Trials, 2006; 7: 14-14 (más artículos en esta revista)

Doble ciego, ensayo controlado aleatorizado, para evaluar la eficacia de un controlada la liberación de óxido nítrico parche versus meglumina antimoniate en el tratamiento de la leishmaniasis cutánea [NCT00317629]

BioMed Central
Y Sandra Silva (sandrasilvac@gmail.com) [1], Ligia C Rueda (ligiarueda62@gmail.com) [1], Marcos López (marcoslopez@mcw.edu) [2], Iván Vélez D (id_velez@yahoo.com ) [3], Christian F Rueda-Clausen (ruedaclausen@gmail.com) [1], Daniel Smith J (djs5@uakron.edu) [2], Gerardo Muñoz (germun@uis.edu.co) [4], Hernando Mosquera (hmosquera@unab.edu.co) [1], A Federico Silva (fsilva@fcv.org) [1], Adriana Buitrago (adriana.bl82 @ gmail.com) [1], Holger Díaz (diaz.holger @ gmail.com) [5], Patricio López-Jaramillo (joselopez@fcv.org) [1]
[1] VILANO Grupo. Instituto de Investigaciones, Fundación Cardiovascular de Colombia (FCV), Floridablanca, Santander, Colombia
[2] Departamento de Química, Universidad de Akron, Akron, Ohio, EE.UU.
[3] Programa para el Estudio y Control de Enfermedades Tropicales, PECET, Universidad de Antioquia, Medellín, Antioquia, Colombia
[4] Universidad Industrial de Santander, Bucaramanga, Santander, Colombia
[5] Secretaría de Salud de Santander, Colombia
[6] Facultad de Medicina, Universidad de Santander, Bucaramanga, Santander, Colombia

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Resumen
Fondo

La leishmaniasis cutánea es una enfermedad de distribución mundial, endémica en 88 países, que ha demostrado una incidencia creciente en las últimas dos décadas. Hasta la fecha, compuestos de antimonio pentavalente se han considerado el tratamiento de elección, con un porcentaje de curación de alrededor del 85%. Sin embargo, la alta eficacia de estos fármacos es contrarrestado por sus muchos inconvenientes y eventos adversos. Estudios anteriores han demostrado que el óxido nítrico ser una posible alternativa de tratamiento cuando se administra de forma tópica, sin acontecimientos adversos graves. Sin embargo, debido a la inestabilidad de la liberación de óxido nítrico, los donantes de actualidad necesarios para ser aplicado con frecuencia, con lo que la adherencia al tratamiento difícil. El electrospinning técnica ha permitido la producción de un parche transdérmico multicapa que produce un continuo y estable de liberación de óxido nítrico. El principal objetivo de este estudio es evaluar esta novela de óxido nítrico tópico de donantes para el tratamiento de la leishmaniasis cutánea.

Métodos y diseño

Un doble ciego, aleatorio, doble enmascarado, controlado con placebo y ensayos clínicos, incluidos 620 pacientes de áreas endémicas de Leishmaniasis en Colombia fue diseñado para investigar si este parche es tan efectivo como meglumina antimoniate para el tratamiento de la leishmaniasis cutánea, pero con menos adversas eventos. Los sujetos con úlceras características de la leishmaniasis cutánea se evaluó médicamente y pruebas de laboratorio y la confirmación parasitológica realizado. Después de comprobar la inclusión / exclusión criterios, los pacientes serán asignados aleatoriamente a uno de los dos grupos. Durante 20 días el grupo 1 recibirá simultáneamente meglumina antimoniate placebo y de óxido nítrico, mientras que los parches del grupo 2 recibirá placebo de meglumina antimoniate y activa el óxido nítrico parches. Durante el tratamiento visitas, la medicación se administra a diario y la presencia de eventos adversos evaluados. Durante el seguimiento, el grupo de investigación visitará los pacientes en días 21, 45, 90 y 180. El proceso de curación de la úlcera, la salud de los participantes, recidivisms y / o reinfección también será evaluado. La evolución de las úlceras se registraron fotográficamente. En caso de que la eficacia de los parches se demuestra, una nueva y segura alternativa terapéutica en uno de los más importantes problemas de salud pública en muchos países se pondrá a disposición de los pacientes.

