Journal of Immune Based Therapies and Vaccines, 2006; 4: 7-7 (más artículos en esta revista)

Longitudinal cambios en el VIH-específica IFN-γ en la secreción de temas que Remune ™ recibido la vacunación antes de la interrupción de tratamiento

BioMed Central
Kenneth H Huang (kenneth.huang @ mail.mcgill.ca) [1], Pierre-Marie Boisvert (m_pierre_boisvert@hotmail.com) [1], Famane Chung (famane@hotmail.com) [1], Maude Loignon (Emil . maude@sympatico.ca) [2], Don Zarowny (donzar@sm.hivnet.ubc.ca) [3], Lise Cyr (lise.cyr.chum @ ssss.gouv.qc.ca) [2], Emil Toma (emil.toma @ umontreal.ca) [2], Nicole F Bernard (nicole.bernard @ mcgill.ca) [1]
[1] McGill University Health Centre, Montreal, Quebec, Canadá
[2] Centro Hospitalario de l'Université de Montreal, Montreal, Quebec, Canadá
[3] Canadian HIV Trials Network, Vancouver, British Columbia, Canadá

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Resumen
Fondo

A pesar de los beneficios de antitretroviral altamente activa (TARGA) para la supresión de la replicación viral en la infección por el VIH, el virus persiste y los rebotes durante el tratamiento de interrupción (TI). Este estudio exploró si la intensificación TARGA con Remune ™ vacunación antes de TI pueden impulsar el VIH-1-inmunidad específica, que permitirá mejorar el control de la viremia off HAART.

Métodos

Diez crónicamente infectadas por el VIH que los adultos se matricularon en esta prueba de concepto de estudio. Tras 6 meses de TARGA fase de intensificación con didanosina, hidroxiurea, granulocito-macrófago colonia de factor estimulante, (GM-CSF), y una primera dosis de Remune ™ (VIH-1 inmunógeno), HAART se suspendió. Los pacientes continuaron recibiendo Remune ™ cada 3 meses hasta el final del estudio. HAART fue reiniciado si la carga viral no caer por debajo de 50000 copias / ml de plasma dentro de 3 meses o si cuenta con CD4 + disminuye a <200 células / mm 3. VIH-inmunidad específica se vigila con el interferón-γ (IFN-γ) ELISPOT ensayo.

Resultados

Todos los sujetos experimentó rebote viral durante TIS. A pesar de la magnitud y amplitud del VIH-respuestas concretas a HLA-péptido óptimo restringido paneles y Gag piscinas péptido p55 y el aumento de la carga viral disminuyó de 0,44 log 10 unidades de TI # 1 a # 2 TI, no correlaciones significativas entre estos parámetros se observaron. Los pacientes pasó del 50,4% de sus 36 meses de seguimiento fuera de la TARGA.

Conclusión

Dejar de TARGA en esta población vacunada la respuesta inmune inducida por que persisten después de terapia se reinicie el equipo. Inducción del VIH-inmunidad específica más allá de IFN-γ la secreción puede estar contribuyendo a un mejor control de la viremia durante los tis que permite largos períodos fuera de la TARGA.

Fondo

La introducción de la terapia antirretroviral de gran actividad (TARGA) para el manejo de pacientes infectados con el VIH ha disminuido significativamente la mortalidad y la morbilidad [1]. Aunque HAART suprime la replicación del VIH en una proporción significativa de individuos infectados por el VIH, no es capaz de erradicar la infección viral [2, 3]. Los efectos secundarios graves y la aparición de virus resistentes a drogas proporcionar el impulso para explorar alternativas a la continua TARGA [4, 5].

Específicamente el VIH linfocitos T CD8 + que contribuyan al control de la replicación del VIH. La prueba más firme apoyo a esta proviene de un modelo animal de infección por el VIH, macacos infectados con el virus de inmunodeficiencia símico (SIV). SIV en macacos infectados CD8 + T cell agotamiento resultados en el aumento de la carga viral, que vuelve a los valores previos al tratamiento cuando linfocitos T CD8 + reemerge [6]. Varias otras observaciones confirman el papel de linfocitos T CD8 + en el control del VIH. Estos incluyen viral escapar de las respuestas CTL [7 - 10], la asociación temporal entre la disminución de la carga viral y la aparición de respuestas de CTL en la infección primaria del VIH (IP) [11, 12], la asociación de ciertos complejo mayor de histocompatibilidad (MHC ) Alelos de clase I y heterozigosidad en loci de codificación de estos alelos con tasa de progresión de la enfermedad por el VIH [13, 14] y la asociación entre el VIH-CD8 + específicas de proliferación y las respuestas a largo plazo no progressor estado [15]. La iniciación de TARGA en la fase crónica de la infección generalmente se traduce en una disminución de la amplitud y magnitud de la pandemia del VIH-respuestas concretas en asociación con la carga viral de control [16, 17].

