Kinetoplastid Biology and Disease, 2006; 5: 1-1 (más artículos en esta revista)

Una nueva iniciativa para el desarrollo de nuevas pruebas de diagnóstico para la tripanosomiasis africana humana

BioMed Central
Dietmar Steverding (dsteverding@hotmail.com) [1]
[1] Centro de Investigaciones Biomédicas, Facultad de Medicina, Política y Práctica de la Salud, Universidad de East Anglia, Norwich NR4 7TJ, UK

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Resumen

Tripanosomiasis africana humana es una amenaza para millones de personas que viven en países del África subsahariana y es fatal si no son tratados. En la actualidad, las pruebas serológicas y parasitológicas utilizados en el campo para el diagnóstico de la enfermedad del sueño tienen baja especificidad y sensibilidad. Es evidente que existe una necesidad urgente de las herramientas precisas para el diagnóstico y estadificación de la enfermedad. La Fundación para la Nueva Diagnóstico innovadoras y de la Organización Mundial de la Salud han anunciado que colaborarán para desarrollar y evaluar nuevas pruebas de diagnóstico para la tripanosomiasis africana humana.

El desarrollo de diagnósticos para la tripanosomiasis africana humana
Antecedentes

Tripanosomiasis humana africana (THA), también conocida como la enfermedad del sueño, causada por parásitos protozoarios del género Trypanosoma. La infección con T. Brucei gambiense resultados en la forma crónica de la enfermedad del sueño en África occidental y central, mientras que T. Brucei rhodesiense da lugar a la forma aguda de la enfermedad en África oriental y meridional. Si no se trata, la enfermedad es fatal, y, por tanto, el diagnóstico precoz es fundamental. Sin embargo, las pruebas de diagnóstico para HAT no son lo suficientemente sensibles y específicas, y son difíciles de utilizar en las zonas rurales. Por lo tanto, la Fundación para la Nueva innovadoras Diagnostics (FIND), y la Organización Mundial de la Salud (OMS) celebraron una reunión conjunta en Ginebra, Suiza, 6-7 de febrero de 2006, para lanzar una nueva iniciativa para el desarrollo de nuevas pruebas de diagnóstico para apoyar El control de la enfermedad del sueño. Esta iniciativa está financiado con una donación de 10 millones de dólares para los próximos 5 años a partir de la Fundación Bill y Melinda Gates (BMGF). Representantes de FIND, la OMS, BMGF, las empresas farmacéuticas, los programas nacionales de control y el sector académico asistieron a la reunión para discutir los problemas actuales y las mejoras necesarias en el diagnóstico de HAT.

Más del 97% de todos los casos de enfermedad del sueño en los últimos 5 años fueron T. B. Gambiense infecciones (p. Simarro, comunicación personal). La prueba común para el diagnóstico serológico de T. B. Gambiense la enfermedad del sueño es la tarjeta de Agglutination Test de la tripanosomiasis (CATT) [1]. Sin embargo, esta prueba no detecta T. B. Rhodesiense. Uno de los problemas con la CATT es su baja especificidad de 74-95%, con una sensibilidad del 87-98% [2 - 4]. Por lo tanto, la demostración del parásito en los tejidos fluidos de un paciente es estrictamente necesario antes de la iniciación de la quimioterapia, especialmente porque algunos fármacos utilizados para el tratamiento de la enfermedad del sueño tienen efectos secundarios graves [5]. Sin embargo, la detección parasitológicos de tripanosomas en muestra de sangre es a menudo difícil debido a la relativamente escasa sensibilidad de las técnicas microscópicas y de los bajos y fluctuantes parasitaemias. Otro de los problemas es el diagnóstico HAT en la puesta en escena de la enfermedad. La etapa temprana de la enfermedad del sueño se define por la restricción de los parásitos de la sangre y los sistemas linfáticos. La etapa tardía de la enfermedad se caracteriza por la presencia de tripanosomas y un aumento de glóbulos blancos (WBC) count en el líquido cefalorraquídeo (LCR). Como no hay criterios clínicos claros para principios y finales de etapa de la enfermedad [6], en escena se basa en el examen del LCR obtenido por punción lumbar, que es dolorosa, arriesgado y complicado cuando realice en las condiciones de campo. Sin embargo, el número de tripanosomas en el LCR suele ser escasa y WBC cuenta son variables. Además, en escena basada en cuenta es WBC no normalizada, la corte sugirió que fluctúan entre 5 WBC / μ l al 20 WBC / μ l [7]. Por lo tanto, hay una necesidad de nuevas herramientas de diagnóstico que son sencillas y eficaces en la detección de las dos etapas de HAT.

¿Cuáles son las opciones técnicas para el desarrollo de nuevos y mejores diagnósticos HAT?