Fondo

Leishmaniasis Cutánea (LC) es una enfermedad que es endémica en 88 países [1]. Se estima que 1,5 millones de personas sufren de CL anualmente y que más de 350 millones están en riesgo de contraer la infección [2 - 4]. En Estados Unidos, 60000 nuevos casos de CL se comunican anualmente [5], siendo endémica en 20 de sus 22 países y en 2 islas del Caribe [2]. Actualmente, CL ha afectado a más de 500 soldados del Ejército de EE.UU. que prestan servicios en Iraq [6]. En la región andina, la incidencia de leishmaniasis ha ido aumentando de manera espectacular durante las últimas dos décadas, llegando a más de 14000 casos por año a partir de 1996-98 [7]. En Colombia 6.500 se han notificado casos [8]. El aumento en los casos de CL en Colombia se ha relacionado con factores como la migración, la deforestación, la multiplicación de las plantaciones ilícitas, el conflicto político armado y los cambios de comportamiento del vector. Las principales cepas de Leishmania en Colombia son L. panamensis, L. brazilensis, L. infantum y L. guyanensis, que se distribuyen en todo el territorio nacional, principalmente en las zonas rurales [9]. CL es causada por protozoos parásitos intracelulares del género Leishmania [1] y se transmite al ser humano a través de la picadura de un pequeño porcentaje de las especies de phlebotomus y Lutzomyia sandflies clasificados hasta la fecha [9]. En el sistema digestivo de los sandflies, dimorfo este parásito presenta una forma extracelular flagelado llamado promastigote, que a partir de su liberación en el sangre de acogida, es phagocyted de los macrófagos, perdiendo sus flagelos y se convierta en un amastigote [10]. Los perros, roedores y didelphidae son los huéspedes naturales del parásito, mientras que el hombre es un huésped accidental [11]. Esta zoonosis ha sufrido un interesante fenómeno de urbanización, pasando de un eminente entidad rural que afecta principalmente a hombres de una edad activa, a una enfermedad que está afectando a todas las personas, especialmente a los niños [8, 12]. Las lesiones características de esta enfermedad son las úlceras que sanan espontáneamente en un período de tres meses a un año, dependiendo de la aislar, y que dejan un apartamento, atrófico y depigmented cicatriz [13 - 15]. La CL, especialmente el producido por L. brazilensis pueden evolucionar hacia la leishmaniasis mucocutánea (MCL), que tiene un peor pronóstico debido a la deformación de su carácter de las lesiones [16]. La curación espontánea de estas lesiones permite la adquisición de resistencia parcial a la reinfección, lo que podría explicar la mayor patogenicidad observada en los niños y los adultos jóvenes la población [12]. Estudios anteriores han demostrado una mayor incidencia de CL y una pobre respuesta al tratamiento en los niños la población [17]. El programa de vigilancia epidemiológica en Colombia exige que los casos probables de CL (identificados por la úlcera y características de la procedencia del paciente) se confirma por examen microscópico directo la secesión de una muestra obtenida de la úlcera, si estos son negativos, por medio de biopsia de la herida . Una vez confirmada, los casos deben ser notificados a la Secretaria Local de Salud utilizando clínico-epidemiológica registros. Esta institución, a cargo de la vigilancia epidemiológica, estudios de las fuentes de transmisión y distribuye los medicamentos a las personas afectadas. Actualmente, diversos aspectos se consideran al tratar a CL, entre los cuales, el riesgo de desarrollar MCL, el grado, localización, número, tamaño, evolución y persistencia de las lesiones, son los más importantes [18]. Desde hace más de 60 años, los compuestos de antimonio pentavalente: stibogluconate de sodio, (Pentostan ®, producido por Glaxo-Wellcome) y antimoniate meglumina, (Glucantime ®, producida por Sanofi-Aventis) se han considerado