Con el fin de impulsar el VIH-inmunidad específica y limitar la exposición a los medicamentos antirretrovirales, el tratamiento interrupciones (TI) están siendo investigados. La razón detrás de TI en la infección por el VIH es que permite interrumpir el tratamiento resurgimiento del virus de la autotransfusión, que impulsará el virus de inmunidad específica que puede contribuir a la posterior control de carga viral. En sujetos que empezar TARGA en infección aguda por el VIH, la amplitud y magnitud del VIH-una respuesta inmunitaria específica se ve comprometida en comparación con lo visto más tarde en la infección [18 - 20]. En estas personas, las TIS se han utilizado después de un período en HAART para ampliar el VIH específicos de la inmunidad [21]. Esta estrategia de iniciación temprana de la TARGA seguido de un aumento de TI controlado el VIH-inmunidad específica y transitoria suprimida la replicación viral.

TI realiza en el establecimiento de una infección crónica ha sido en gran medida infructuosas para estimular la inmunidad que controla la viremia [22 - 24]. Por esta razón, la vacunación terapéutica y las terapias inmunomoduladoras, que impulsar el VIH específicos de la inmunidad se encuentran actualmente siendo investigados por la TARGA tratados crónicamente infectados por el VIH los pacientes antes de TI para determinar si el VIH-inducir inmunidad específica que mejora el control de la carga viral fuera de la terapia. El uso de la vacunación terapéutica del VIH (Remune ™ - VIH-1 inmunógeno) en crónica la infección por el VIH para inducir el VIH específicos de las respuestas linfoproliferativas (LPR) está bien documentada. [25 - 28].

Se presentan los resultados en materia de cambios en el VIH-inmunidad inducida en pacientes infectados por el VIH (n = 10) en la fase crónica de la infección que sufrió la terapia y la intensificación de vacunación con Remune ™ antes de múltiples rondas de TI. Se observó que la magnitud y amplitud del VIH-respuestas concretas detectadas en IFN-γ ELISPOT intracelular y la secreción de citocinas de los ensayos de una mayor tiempo de tratamiento en los puntos pre-TI # 1 para pre-TI # 2. Sin embargo, este aumento de VIH-respuesta inmune específica no se correlacionó con la disminución de la carga viral meseta visto durante TI # 1 a la observada durante TI # 2. Aunque nuestros resultados muestran que la TARGA y la intensificación de vacunación ™ Remune fueron capaces de reducir y mantener bajos VL meseta durante ciclos consecutivos de TI, esta reducción no se correlacionó con un aumento en el VIH-respuestas concretas medido.

Métodos
Población de pacientes y el diseño del estudio

Diez sanos adultos infectados con VIH en la fase crónica de la infección se matricularon en marzo de 2000 en esta prueba de concepto de juicio. La investigación conformado con todas las normas éticas de los autores y las instituciones de la experimentación con humanos directrices de los EE.UU. Departamento de Salud y Servicios Humanos. Todos los participantes firmaron un consentimiento informado. En el momento de la inscripción, los 10 pacientes tenían una edad mediana de 41 (rango 36 a 51) años, ha estado en terapia antirretroviral durante una mediana de 4,6 (rango 1,4 a 11) años y había estado en TARGA durante una mediana de 2,7 ( rango 1,4 a 3,8) años, tuvo una carga viral de VIH (VL) <50 copias / ml durante una mediana de 2 (rango de 0,5 a 2,1) años, y la mediana de CD4 + T-células de 385 (rango de 230 a 990) células / mm 3 (Cuadro 1].

