fueron analizados independientemente por dos personas que fueron cegados a la condición clínica. El número de nuevos vasos sanguíneos o capilares por fibra muscular se calculó para cada grupo de enfermedades. El análisis estadístico se realizó por la prueba t de Student.

ARNm de perfiles

ARN total fue extraído a partir de la biopsia de músculo o tejido individualmente usando el reactivo TRIzol (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Diez microgramos de RNA total de cada muestra fueron procesadas como ha sido descrito previamente [12, 13]. Un solo cRNA muestra de cada muestra se aplicó a Affymetrix U133A microarrays. Las matrices se tiñeron con ficoeritrina-streptavidina, y la intensidad de la señal se amplificó por el tratamiento con un conjugado anti-biotina-streptavidina anticuerpos seguida de una segunda mancha de streptavidina-ficoeritrina. Segunda-manchado arrays fueron digitalizadas en un Hewlett-Packard G2500A Gene Array Scanner con el tubo fotomultiplicador fijado en 1800V.

MRNA perfil de los controles de calidad y la normalización

Los perfiles se normalizaron para inter-chip intensidad de la expansión por variación de la intensidad global de cada perfil a 800, absoluta y análisis para cada perfil se generó con Affymetrix Microarray Suite 5,0 software. Cada perfil fue sometido a una serie de estrictos controles de calidad: factor de escala <4, llamadas presente> 30%, establecer controles internos sonda 5 '/ 3' ratios> 0,6. Todos los perfiles aprobado medidas de control de calidad, tal como se describe anteriormente [14]. Todos los archivos asociados con este análisis se encuentran disponibles en nuestra página web [15]. Todos los datos son también depositados a NCBI GEO, a través de una presentación personalizada automatizado Microarray oleoducto entre el Centro Nacional de la Infancia en el Centro Médico de NCBI y GEO. Tomamos nota de que hay una serie de métodos alternativos para el análisis conjunto y la sonda normalizations arrays de Affymetrix (como ProbeProfiler, dCHIP, RMA), y los diferentes resultados que se pueden obtener con diferentes métodos de análisis. Recientemente hemos demostrado que un análisis utilizando MAS 5,0, con un 10% presente convocatoria filtro ofrece una excelente relación señal / ruido de los niveles de diagnóstico para la delimitación de grupos humanos en biopsias musculares [16], y este es el método utilizado para el análisis actual.

El análisis de los datos

De los perfiles de expresión de genes fueron generados a partir de la enfermedad y el uso de grupos de control de alta densidad de oligonucleótidos arrays. El MAS 5,0 y el 10% presente convocatoria filtro fue como en nuestras publicaciones anteriores [12, 17, 18]. U133A arrays tener acerca de la sonda 22000 establece la codificación de la mayoría de los genes confirmados. Expresión cambios inicialmente se evaluó a través de un par de Welch's t test, sin la corrección en función de múltiples ensayos, el uso de software GeneSpring ™ (Silicon Genética, Redwood City, CA). Genes expresados diferencialmente entre MS y fueron identificados por NHM-test T (p <0,05) y doble cambio (más de 2 veces). Manualmente se agrupan los genes más agrupado con GeneSpring para visualizar grupos de genes con similar patrón de expresión. De genes de plantas y flores de color de la expresión de la media de todo el grupo. Gene función se basó en la información disponible en las bases de datos públicas o en la literatura.

Resultados
Neoangiogenesis en DM

Los vasos sanguíneos en el músculo normal de los tejidos teñidos débilmente para CD146, mientras que una más intensa se observó en la tinción de los capilares (células endoteliales y pericitos) adultos y de menores biopsias de DM (Fig. 1]. También se han observado algunos CD146 tinción no específica, en algunas de las fibras musculares del paciente biopsias. Capilares en el músculo normal de los tejidos fueron en general negativos para el marcador neoangiogenesis α V β3 salvo en ocasiones positivo para las grandes embarcaciones, mientras que un número significativo de los capilares y vasos sanguíneos grandes fueron fuertemente teñidas con α β3 V en la de adultos y de menores biopsias de DM (Fig. 2]. Estimación de la serie CD146 positivas de los vasos sanguíneos (grandes vasos y capilares) por fibra muscular no mostraron diferencias significativas entre los niños menores de MS y controles (control vs JDM: media ± SE: 1,0 ± 0,2 vs 1,0 ± 0,3, p = ns); Mientras que el número de buques CD146 positivas de sangre por fibra se redujo significativamente en adultos DM, en comparación con los adultos controles (control vs DM: La media ± SE: 2,2 ± 0,3 vs 1,3 ± 0,2, p <0,05). Estimación de la cantidad de α V β3 positivo vasos sanguíneos mostraron significativamente mayor número de α V β3 positivo vasos sanguíneos por fibra en el JDM biopsias de la infancia en comparación con los controles (control vs JDM: media ± SE: 0,06 ± 0,01 vs 0,6 ± 0,05, p <0,0001 ). En las biopsias de los pacientes diabéticos adultos también hubo un aumento de la α V β3 positiva de fibra por los vasos sanguíneos en comparación con los controles adultos, pero esto no fue significativo (control vs DM: La media ± SE: 0,60 ± 0,1 vs 0,75 ± 0,1, p = 0.051).