los tratamientos de elección para esta enfermedad [19 ]. Estudios realizados en Colombia informó de un porcentaje de curación del 85%, utilizando meglumina antimoniate [20, 21]. A pesar de la eficacia de estos fármacos es elevado, presentan muchos inconvenientes, como la administración parenteral, y, reversible efectos secundarios como náuseas, vómitos, muscular y dolor abdominal, problemas cardíacos, un aumento en la concentración de aminotransferasas hepáticas, pancreatitis y químicas [ 22, 23]. Además, la adherencia al tratamiento se ve afectada por su duración (varias semanas) y su disponibilidad por la restricción en su distribución. Alternativas terapéuticas de segunda línea se han propuesto; anfotericina B, pentamidina y se han utilizado con excelentes resultados, sin embargo, su alto costo, poca disponibilidad, la necesidad de hospitalizar a los pacientes para su administración y la gravedad de sus efectos secundarios han limitado su uso [23 , 24]. En la última década nuevos tratamientos para la CL se han desarrollado, usando agentes orales, como la mefloquina, itraconazol, miltefosine, paromomycin, ketoconazol, dapsona y alopurinol, sin embargo, no han mostrado suficientes pruebas de su eficacia [19, 21, 25, 26 ]. En un esfuerzo para desarrollar un tratamiento tópico para CL, paromomycin se ha utilizado en diferentes preparaciones. Sin embargo, las tasas de cicatrización logrado con esta medicación no han sido más altos que los tratamientos convencionales, incluso en comparación con el placebo [27, 28]. En varios estudios in vitro e in vivo, se ha demostrado que el óxido nítrico (NO) es un método eficaz para eliminar las diferentes cepas de Leishmania en su forma amastigote [29 - 35]. La producción de NO de la oxidación de L-arginina causados por la inducible óxido nítrico sintasa (iNOS) constituye uno de los más importantes mecanismos de defensa de los macrófagos [36], en la que dos oxidativo formas de defensa contra la Leishmania han sido identificados. Durante la primera fase de infección, en respuesta al proceso de fagocitosis, algunos se eliminan promastigotos debido a la liberación de los iones superóxido, un proceso que es catalizada por la NADPH oxidasa [29]. Los promastigotos que sobreviven este mecanismo de defensa convertirse en amastigotes, activando la producción de IL-12 en los macrófagos y la promoción de la presentación de los antígenos de Leishmania [29] para el 1 T ayudantes que los linfocitos citotóxicos mejorar las actividades de los macrófagos hacia el intracelular parásitos a través del interferón gamma (INF γ) y el factor de necrosis tumoral alfa (TNF α) de promover la producción de NO catalizada por iNOS [31 - 33]. Un reciente estudio muestra una mayor actividad de iNOS en los macrófagos de sujetos infectados con el CL, lo que sugiere un papel vital de NO en la actividad inmunológica contra Leishmania [34]. En los estudios con roedores resistentes a la infección por Leishmania (C57BL / 6), donde L. principales, L. chagasi o L. donovani se inocularon, la aplicación de inhibidores de iNOS como N G-monometil-L-arginina (L-NMMA) causó una mayor tasa de supervivencia y la virulencia de los parásitos en macrófagos [33, 35, 37, 38]. Después de inocular L. importantes en ratones con la susceptibilidad genética a desarrollar infecciones con Leishmania (BALB / C), ninguna actividad de iNOS se observó. Sin embargo, la aplicación de IL-12, fue capaz de controlar la infección mediante la activación de iNOS [31]. En los seres humanos, varios estudios clínicos se han realizado con tratamientos tópicos que contienen NO donantes [39, 40]. En Ecuador, nuestro grupo desarrolló y probó un NO la generación de crema tópica con S-nitroso-N-acetylpenicillamine (SNAP), evidenciando un efecto beneficioso en el tratamiento de este tipo de úlceras no con informes de ningún efecto adverso grave.