El tratamiento incluyó un calendario de 6 meses TARGA fase de intensificación, durante el cual didanosina (ddI) y la hidroxiurea (HU) se han añadido a la actual régimen para los primeros 5 meses y los granulocitos y macrófagos estimulantes de las colonias factor (GM-CSF) para el primer 3 meses. Remune ™ (10 unidades de antígeno p24 - 100 μ g de proteína total, incompleta en Adyuvante de Freund) se dio en el mes 5 de la fase de tratamiento intensificación HU cuando fue detenido. Todos los 10 pacientes completaron un mes más la intensificación de la terapia con ddI y fueron vacunados con Remune ™ a tres meses hasta el final del estudio. Los pacientes fueron controlados durante 36 meses después de la primera TI. Se obtuvieron muestras de sangre al inicio del estudio, mes 3, 6, de la fase de intensificación HAART, y cada 3 meses durante 36 meses para los virológica e inmunológica cuotas. TARGA y se reanudaron HU VL si no se redujo a <50 000 copias dentro de 3 meses o si la cuenta de CD4 + disminuye a <200 células / mm 3. HAART fue de nuevo interrumpido cuando la carga viral fue <50 HIV-1 RNA copias / ml y CD4 + se cuenta con> 200 células / mm 3 medido en dos ocasiones un mes de separación.

VIH cuantificación

Plasma viremia se determinó utilizando el ensayo Amplicor Roche (Roche Diagnostics, Mississauga, Ontario, Canadá), con un límite de detección de 500 HIV-1 RNA copias / ml de plasma. Las muestras que estén por debajo del límite de detección se reanalizada con el método ultrasensible (Ultradirect; Roche Diagnostics), con un límite de detección de 50 HIV-1 RNA copias / ml.

Tipificación HLA

ADN genómico para HLA tipificación molecular ha sido preparado de virus de Epstein-Barr (EBV)-B transforma las líneas celulares usando el QIAamp DNA sangre kit (Qiagen, Mississauga, Ontario, Canadá). Cada paciente fue escrito para HLA clase I alelos usando primers 95 establece amplificar definido MHC de clase I alelos (ABC SSP Unitray; PelFreez Clínica Systems, Brown Deer, Wisconsin, EE.UU.) [29]

Células y péptido selección

De sangre periférica de células mononucleares (PBMC) se aislaron de sangre recogidas en ácido citrato de dextrosa anticoagulante en cada visita de estudio de densidad gradiente de centrifugación (Ficoll-Paque, Pharmacia, Upsala, Suecia) y congelado en el 90% de suero de ternera fetal (Gibco BRL Life Technologies, Burlington, Ontario, Canadá), 10% de dimetil sulfóxido (DMSO, Sigma, St Louis MO). El VIH epítopos PBMC utilizados para la estimulación fueron escogidos de Los Alamos el VIH Inmunología Molecular base de datos [30]. Optimal péptidos de 8 a 10 aa de longitud limitada a los MHC de clase I alelos expresadas por las personas que están probando se sintetizan a más de 85% de pureza de la síntesis en fase sólida usando F-MOC química (Sheldon Centro de Biotecnología, Montreal, Quebec, Canadá) . Veinte-mer péptidos correspondientes al VIH Gag p55 se obtuvieron del Instituto Nacional de Estándares Biológicos y Control (Potters Bar Hertz, Reino Unido). Estos se organizaron en piscinas que contienen péptidos correspondientes al VIH Gag p17, p24 y p15. Cada péptido en estas piscinas se presente en una concentración final de 2,0 μ g / ml. Además, MHC-VEB restringido o citomegalovirus (CMV) derivado del 8 - a 10-mer óptimo péptidos también fueron sintetizados como se ha descrito anteriormente y utilizado como control positivo péptido estímulos.

IFN-γ-Enzyme Linked Immunospot (ELISPOT) de ensayo

IFN-γ secreción por el VIH-células específicas se cuantificó por ELISPOT ensayo tal y como se describe [20]. Grupos de MHC restringida estimular péptidos fueron diseñados para cada objeto de estudio y se utiliza para la inspección respuestas en cada momento la prueba (Cuadro 2]. Los paneles estaban compuestos de una mediana de 9 (rango de 6 a 11 péptidos) restringido a una mediana de 2,5 (rango de 2 a 5) MHC de clase I alelos. Además Gag p17, p24, p15 y péptido piscinas también se utilizaron como estímulos. Las células fueron chapados a ambos 2 × 10 5 células / pocillo y 5 × 10 4 células / así para cada péptido condición. Anti-CD3 anticuerpo monoclonal (AcM) (Investigación Diagnóstico, Flandes, NJ) y immunodominant CMV y VEB péptidos derivados se utilizaron como control positivo estímulos que se utilizó como control negativo. La frecuencia de reactividad de anti-CD3 y VEB / CMV péptidos estímulos que ocurren en las muestras recogidas longitudinalmente se utilizó para el control de tiempo-entre el punto variabilidad en la respuesta celular. Los resultados se expresan como terreno de formación de las células (SFCs) / 10 6 PBMC después de restar de controles negativos. Una respuesta positiva se reunió los criterios de contar con al menos 5 puntos por bien y por lo menos 2 veces más puntos que los pozos de control negativo.