Angiogénicos y anti-genes angiogénicos en DM

Debido a la evidencia de aumento de la angiogénesis en DM, el próximo decidió examinar la situación de los genes que influyen en la vía por angiogénicos mundial de perfiles de expresión génica. Análisis de perfil de la expresión genética de las biopsias de los pacientes diabéticos adultos mostró que los niveles de ARNm de los genes que participan en la adhesión endotelial (por ejemplo, catepsina B (CTSB), endo-1 antígeno asociado (CD146)), la proliferación (por ejemplo, la ciclina D1), la diferenciación (Por ejemplo, proteínas dentada), la migración (por ejemplo, el factor de crecimiento hepatocitos), y la activación (por ejemplo, inositol 1,4,5 trisphosphate receptor tipo 1 (ITPR1), la hipoxia-inducible factor 1 subunidad alfa (HIF1A), de peaje-como los receptores 3, y angiogénicos inductor 61) están regulados en los pacientes diabéticos comparados con los controles. Esto sugiere que las moléculas de importancia crítica para la iniciación de angiogénicos respuesta de la migración de células endoteliales, y la proliferación y maduración de neovasculature, son activas en los pacientes diabéticos en comparación con los controles (Fig. 3].

Sea o no la angiogénesis se produce en un tejido depende del equilibrio entre las cantidades relativas de favor y en contra de factores angiogénicos [19]. Análisis y control de miositis tejidos musculares también mostraron una significativa hasta la regulación de los genes anti-angiogénicos (angiopoietin-2, tryptophenyl tRNA-sintetasa, el receptor de interleuquina 10, y TGF-beta) en los pacientes diabéticos que sugiere un curso anti-angiogénicos respuesta (Fig . 3].

El endotelio originalmente identificado marcadores que se asocian con el reclutamiento de leucocitos también participan en la neovascularización, lo que sugiere una doble función, no sólo en la adhesión de leucocitos-endotelio sino también en la angiogénesis [20]. Significativo sobre regulación de los marcadores que participan en el tráfico tanto de leucocitos y la angiogénesis (por ejemplo, CX3CL1, CCR1, CD47, VCAM-1, ICAM-1, PECAM1 y ICAM2) se observó en los pacientes diabéticos (Fig. 3].

Se ha demostrado que anteriormente complejos inmunes y complemento de la deposición se produce en arteriolas y capilares de los pacientes diabéticos [2, 21]. Desde la cascada del complemento está estrechamente asociada no sólo con los vasos daños, pero también con la angiogénesis, hemos estudiado específicamente para los miembros de la cascada del complemento que facilitar la angiogénesis. Encontramos que tanto clásica cascada de complemento y miembros suplentes, junto con los reguladores (Factor-B, C7, Factor-I, C1S, el factor H, y C4) son altamente reguladas hasta en los pacientes diabéticos (Fig. 3].

DC-LAMP positiva células dendríticas en DM

La expresión de genes de muestras de adultos DM muestra claramente que ambos PECAM1 y factor tisular son muy upregulated en estos pacientes, como son varios de células dendríticas / macrófagos marcadores de la maduración (FLT3 ligando, CD68, CD11B, DC-LAMP, HLA-DQ, HLA-DRB, Y B7-2) (datos no presentados). Hemos confirmado la presencia de DC-LAMP positiva células dendríticas en la inflamatorio perivascular lugares, a menudo muy cerca de los vasos sanguíneos en pacientes con miositis (Fig. 4]. El análisis inmunohistoquímico también sugiere que los genes que facilitan la transmigración y revertir la transmigración (CD31 y CD142) de las células dendríticas son upregulated en los vasos sanguíneos de los dos menores (Fig. 5 paneles superiores) y los pacientes diabéticos adultos (datos no presentados) y el DC-LAMP Positivas las células dendríticas en las inmediaciones de CD31 positivo vasos sanguíneos (Fig. 5 paneles inferiores). Encontramos modesto tinción de los vasos sanguíneos de ambos CD 31 y CD 142 en el control de biopsias (datos no presentados).