No obstante, debido a la inestabilidad de la liberación de óxido nítrico, la crema tiene que ser aplicado con frecuencia (4 veces al día) que realiza la adherencia al tratamiento difícil [39]. En Siria, otro grupo utilizó nitrato potásico acidificado con ácido salicílico y el ácido ascórbico para el tratamiento tópico de L. Tropica [40]. In vitro, esta mezcla de generación NO destruyó la amastigotes y promastigotes de Leishmania, sin embargo, in vivo, el estudio de 40 pacientes presentaron resultados inconsistentes, lo que reduce el tamaño de la úlcera en 28% de los sujetos y la curación sólo 12 %. La discrepancia en estos resultados se cree que es debido a la técnica utilizada para obtener el NO. La acidificación del nitrito produce una explosión instantánea de NO, pero su puesta en libertad no se mantiene durante un largo período de tiempo [40]. La dificultad de controlar la liberación de NO se ha creado la necesidad de buscar nuevas técnicas para regular su puesta en libertad. Las nanofibras polímeros producidos por la electrospinning técnica han sido estudiados con el fin de garantizar la constante liberación de los productos farmacéuticos en la lesión. En el proceso de electrospinning, un alto voltaje se utiliza para crear una carga eléctrica chorro de solución de polímeros, que se seca y se solidifica a salir detrás de un polímero seco de fibra [41]. Dado que este jet viaja a través del aire, el solvente se evapora dejando tras de sí un acusado de fibra que pueden ser desviadas eléctricamente y recogidos en una pantalla de metal [42, 43]. Fibras con una variedad de la sección transversal de formas y tamaños se producen a partir de diferentes polímeros. Con esta técnica, la encapsulación o atrapamiento de varios productos farmacéuticos, enzimas y proteínas ha sido un éxito. En un estudio anterior, nanofibras parches se utiliza con éxito como la liberación de los vehículos de clorhidrato de tetraciclina. La liberación de tetraciclina fue constante durante un período de 5 días [41, 43]. Utilizando el mismo modelo, un multicapa parche transdérmico se ha producido, en la que el nitrito se ve obligada a una resina de intercambio iónico (Dowex) y electrospun en una capa de poliuretano Nanofibras. Una solución que contenga Waterlock ® superabsorbent y poliuretano es electrospun en la parte superior de la nitrito-Dowex capa. El ácido ascórbico atrapado en la solución de poliuretano es electrospun en una tercera capa, con otra capa de Waterlock ® superabsorbent y poliuretano como el cuarto y definitivo. Tras la hidratación, esta liberación de óxido nítrico Patch (NOP) produce una versión estable de 3,5 μ mol de NO durante 12 horas [41, 44, 45]. En un estudio piloto, elaborado en Landazuri, Santander, Colombia, controlados con placebo en ensayos clínicos se realizó con 35 pacientes que presentaron 68 úlceras producidas por L. panamensis. El uso de la NOP, un 65% se observó mejoría en el tratamiento de úlceras, con sólo un 25% de mejoría en el grupo placebo (p = 0,001). En este estudio piloto el único acontecimiento adverso fue descrito prurito en la zona en la que el parche se aplicó (datos no publicados). Teniendo en cuenta la amplia distribución de CL, los cambios en su forma de transmisión y las dificultades relacionadas con la disponibilidad de medicamentos, este estudio propone que se investigue si los donantes NO parche transdérmico, producido por electrospinning es, como mínimo, tan eficaz como la meglumina antimoniate para el tratamiento de CL, con menos eventos adversos y un coste menor, lo que constituye, por tanto, una eficaz alternativa terapéutica. En caso de que la eficacia de la NOP se demuestra en este estudio, una novela y segura alternativa terapéutica de fácil acceso y una mayor adhesión de uno de los más importantes problemas de salud pública en nuestro país se pondrá a disposición.