Los análisis estadísticos

Los datos fueron analizados utilizando GraphPad INSTAT software estadístico, versión 3,06 [(2003) GraphPad Software, San Diego, California, EE.UU.]. Dos de cola no paramétrico de Wilcoxon acompañado firmado pares de filas-las pruebas se utilizaron para evaluar las diferencias en cuanto VL, la magnitud y amplitud del VIH-respuestas concretas, y el porcentaje de Gag p55 específicos CD4 + y CD8 + T-células entre cada TI. No paramétrico de Spearman correlaciones de rangos se utilizan para correlacionar las mejoras VL con aumentos tanto en la magnitud del VIH-respuestas concretas y cambios en la amplitud de estas respuestas entre el 1 º y 2 º TI. El total de la respuesta inmune generada se expresaron como el área bajo la curva (AUC) calculada a partir de VIH-total respuestas específicas a través del tiempo para cada paciente. No paramétrico de Spearman Rango de correlaciones se utilizaron para evaluar la correlación entre el total de VIH-una respuesta inmunitaria específica y el número de días que los pacientes fueron capaces de permanecer fuera de la TARGA. Todas las pruebas de significación estadística fueron dos colas y valores de p <0,05 se consideró significativo.

Resultados
Los cambios en el VIH-una respuesta inmunitaria específica

PBMC muestras de todos los puntos temporales se examinaban para ver si el VIH específicos de IFN-γ secreción utilizando paneles de óptima epítopos restringidos a las MHC de clase I alelos de los individuos objeto de la prueba. Estas muestras fueron también examinadas por el IFN-γ ELISPOT ensayo con Gag péptidos piscinas correspondiente al VIH Gag p55. Figura 1 y 2 se muestra la amplitud y magnitud de la respuesta óptima a la péptido paneles utiliza para la inspección de cada individuo. La magnitud de las respuestas a la pandemia del VIH péptido grupos se compararon antes del 1, 2 y 3 TIS en el momento puntos en los que los sujetos fueron a la TARGA con el fin de evaluar si los cambios en el VIH-respuestas concretas se produjo con un número cada vez mayor de TI (Figura 3]. Para el péptido panel estímulos, la magnitud de la respuesta al VIH aumentó de 102 ± 137 SFC/10 6 PBMC en TI # 1 a 559 ± 483 SFC/10 6 PBMC en TI # 2 y 579 ± 688 SFC/10 6 PBMC en TI # 3 (Figura 3A]. Sin embargo, el aumento en la magnitud de la respuesta al péptido paneles fue estadísticamente significativo sólo para las comparaciones entre TI # 1 y # 2 TI (p = 0,016, Wilcoxon acompañado pares de filas firmado-test). Por Gag p55 respuestas específicas, un aumento significativo de la magnitud se desprende de TI # 1 (336 ± 409 SFC/10 6 PBMC) a TI # 2 (1090 ± 1290 SFC/10 6 PBMC) (p = 0,039). No se volvió a aumentar la magnitud de la pandemia del VIH Gag respuesta concreta se hizo evidente a partir de TI # 2 a TI # 3 (789 ± 1345 SFC/10 6 PBMC) (Figura 3B]. La amplitud de la respuesta a la pandemia del VIH péptido paneles (Figura 3C] también aumentó significativamente entre TI # 1 (0,78 ± 0,83 péptidos) y TI # 2 (2,78 ± 1,99 péptidos) (p = 0,031) pero no aumentó aún más en TI # 3 (2,22 ± 2,59 péptidos).