Discusión

Inmunohistoquímico y análisis de la expresión génica global de grupos independientes de las muestras de músculo de DM que se dejaba claro que la angiogénesis y de los genes que influyen en la angiogénesis, la migración de leucocitos, y complementar la activación son muy upregulated en DM. De perfiles de expresión también sugiere que varios marcadores de células dendríticas están reguladas en los pacientes diabéticos. Hemos confirmado la presencia de DC-LAMP positiva células dendríticas que son en su mayoría localizados en zonas perivasculares de la inflamación y en las inmediaciones de los vasos sanguíneos. Menores y adultos, los pacientes diabéticos también había células dendríticas en las inmediaciones de los vasos sanguíneos que expresan antígenos (por ejemplo, PECAM y factor de tejido) que faciliten su transmigración y revertir la transmigración.

Se sabe que la capilaridad músculo esquelético es muy dinámico, por ejemplo ejercicio repetido resultados en el aumento de la capilaridad y la inactividad resultados en la reducción de capilaridad [22]. Hay poca información, sin embargo, son los caminos moleculares que influyen en la formación de capilares en enfermedades inflamatorias musculares. Angiogénesis es silente en adultos en general, con la excepción de ciertas situaciones fisiológicas estrechamente controlados como funciones reproductiva de la mujer y la regeneración de los tejidos y la reparación [23]. Es un hecho ampliamente aceptado que el "angiogénicos cambiar" es "off", cuando el efecto de las moléculas pro-angiogénicos es equilibrada por la de las moléculas anti-angiogénicos y está 'en la' cuando el saldo neto se inclinó a favor de la angiogénesis [24] . Las contribuciones relativas de los dos pro-y anti-angiogénicos factores que pueden contribuir a cambiar la red vascular en un tejido enfermo. Aunque exacta de los mecanismos de control de la angiogénesis en el músculo inflamado no se comprenden totalmente, mecánica, los grandes estímulos para la neo-vascularización son la hipoxia y la inflamación. Inflamatoria señales reclutar linfocitos y macrófagos en las áreas de neovascularización que además actúan como fuente de factores angiogénicos y arteriogenic.

Se ha demostrado previamente que existe un importante pérdida capilar en el músculo de los pacientes diabéticos adultos asociados a la deposición de la tarde los componentes de la vía del complemento [21]. Nuestros resultados actuales 146 CD utilizando anticuerpos apoyo y confirmar los resultados anteriores en adultos DM. También se sugirió que la pérdida de capilares similares se producen en los pacientes diabéticos menores, pero no ha habido estudios sistemáticos cuantitativos hacer frente a la pérdida capilar de menores en los pacientes diabéticos. Nuestros datos de menores en los pacientes diabéticos en comparación con los niños no inflamatorias miopáticos controles sugieren que no es significativa, a pesar de la pérdida neta capilar activado en el sistema de complemento de menores los pacientes diabéticos. Estos resultados sugieren que la pérdida capilar, ya sea de manera eficaz es compensada por la formación de capilares nuevos sólidos o complemento mediado daño es modesto. En adultos el número de DM α V β3 positivo capilares (nuevo) no es significativamente diferente de la de los controles. El modesto aumento de nuevos capilares en adultos DM sugiere también la pérdida permanente de los actuales capilares. Nuestros resultados confirman y extienden publicados anteriormente la expresión de genes de datos, así como los recientes estudios que muestran sobre regulación de los factores relacionados con la angiogénesis (HIF-1beta, alphaV beta3, VEGFR-1) en las biopsias de DM [25, 26]

Aunque los trabajos anteriores ha demostrado una disminución de los capilares en DM, pero no PM, nuestros resultados sugieren que existe una significativa upregulation de varias vías que iniciar la angiogénesis en miositis. Los nuevos capilares son muy significativamente en el aumento de JDM, en comparación con los controles respectivos. Por ello, parece que la asociación entre lesiones y miositis neovascularización no es simplemente un epifenómeno, sino que representa un mecanismo de compensación. En este estudio todos los pacientes diabéticos adultos se utilizaron para el análisis de inmunohistoquímica fueron tratados con Prednisone. Las diferencias en las respuestas angiogénicos entre menores y adultos, los pacientes diabéticos no es probable debido a la medicación, ya que la expresión de genes de perfiles de los pacientes diabéticos adultos no tratados también aparecen regulados los genes angiogénicos.