Objetivos
Diseñar

Doble ciego, aleatorio, doble enmascarado, controlado con placebo y ensayos clínicos, comparando la liberación de óxido nítrico con parches de meglumina antimoniate.

Tamaño de la muestra

La muestra se calculará de acuerdo con la fórmula arccosine utilizando un poder de 80% y un error de tipo 1 de 0,05%. Asignación de un éxito del 85% de meglumina antimoniate y el 75% de NOP, 558 pacientes serán necesarios. Tras ajustar por una pérdida del 5%, el total de pacientes que deben ser contratados es 620 (310 pacientes por grupo de tratamiento).

Población

La población se compone de dos regiones de Colombia. La primera es una zona endémica en Santander, Colombia, situada entre el Valle de Magdalena y la Cordillera Oriental, que incluye los municipios de Landazuri, El Carmen, San Vicente, El Playon y Rionegro. La segunda región es una zona endémica en el norte de Tolima, que incluye los municipios de Chaparral, San Antonio, Libano, Falan, Palocabildo y Mariquita.

La selección de los pacientes
El desarrollo de estudios
Visita exploratoria

Durante esta visita una historia clínica completa será elaborado y datos sobre los antecedentes obtenidos de la leishmaniasis (administrado el tratamiento, la localización, número de lesiones, etc.) Una completa evaluación médica se realizará sobre la base de técnicas universalmente aceptadas. La inclusión / exclusión se aplicarán criterios y los candidatos seleccionados informó sobre el estudio después de lo cual van a firmar un consentimiento informado. Para los pacientes con úlceras de más de dos semanas de evolución sin diagnóstico parasitológico directo prueba será llevada a cabo por la parasitologist. Si el primer examen directo es negativo, se repetirá hasta tres veces, tras lo cual, en caso de resultados negativos, una biopsia se llevarán a cabo. En caso de leishmaniasis no se confirma el paciente será remitido a la original centro de salud.

Visita inicial

El incluyeron los pacientes serán asignados aleatoriamente a uno de los dos grupos. Una cultura en Novy-McNeal-Nicolle (NNN) medio se tomarán para identificar la cepa y una muestra de sangre retirado de la vena antecubital de las enzimas hepáticas, creatinina, amilasa pancreática y determinación. Durante esta visita, una completa evaluación médica se llevará a cabo, la úlcera se medirá en una foto y se tomarán medidas. Antes de tomar la foto, una regla graduada se coloca al lado de la úlcera junto con un adhesivo marcado con el código de identificación del participante, y la fecha de la visita. El primer NOP (activo o placebo) se aplicará cubra la lesión y el primer disparo de meglumina antimoniate (activo o placebo) administrados. Los pacientes recibirán información sobre la forma de no dañar los parches y la forma de identificar y notificar los eventos adversos. Para ayudar a los pacientes a que lo hagan, recibirán un diario para registrar. Los dos grupos al azar compuesto se dividirá de la siguiente manera:

Grupo 1: Durante 20 días este grupo se recibirán, simultáneamente, intramuscular (IM) meglumina antimoniate (Glucantime ® 20 mg / kg / día con una dosis máxima de 3 ampollas por día) y una NOP placebo.

Grupo 2: Durante 20 días este grupo va a recibir placebo simultáneamente de mensajes instantáneos meglumina antimoniate (5-15 cc / día) y un activo NOP.

Tratamiento visitas

Los pacientes se visita el centro de salud al día durante 20 días para recibir el NOP (placebo o activo) y meglumina antimoniate (activo o placebo). Diariamente, los temas y su adherencia al tratamiento se evaluará y los datos recogidos. Si cualquier acontecimiento adverso que se detecte, el paciente será remitida inmediatamente al personal médico que va a hacer una evaluación e informe a la comisión de eventos adversos que tendrá la decisión final en cada caso.

Las visitas de seguimiento

Esta fase tendrá una duración de 10 meses. Durante el seguimiento, los pacientes serán vistos por el grupo de investigación en 4 oportunidades. La primera visita tendrá lugar el día después del final del tratamiento (día 21) en que las nuevas muestras de sangre se tomarán para determinaciones bioquímicas. La segunda, tercera y cuarta visita se realizará el día 45, 90 y 180, respectivamente. Durante estas visitas el proceso de curación de la úlcera, la presencia de recidivisms y / o reinfección y la salud de los participantes serán evaluados. La evolución de las úlceras se registraron fotográficamente.

El máximo y mínimo diámetro de la úlcera se medirá utilizando una regla graduada, y la induración utilizando el bolígrafo técnica. La úlcera y la induración zonas se calculará por separado y, a continuación, registrada en el FCI. La evaluación de la respuesta clínica se basará en la úlcera que muestra la menor mejoría.