Para comparar la suerte de VIH específicas de IFN-γ secreción entre la población estudiada y los particulares en la fase crónica de la infección en continuo TARGA que suprime la viremia a niveles indetectables, pero que no se hayan sometido a terapia de intensificación, la vacunación o TI, nueve controles históricos de un similar edad y absoluto de CD4 a la población de estudio fueron ensamblados. El tratado continuamente los controles se examinaron con un MHC de clase I Restringido VIH péptido panel a 2 en tiempo de TARGA puntos separados por un intervalo de tiempo similar al que entre el pre-TI # 1 y pre-TI # 2 puntos temporales en la población de estudio (p = 0,45; Mann-Whitney test). El tamaño del péptido paneles utilizados tanto para la población estudiada y los controles fue similar. La magnitud del IFN-γ respuestas en forma continua los controles para tratar el péptido paneles de prueba no ha cambiado significativamente desde la primera a la segunda vez el punto a prueba (datos no presentados). Por otra parte, la comparación de la magnitud del cambio en IFN-γ respuestas de la primera a la segunda vez el punto difieren considerablemente en estas dos poblaciones (-240 ± 331 versus +457 ± 475 SFC/10 6 PBMC en los controles y la población de estudio , Respectivamente, p = 0.0028; Mann-Whitney test) (Figura 3D].

Con el fin de determinar si los cambios en el VIH-inmunidad específica se produjo en el CD4 + o células CD8 + compartimentos (o ambos), también medido por ciento del VIH Gag p55 específicas IFN-γ secretora de células CD4 + y CD8 + células de la Cámara Naviera Internacional, tal como se describe [31]. Aunque los cambios en el VIH-específica IFN-γ la secreción de las respuestas detectadas por la Cámara Naviera Internacional muestran una tendencia similar en los dos compartimentos a la observada mediante el ensayo ELISPOT, ninguna de estas diferencias fue estadísticamente significativa (no se muestra).

Calendario de fechas de aparición y la magnitud del VIH-una respuesta inmunitaria específica para el control de la VL después de la TARGA se retira

La meseta VL disminuyó 0,44 log 10 unidades de la observada en TI # 1 a TI # 2 (p = 0,004, Wilcoxon acompañado pares de filas firmado-test). El promedio disminuyó VL 0,48 log 10 unidades de TI # 1 a TI # 3 (p = 0,055) (Figura 4A]. A pesar de ello, no encontramos correlación evidente entre VL disminución, ya sea con el aumento en la magnitud o la amplitud del VIH-respuesta inmune específica para HLA-péptido óptimo restringido grupo (Figuras 4B y 4C] y Gag piscinas péptido p55 (datos no presentados); VL disminución se define como la diferencia entre TI # 1 y # 2 TI VL mesetas; aumento en la magnitud del VIH-una respuesta inmunitaria específica es la diferencia en número de SFC/10 6 PBMC entre TI # 1 y # 2 TI para el péptido panel; aumento de la amplitud del VIH-una respuesta inmunitaria específica es la diferencia en el número de epítopos reconocidos entre TI # 1 y # 2 TI.

Los participantes en este juicio pasaron un promedio de 50,4% de los 36 meses que fueron seguidas después de interrumpir la terapia por primera vez fuera de la TARGA. Por lo tanto, investigan si existe una correlación entre el porcentaje de tiempo libre TARGA y el total de VIH-una respuesta inmunitaria específica, ya sea para el péptido panel a prueba oa grupos de péptidos correspondientes al VIH Gag p55. No existió asociación entre estos parámetros se observó (no se muestra)

Discusión

Este informe presenta los resultados sobre los cambios en el VIH-una respuesta inmunitaria específica de cada 10 sujetos en la fase crónica de infección con el VIH indetectable VL TARGA en la entrada a estudio. Todos los sometió a 6 meses de terapia de intensificación y recibieron una dosis inicial de la vacuna terapéutica Remune ™ TARGA antes de parar y todos ellos recibieron Remune ™ cada 3 meses para un total de 11 dosis. El tratamiento fue reiniciado en caso de rebote VL no se redujo a <50 000 copias dentro de 3 meses o si la cuenta de CD4 + disminuye a <200 células / μ l durante TI. HAART fue de nuevo interrumpido cuando la carga viral fue <50 HIV-1 RNA copias / ml y CD4 + se cuenta con> 200 células / mm 3 en dos ocasiones un mes de separación.