Condiciones patológicas, como el proceso inflamatorio, puede perturbar el estado de reposo de las células endoteliales y promover transendothelial migración de las células y la pérdida de las moléculas que se necesitan en sitios específicos. Leucocitos inflamados interacciones con las células endoteliales son mediados por selectins, que incluyen la señalización de moléculas de lípidos y quimiocinas, integrinas y sus ligandos, y ocasiones presentan moléculas. Varias de estas moléculas que se identificaron inicialmente a desempeñar un papel en el tráfico de leucocitos también se han encontrado para influir en la activación de células endoteliales, la proliferación y la diferenciación. Por ejemplo, la activación de los diferentes productos pueden complementar el tratamiento antitrombótico perturbar estado quiescente de las células endoteliales de diversos mecanismos, por ejemplo C5a causas de la liberación de sulfato de heparina de las células endoteliales, y el complejo de ataque de membrana es ahora ampliamente reconocido como un potente promotor de la coagulación [27] . El complejo de ataque de membrana añadido a las células endoteliales en sublytic concentraciones induce la liberación de Factor von Willebrand, que a su vez favorece la adherencia de plaquetas a la pared vascular [28], y promueve la reunión de prothrombinase por la exposición de fosfolípidos [29].

Células dendríticas son células presentadoras de antígenos con la capacidad única de iniciar una respuesta inmune. Células dendríticas inmaduras se localizan en tejidos periféricos en el que ejercer una función de vigilancia para los antígenos. Después de la captura de antígeno y la exposición a estímulos inflamatorios, las células dendríticas someterse a la maduración y migran a los ganglios linfáticos regionales, donde la presentación de péptidos antigénicos a los linfocitos T tiene lugar. Se sabe que algunos monocitos diferenciar en células dendríticas en respuesta a señales que son endógenos a las células endoteliales [6, 30]. Paso de los leucocitos a través del revestimiento del endotelio en los sitios de la inflamación ha demostrado ser regulada principalmente por plaquetas y células endoteliales molécula de adhesión-1 (PECAM/CD31) y la transmigración implica invertir p-glicoproteína y factor tisular expresadas en los leucocitos. En el reverso transmigrating células se mostraron como las células dendríticas [6]. Ambos factor tisular y PECAM son altamente significativa expresó DM pacientes sugiriendo una participación activa en la migración de células dendríticas.

Conclusión

En resumen, estos resultados sugieren que es altamente neoangiogenesis activado en los pacientes diabéticos. Parece importante que la formación de nuevos vasos sanguíneos en los pacientes está influenciada no sólo por la tradicional pro-y anti-angiogénicos genes, sino también por los genes que participan en el tráfico de leucocitos y complementar las vías de activación. Además, es probable que la estrecha asociación de los monocitos a las células endoteliales activadas iniciará rápida maduración de las células dendríticas y el inicio de la respuesta autoinmune en DM.

Conflicto de intereses

Los autores declaran que no tienen intereses en conflicto.

Contribuciones de los autores

KN, RR, MM, CF, YC realizó la investigación, KN, LGR, FW, PHP, KP, EHP, IL, siempre muestras, diseñado investigación, analizó los datos y escribió el papel. KN supervisó la investigación, diseñó y llevó a cabo experimentos, analizar los datos, y escribió el papel.

Agradecimientos

Dr Nagaraju cuenta con el apoyo de la Beca Conmemorativa Vernon Lynch en Arthritis Research, un investigador de la artritis Premio Nacional de la Arthritis Foundation, una donación del Centro de Investigación de Artritis Maryland, y NIH-AR050478. También con el apoyo de subvenciones del NIH (NHLBI Programas de Aplicaciones en Genómica [PGA] HOPGENE U01 HL66614-01, N01 y NINDS-NS-1-2339). Agradecemos sinceramente a Dr Nina Raben para ayudar en la discusión y revisión del manuscrito.