1. Completar la respuesta clínica: Complete reepithelization de la úlcera y la desaparición de la induración.

2. La mejoría clínica: Reducción de más del 50% de la úlcera y la induración zonas en relación con la última evaluación clínica.

3. La ausencia de respuesta clínica: Aumento o disminución de menos del 50% de la úlcera y la induración zonas en relación con la última evaluación clínica.

4. Fracaso terapéutico:

A. Aumento en el tamaño de la úlcera en más de un 50% en relación a la última evaluación clínica

B. Presencia de la úlcera tres meses después del inicio del tratamiento.

C. Reactivación: La aparición de una lesión en el borde o en el centro de la cicatriz, con diagnóstico parasitológico positivo, después de un período completo de reepithelization.

D. Afección de las membranas mucosas: Presencia de afecciones de las mucosas durante el tratamiento, al final de ésta o en las visitas de seguimiento.

5. Reinfección: La activación de una úlcera en una zona diferente de la lesión original.

Por temas cuyo tratamiento se han considerado un fracaso el código será roto y serán remitidos a sus lugares de origen centro de salud a buscar otras enfoque terapéutico.

Procedimientos
Las muestras de sangre retirado

Las muestras de sangre se retirará de la vena antecubital para llevar a cabo los siguientes análisis bioquímicos:

1. Creatinina por espectrofotometría

2. Alanina transaminasa (ALT) por espectrofotometría

3. Aspartato aminotransferasa (AST) por espectrofotometría

4. Amilasa pancreática por espectrofotometría

Técnica de muestreo para el examen directo de CL

Un examen directo se realiza para confirmar la presencia de células con amastigotes en una dermis raspar [46, 47], la muestra debe ser, en la medida de lo posible, libre de la sangre, detritus celulares o pus. Si los pacientes presentan varias lesiones, la muestra debe tomarse a partir de la una con el menor tiempo de evolución, la más grande zona de induración y / o menos la descarga purulenta. Si la lesión tiene una costra que deben ser removidos para mejorar la calidad de la muestra. La muestra puede tomarse de los activos o el borde de la parte inferior de la úlcera. Cuando la muestra se toma del borde activo asepsia debe realizarse con alcohol de 70% y la hemostasia luego realizó a través de primero y segundo dedos para asegurarse de que no hay sangre en la muestra. Una pequeña incisión de aproximadamente 3 mm de longitud y profundidad se realiza con un bisturí en el borde activo paralelo al borde de la úlcera. Con la brusca lado del bisturí, un raspe se hace en la pared dermic de la incisión para la obtención de tejidos. El material extraído se amplía en dos portaobjetos de microscopio. La muestra se seca a temperatura ambiente y, a continuación, fija con metanol y teñidas con Giemsa, Wright o sobre el terreno. El uso de aceite de inmersión en la muestra se observa bajo un microscopio con un lente de 100 ×, la presencia de amastigotes de Leishmania evaluado y verificado su estructura (núcleo, kinetoplast y membrana celular). Si la muestra se toma del centro de la lesión, la misma técnica hemostática se debe utilizar, la roña eliminado, y la parte inferior de la úlcera así limpiarse utilizando el lado fuerte del bisturí para evitar la presencia de detritus celulares y / o material purulento . Este procedimiento debe continuar hasta que los granulomas son vistos en la parte inferior. Con la misma técnica utilizada para procesar las muestras de los activos borde la presencia de amastigotes de Leishmania se ha verificado.

Técnica para la toma de muestras de las culturas

La muestra de la cultura puede ser obtenida por la aspiración de la úlcera activa o borde de la extracción de un fragmento de tejido que luego se maceran en un buffer fosfato de solución salina (PBS) con antibióticos (1000 UI de penicilina cristalina por cc), antes de que sea poner en el medio de cultivo. A la tuberculina jeringa con una aguja fina (26G), que contiene 0,3 cc de solución de PBS con antibióticos se utiliza en la técnica de aspiración. Anterior asepsia de la úlcera con el alcohol en un 70%, una aguja se introduce en la dermis y la rotación de movimientos a través de una pequeña cantidad de tejido macerado de bisel la aguja durante un minuto aproximadamente, después de lo cual es suctioned en la jeringa. La muestra se deposita en condiciones asépticas en un medio de cultivo NNN e incubadas a 26 ° C durante 4 semanas [48, 49]. Cada semana una caída se extrae del medio de cultivo y se coloca entre dos portaobjetos para ser observados bajo el microscopio. En caso de que promastigotos no se encuentran, las culturas son rechazados como negativos [46]. Las cepas se identificaron las especies por el uso de anticuerpos monoclonales desarrollados por el doctor Mc Mahon Diane Pratt [50, 51]