Se encontró que el promedio VL meseta disminuyó significativamente con TI # 1 a # 2 TI. Aunque tanto la magnitud de la amplitud de la respuesta inmune a la selección del panel péptido p55 y Gag péptido piscinas aumentado de manera significativa de TI # 1 a # 2 TI, ninguna correlación entre los cambios en VL y los cambios en la respuesta inmune se detectaron. Los pacientes pudieron permanecer fuera de HAART para 50,4% de las veces más de 36 meses de seguimiento. No existe correlación entre el porcentaje de días libres TARGA y la respuesta inmune generada se detectó.

Asunto 14003 fue capaz de mantener la carga viral por debajo del 40 000 copias / ml al cabo de un TI y se mantuvo fuera de la terapia para el recordatorio del estudio y no se incluyó en el análisis (VL media de 27 288 copias / ml más de 968 días). El tema en VL 14008 se mantuvo por debajo del 42 000 copias / ml de plasma (media VL de 13 937 copias / ml más de 637 días) después del 2 de TIS. Este individuo fue incluido en las comparaciones entre TI # 1 y # 2 TI, pero no se disponía de datos para este individuo para TI # 3. Cabe señalar que la ausencia de significación estadística entre las comparaciones de amplitud y magnitud del VIH-una respuesta inmunitaria específica puede estar relacionado con el pequeño tamaño de los grupos de comparación.

El aumento en la amplitud y magnitud de IFN-γ respuestas al panel de péptido probado desde el momento en el punto antes de TI # 1 para el momento antes de TI # 2 difiere de la suerte de estos parámetros para el VIH-respuestas específicas observadas en crónicos sujetos infectados continua en TARGA que suprime VL por debajo de 50 copias / ml de plasma. En primer lugar, la magnitud del IFN-γ respuestas en forma continua los controles tratados no ha cambiado significativamente desde la primera a segunda vez la prueba y el cambio en la magnitud de IFN-γ respuestas de la primera a la segunda vez el punto difieren considerablemente en estas dos poblaciones. Esto apoya la conclusión de que la población de estudio, entre ellas la intensificación de tratamiento, vacunación y TI conducido a la expansión del VIH-inmunidad específica.

Son varios los factores que puede explicar la falta de correlación entre el aumento en la magnitud y amplitud del VIH-una respuesta inmunitaria específica medido por el IFN-γ ELISPOT y VL disminución de TI # 1 a TI # 2. En primer lugar, la utilización óptima de los paneles y péptido péptido Gag piscinas de referencia correspondiente a la cepa del VIH aislados en lugar de secuencias autólogo puede subestimar el verdadero alcance de la inmunidad específica del VIH [32]. A pesar de que el mismo conjunto de estímulos se utilizaron para evaluar el VIH específicos de IFN-γ la secreción de todos los tiempos en puntos, es posible que la acumulación de secuencias virales cambios ya no reconocidos por el VIH-células específicas con el paso del tiempo reduce la correlación entre esta función del VIH específicos de las células y VL control.

En segundo lugar, la actividad citolítica de CD8 + T-células que se cree que es importante en el control de la carga viral en la infección por el VIH. Desde IFN-γ secreción ha demostrado ser un sustituto para el nivel de CD8 + T-células efectoras actividad, IFN-γ ELISPOT y CSI son el estándar de técnicas utilizadas para detectar el antígeno específico CTL [33]. Sin embargo, estudios recientes han demostrado que lisosomales asociada a la membrana de proteína-1 (LAMP-1 o CD107a) expresión en la superficie celular podría ser un mejor marcador para CD8 + T-cell cytolysis. CD107a ha demostrado ser upregulated tras la estimulación antigénica junto con la degranulación y la liberación de perforin [34, 35]. Por otra parte, estudios en la infección viral crónica en modelos murinos han mostrado que existe un agotamiento jerárquica de CD8 + T-funciones de la célula. Específica para el virus de memoria CD8 + T-progresivamente las células pierden su capacidad funcional en respuesta al reconocimiento de antígenos virales a partir de la imposibilidad de secretan interleucina-2 (IL-2), proliferativa y la reducción de actividad y líticas. A continuación, la capacidad de secretar-tumor necrosis factor alpha (TNF-α) mengua [36]. IFN-γ es la secreción de CD8 + T función de la célula más resistentes al agotamiento. Por lo tanto, la medición del VIH-específica IFN-γ-secretor CD8 + T-células podría reflejar una imagen incompleta de VIH específicas de la respuesta inmune asociada con mejores supresión de la replicación viral.