Una de las posibilidades podría ser el desarrollo de una prueba de detección de anticuerpos que utiliza un antígeno diferente de la de la CATT (liofilizado T. b. gambiense torrente sanguíneo formas de la variable tipo de antígeno LiTat1.3). Hasta el momento, hay cerca de 20 posibles antígenos caracteriza, disponible como polipéptidos recombinantes o sintéticas, que podría ser utilizado para una prueba para serodiagnostic HAT. Además, otra prueba de formato puede ser empleado, por ejemplo, la corriente lateral o gel de aglutinación. Por último, se podrían desarrollar pruebas para la detección de ambos T. B. Gambiense y T. B. Rhodesiense. Desarrollo de un test de detección de antígeno parece ser más difícil, mientras que una prueba para la detección de antígenos circulantes en pacientes con la enfermedad del sueño se ha descrito, el Card Agglutination indirectos tripanosomiasis Test (CIATT) [8], existen algunas dudas acerca de su especificidad [ 9]. Sin embargo, otros antígenos, enzimas secretada por ejemplo, podría utilizarse en el desarrollo de un ensayo de detección de antígeno. Otra opción para el desarrollo de nuevas pruebas de diagnóstico para HAT podría ser el uso de métodos moleculares. Aunque la aplicación de métodos de PCR en el campo no es factible por el momento, una simplificación de la prueba de PCR puede ser posible para el uso en campo. El bucle mediada amplificación isotérmica (LAMP) es una simple reacción de amplificación de ácido nucleico (NAA), método que produce grandes cantidades de las metas específicas de ADN bajo condiciones isotérmicas con una simple incubadora [10]. Otra ventaja del método es que LAMP amplificación de ADN podrá controlar a simple vista sin el uso de dispositivos de detección especiales. Habida cuenta de la muy limitada infraestructura en la configuración de HAT en el que se produce sin embargo, todavía hay importantes progresos que se hagan pruebas antes de NAA puede ser aplicado ampliamente como un instrumento de diagnóstico para HAT.

El desarrollo de instrumentos para la realización de HAT es mucho más difícil. Una opción podría ser un examen simplificado MCA. Por ejemplo, se podrían diseñar pruebas que detecten marcadores de la reacción inflamatoria del cerebro (por ejemplo, neurológicas autoanticuerpos, citocinas, intratecal de IgM [11, 12]] o fragmentos de tripanosomas o de las células nerviosas en el PPC, aunque este último se produce muy tarde en la Infección. El desarrollo de un montaje de prueba que no requiere MCA muestreo es aún más difícil. Una posibilidad podría ser la detección de antígenos neurológicos en la sangre. Sin embargo, esto requiere de la investigación sobre la identificación y caracterización de dichos antígenos en el primer lugar. Otro interesante no invasiva en escena método es polisomnografía, la supervisión y el registro de datos fisiológicos durante el sueño. Se ha demostrado que la etapa tardía la enfermedad del sueño, los pacientes tienen un perturbado circadiano distribución de los episodios de sueño-vigilia, así como una estructura con alteraciones del sueño frecuente aparición dormir períodos de movimiento rápido de ojos (SOREMPs) [13]. Es importante destacar que, los primeros datos indican que SOREMPs aparecer poco después de la invasión del sistema nervioso central por tripanosomas. Sin embargo, la polisomnografía es una exigencia técnica que tiene que ser demostrado que puede ser utilizado rutinariamente en condiciones de campo.

¿Cuáles son las funciones de FIND y la OMS en el desarrollo de nuevas herramientas de diagnóstico para HAT?

CONSULTE es un estado independiente y una fundación sin fines de lucro con sede en Ginebra [14]. CONSULTE actividades de esta iniciativa se centrará en el desarrollo, la evaluación y la demostración de los nuevos diagnósticos de HAT. En primer lugar, CONSULTE trabajará en colaboración con académicos y grupos de la industria en el desarrollo de pruebas de diagnóstico aplicables a los productos. A continuación, CONSULTE establecerá un mecanismo formal para evaluar estos productos en ensayos de campo. Por último, CONSULTE colaborará con la OMS, otros organismos y los programas nacionales para demostrar el impacto que el uso de estos productos tiene sobre el control de HAT. En otras palabras, CONSULTE creará una red de socios públicos y privados para producir nuevas pruebas de diagnóstico para la HAT y para demostrar su eficacia. Para aguas arriba y aguas abajo de investigación descubrimiento ENCONTRAR actividades de aplicación se mantendrán en contacto con los asociados pertinentes.

El papel de la OMS en esta iniciativa es establecer una red de centros de diagnóstico con experiencia en África, con la capacidad de matricular 300 - 500 confirmó la enfermedad del sueño y de los pacientes por año para caracterizar muestras de hasta 1000 endémica controles. Además, la OMS velará por que la capacidad de diagnóstico se mantiene en áreas de estudio y que los programas de control nacionales HAT se integren plenamente en la evaluación de las nuevas pruebas. Además, la OMS establecerá un banco HAT mediante la recopilación de materiales de referencia bien caracterizados pacientes y controles, la asignación de un servicio profesional que se encarga de la crioconservación, y la gestión de la distribución de los ejemplares a apoyar el desarrollo y la validación de nuevas pruebas. Por último, la OMS proporcionará capacitación en la aplicación y la evaluación de los nuevos diagnósticos y dar apoyo operacional a la realización de ensayos de campo.

Conclusión

ENCONTRAR y la OMS han iniciado una colaboración para desarrollar necesitan con urgencia nuevas herramientas de diagnóstico para HAT. Las nuevas pruebas idealmente debería ser simple (fácil de ser utilizado por un mínimo de personal capacitado en el campo), rápido (que se llevarán a cabo en menos de 30 min), eficiente (mejor que el actual diagnóstico) y barato (menos de 1 USD por Persona). Es de esperar que los nuevos ensayos permitirán la detección temprana de los casos y simplificado en escena que mejoren el manejo de enfermedades y, en definitiva, apoyar la eliminación de la enfermedad del sueño como un problema de salud pública.

Conflicto de intereses

El autor declara que no tiene intereses en competencia.