Evaluación y gestión de eventos adversos

Durante el tratamiento y las visitas de seguimiento, la paciente se le preguntó acerca de los eventos adversos. Cada acontecimiento adverso se clasificarán por el médico como graves o no graves (Cuadro 2 y Cuadro 3]. Un efecto adverso grave debe cumplir uno o varios de los siguientes criterios:

1. Muerte

2. Ponen en peligro la vida (es decir, el riesgo inmediato de muerte)

3. - En la hospitalización del paciente o la prolongación de la hospitalización

4. La persistencia de importantes o discapacidad / incapacidad

La presencia de un efecto adverso grave que pone la vida del paciente en situación de riesgo y / o requiere una inmediata médica o quirúrgica se llamamiento en favor de la suspensión del tratamiento y el inicio de la pertinente gestión médica de los pacientes. El investigador se notificarán a la Comisión de Eventos Adversos (CEA) de la FCV de cualquier efecto adverso grave dentro de las 24 horas de aprendizaje sobre el mismo.

Un no-efecto adverso grave se clasifican de la siguiente manera:

1. Leve: Los pacientes son conscientes de sus síntomas y / o signos, pero esas son tolerables. Ellos no requieren intervención médica o un tratamiento específico.

2. Moderado: Los pacientes presentan problemas que interfieren con sus actividades diarias. Ellos requieren intervención médica o un tratamiento específico.

3. Severa: Los pacientes están incapacitados para trabajar o asistir a sus actividades diarias. Ellos requieren intervención médica o un tratamiento específico.

La posible relación entre los eventos adversos y la prueba de medicamentos se clasifican por el investigador sobre la base de su juicio clínico y las siguientes definiciones:

1. Definitivamente relacionados: El evento puede ser completamente explicado por la administración de los medicamentos probados.

2. Probablemente relacionados: El evento es más probable que se explica por la administración de la medicación a prueba en lugar de otros medicamentos o por el paciente del estado clínico.

3. Posiblemente relacionadas: El evento puede explicarse por la administración del medicamento a prueba o de otros medicamentos o por el paciente del estado clínico.

4. No relacionados con: El evento es más probable que se explica por el paciente del estado clínico u otros medicamentos, en lugar de la prueba.

Todos los eventos se comunicarán a la CEA que, en función de sus criterios, para decidir la continuidad o el retiro del paciente del estudio y, por consiguiente, la ruptura del código.

Aunque el proyecto ha sido diseñado para minimizar los riesgos inherentes, cualquier acontecimiento adverso relacionado con el estudio de medicamentos serán cuidadosamente evaluados por la CEA y los costos generados por el tratamiento necesario será cubierta por el estudio.

Fase de análisis de datos

Esta fase tendrá una duración de 6 meses. Después de completar todos los datos de entrada para el CFR, los resultados serán auditados y los errores detectados evaluada y corregida por la persona a cargo. La información se asentará en dos diferentes bases de datos de dos personas diferentes y los registros serán comparados para detectar cualquier discrepancia. La tasa de letalidad del original se utilizará para corregir cualquier error en la base de datos.

Para el análisis estadístico, Stata 8,0 se utilizará. El análisis descriptivo se compone de medianas proporciones y de acuerdo a la naturaleza de las variables, con sus respectivas del 95% intervalos de confianza. Como medida de dispersión la desviación estándar se calculará. La distribución de las variables serán estudiadas a través del Shapiro-Wilk test. Para detectar alguna diferencia entre los grupos, un T-test o un test de Wilcoxon se llevará a cabo de acuerdo a su distribución. Las variables categóricas se compararon mediante la prueba de Chi2 o la exacta de Fisher prueba. Si es necesario, un modelo de regresión logística múltiple o un análisis de covarianza se llevará a cabo.