Por otra parte, informes recientes han demostrado que la amplitud y magnitud del VIH-específica IFN-γ respuestas a todos los genes expresados VIH no se correlacionan bien con VL o con tasa de CD4 + disminución de células T [37, 38]. Si bien es bastante bien establecido que el VIH-específica de células CD8 + mediar hacer contra la actividad viral, podría ser que otras funciones de estas células se correlacionan mejor con el control de la replicación del VIH que IFN-γ secreción. Estudios infectadas con el VIH a largo plazo nonprogressors (LTNPs) mostraron que han elevado el VIH específicos de capacidad proliferativa, junto al aumento de perforin expresión si se compara con infectados por el VIH enfermedad progressors [15]. Por otra parte, LTNPs poseen una mayor CD8 células T funcionales perfil en comparación con progressors incluido el mantenimiento de polyfunctional respuestas tales como TNF-α y la IL-2 secreción además de otras funciones [39]. Por otra parte, aviremic pacientes tratados durante la infección primaria del VIH han aumentado la capacidad proliferativa, así como capacidad para mantener una vacuna contra el VIH-específica IL-2-secretora de células CD4 + T-cell población en comparación con los pacientes viremic [40]. Estos estudios sugieren que es la calidad (VIH-específica IL-2 la secreción y la proliferación en particular), en lugar de la cantidad de VIH-respuestas concretas que pueden ser mejores inmune se correlaciona de control viral.

Conclusión

En resumen, nuestro estudio mostró que la TARGA con la intensificación de GM-CSF, ddI y HU seguido por Remune ™ ampliado de vacunación específicas del VIH-IFN-γ la secreción de TI # 1 para T1 # 2 con la correspondiente disminución significativa de la LV. Sin embargo, la correlación no se podría establecer entre estos dos fenómenos. Los pacientes fueron capaces de permanecer fuera de TARGA 50,4% del período del estudio. TIS son una parte importante de la gestión clínica de sujetos infectados por el VIH debido a la posibilidad de ahorro de costes, la reversión de virus resistentes a drogas sensibles variantes, y los pacientes "solicitud de una pausa de sus medicamentos. Por lo tanto, inmunológico y virológico beneficios observados en esta prueba de concepto de orden de estudio de nuevos estudios con un mayor número de población de pacientes a fin de detectar posibles de protección específico del VIH-la respuesta inmune inducida por esta estrategia terapéutica de TI en combinación con Remune ™ vacunación. Además, estudios recientes con Remune vacunación crónica en pacientes infectados por VIH mostraron una inducción de polyfunctional VIH-CD8 + específicas de células T con una mayor capacidad proliferativa, IL-2, MIP-1 β, IFN-γ, y TNF-α secreción [41 ]. De este modo, los futuros para la vigilancia inmune de células T respuestas de los ensayos de vacunas deben incluir no solo el IFN-γ secreción, sino también policromada citometría de flujo para evaluar la proliferación, degranulación, otras citoquinas y quimioquinas así como la secreción.

Conflicto de intereses

Los autores declaran que no tienen intereses en conflicto.

Autores de las contribuciones

KHH participó en la adquisición de datos, análisis de datos, y redactó el manuscrito. MPB y FC llevó a cabo la adquisición de datos. ML participado en el diseño del estudio y análisis de datos. DZ contribuido al diseño del estudio. LC participó en el diseño y coordinación del estudio. ET concibe el estudio y editó el manuscrito. NFB contribuido al diseño del estudio, participó en el análisis de datos, y revisó críticamente el manuscrito de importante contenido intelectual. Todos los autores leído y aprobado el manuscrito final.

Agradecimientos

Los autores desean expresar su agradecimiento a los participantes en el estudio. Además los autores les gustaría dar las gracias a la CTN 140 grupo de estudio, Alefia Mercante y Nancy Simic por sus conocimientos técnicos. Este trabajo fue apoyado por becas de la Fundación Canadiense para la Investigación del SIDA (CANFAR) # 013-521 y # 015-509 y el Fonds de Recherche en Santé du Québec SIDA y Enfermedades Infecciosas Red. El CTN 140-investigador inició experiencia piloto (PI. E. Toma) con el apoyo de donaciones de Canadian HIV Trials Network (CTN).