Dos análisis provisional se llevará a cabo cuando el 35% y el 70% de la muestra se calculó recogidos, con el objetivo de determinar las diferencias en la eficacia y la seguridad entre los tratamientos.

Criterios de valoración

Al final del estudio dos puntos finales serán evaluados:

1. El éxito de Tratamiento:

A. Complete reepithelization tres meses después del inicio del tratamiento.

B. La ausencia de reactivación y afecciones de las mucosas durante los 6 meses de estudio.

2. El fracaso del tratamiento:

A. Reepithelization incompleto tres meses después del inicio del tratamiento.

B. Aumento en el tamaño de la úlcera en más de un 50% en relación a la última evaluación clínica

C. Reactivación y / o afecciones de las mucosas durante los 6 meses de estudio.

Informe final

Al final del estudio los resultados serán evaluados y discutidos y un informe final presentado a COLCIENCIAS, entidad que patrocina el proyecto. Los resultados relevantes se publicarán en tanto, revistas nacionales e internacionales, y presentado en congresos y reuniones científicas.

Aspectos éticos

Este estudio se llevará a cabo de conformidad con la Declaración de Helsinki y con la legislación colombiana como por la Resolución 8430/93 del Ministerio de Salud. Antes de la admisión de los pacientes en el estudio, los objetivos y la metodología se explicará y el consentimiento informado obtenido. El estudio fue aprobado por el Comité de Ética de Investigación de la Fundación Cardiovascular de Colombia (# 105/January Ley 28/2005). El derecho a la confidencialidad de los pacientes se mantendrá en todas las fases del estudio.

Conflicto de intereses

Los autores declaran que no tienen intereses en conflicto.

Autores de las contribuciones

PLJ ha hecho contribuciones sustanciales a la concepción y el diseño del estudio, se encargará de la administración general y la dirección del proyecto, el análisis y la interpretación de los datos y dar la aprobación final de la versión para ser publicada. DS, que participaron en el diseño del proyecto, será responsable de la administración general y la dirección del estudio, y la producción y el análisis de la liberación de NO electrospun nanofibras parches. IDV ha hecho contribuciones sustanciales a la concepción y el diseño del estudio y la redacción del manuscrito. Él también se encargará de analizar e interpretar los datos finales.

ML estuvo a cargo del desarrollo de los PON para determinar su dosis óptima. Él también participó en la elaboración del manuscrito y participará en el análisis e interpretación de datos. HM y HD participaron en la redacción del manuscrito y la planificación del ensayo clínico. Él también se encargará de la supervisión de su logística y se interpretan los datos finales. GM se encargará de los análisis parasitológicos, biopsias, así como el tratamiento de los pacientes muestras. Él también participará en la adquisición, análisis e interpretación de datos. FS-S, contribuyó a la concepción y el diseño del estudio, realizado el cálculo el tamaño de la muestra y la asignación al azar y se analizarán los datos obtenidos de los ensayos clínicos. SYS hecho contribuciones sustanciales a la concepción y el diseño del estudio y participó en la redacción del manuscrito. LCR contribuido al diseño del estudio, participó en la redacción del manuscrito, se encargará de la contratación y el seguimiento de los pacientes, y también participará en el análisis e interpretación de datos. CFR-C contribuido al diseño del estudio, participó en la redacción del manuscrito, se encargará de la contratación y el seguimiento de los pacientes, y también participará en el análisis e interpretación de datos. AB participated in the design of the study, will contribute to the acquisition of data, and will be responsible for overseeing the application of the protocol by monitoring the clinical trial to ensure compliance with the cGCP (current Good Clinical Practices). Todos los autores leído y aprobado el manuscrito final.

Agradecimientos

This study is supported by grants from the Colombian Institute for the development of science and technology "Francisco Jose Caldas" (COLCIENCIAS), Grant No. 6566-04-18090 and funds from the Research Institute from the Cardiovascular Foundation of Colombia (FCV) .

We would like to express our gratitude to Jean Noel Guillemot for reviewing the English style.