Journal of Brachial Plexus and Peripheral Nerve Injury, 2007; 2: 3-3 (más artículos en esta revista)

Ácido acetil salicílico aumenta recuperación funcional tras aplastar nervio ciático en ratones

BioMed Central
Prasanna Kumar T Subbanna (drprasannats@yahoo.co.in) [1], CG Prasanna (drprasannacg@gmail.com) [1], Bhagawat K Gunale (gunale.bhagwat @ gmail.com) [1], Manoj G Tyagi ( tyagi243@yahoo.co.in) [1]
[1] Departamento de Farmacología y Farmacología Clínica, Christian Medical College, Vellore-632002, India

Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/by/2.0], que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que la obra original es debidamente citados.

Resumen

Dependientes de ciclina quinasa 5 (CDK-5) parece desempeñar un papel significativo en la regeneración del nervio periférico como CDK-5 la inhibición del nervio retrasa la regeneración nerviosa tras aplastar. Anti-inflamatorio ácido acetil salicílico eleva CDK-5 y reduce la isquemia - reperfusión lesiones en las neuronas cultivadas. En este estudio hemos evaluado el efecto del ácido acetil salicílico en la recuperación funcional del nervio ciático después de aplastar a los ratones. Dieciocho ratones albinos suizos unilateral sufrió aplastamiento del nervio ciático. Los ensayos animales recibieron ácido acetil salicílico (100 mg / kg / día, n = 6 o 50 mg / kg / día, n = 6) y control de animales (n = 6) recibió solución salina normal durante 14 días después de la cirugía. Recuperación funcional fue evaluada con una mejoría en ciático Function Index, nocicepción y de andar. En comparación con solución salina normal de tratamiento, ácido acetil salicílico (100 mg / kg / día) mejoró significativamente la recuperación funcional tras aplastar nervio ciático. Anti-inflamatorio ácido acetil salicílico que parece ser un agente prometedor para el tratamiento de lesiones de nervios periféricos y, por tanto, elucidación de su neuroprotectores vías es necesario.

Fondo

El mamífero adulto lesionado los nervios periféricos, en contraste con los axones lesionados dentro de tractos nerviosos central, muestran vigorosa regeneración [1]. El lugar exacto fisiológicos y moleculares que participan en las señales de inducir el proceso de regeneración son en gran parte desconocido. Además de la inducción de factores de transcripción, moléculas de adhesión, el crecimiento y proteínas asociadas a componentes estructurales necesarios para la elongación axonal, las moléculas de señalización intracelular que el control del ciclo celular y la diferenciación parece desempeñar un papel importante en el proceso de regeneración del nervio [1].

Cyclins y las quinasas dependientes de ciclina (CDKs) desempeñan un papel central en la regulación de la progresión del ciclo celular en organismos eucariotas todos [2]. Dependientes de ciclina quinasa - 5 (CDK-5) es un miembro de estos dependientes de ciclina kinasa de serina familia / treonina cinasas. CDK-5 junto con sus activadores, P35 y p39, es predominantemente expresada en post-mitótico neuronas [3]. CDK-5 parece ser que participan activamente en la reorganización del citoesqueleto de actina durante neurite resultado [4]. Mayor CDK-5 actividad y la expresión de P35 están asociados con la diferenciación de las células neuronales cultivadas, así como acelerado neurite resultado [4]. Namgung et al [5] reportaron una alta expresión de CDK-5 y P35 en la regeneración de los nervios. En sus experimentos con la inhibición de la CDK-5 actividad, a través de CDK-5 inhibidores roscovitine y olomoucine, dirigido a la reducción en CDK-5 actividad y el retraso de la regeneración del nervio [5].

No esteroideos agente antiinflamatorio del ácido acetil salicílico (AAS), además de su bien conocida acción inhibidora sobre cyclooxygenases, afecta a varias vías de señalización celular implicadas en la regulación de la proliferación celular y la diferenciación [6]. Una de las acciones recientemente identificados de ASA está siendo la inducción de 35 p síntesis y activación de CDK-5 [6]. ASA ha mostrado un efecto neuroprotector en un modelo in vitro de la isquemia neuronal lesión de reperfusión [6]. Sin embargo, su efecto sobre las lesiones del nervio periférico es desconocida.

En este estudio hemos evaluado el efecto del AAS en dos dosis (100 mg / kg / día y 50 mg / kg / día) sobre la recuperación funcional después de lesiones del nervio periférico a través del ratón nervio ciático aplastar modelo.

Los siguientes fármacos se utilizaron para este estudio: uretano (Sigma, EE.UU.), solución salina normal (Baxter, India) y AAS (Alta Labs, India).

Ratones albinos suizos (25 - 30 gramos) de ambos sexos fueron distribuidos aleatoriamente en tres grupos de tratamiento y control. Los animales recibieron alimentos y agua ad libitum y se mantuvieron en una de 12 horas luz / oscuridad ciclo. Los animales se mantuvieron en el marco del acuerdo de los protocolos aprobados por el institucionales cuidado de los animales y el uso comisión.

Los ratones fueron sometidos a aplastamiento del nervio ciático, tal como se describe anteriormente [7]. En breve adultos ratones fueron anestesiados con 150 mg/100 g de uretano intraperitoneal. El área por encima del derecho inferior del muslo se le rasuró y esterilizada con Betadine y el 70% quirúrgico espíritu. Una incisión de 1 cm se hizo en la piel por encima del más bajo entre el muslo músculo glúteo máximo y el músculo bíceps femoris. Los músculos se teased de separación, con tijeras y el nervio ciático expuesto. Nervio ciático fue colocado en un 1 mm de ancho aguja titular y aplastado por 20 seg. El titular fue girada 90 ° y los flechazos se repitió en el mismo sitio. El nervio fue sustituido en el marco del músculo y la incisión se suturadas. Exhaustividad de los flechazos se estableció mediante el examen de la pérdida de los sentidos y la función motora en la extremidad operada. Los dígitos en el interior de las extremidades se apretado utilizando un objeto contundente fórceps. Ausencia de pie retirada y vocalización se señaló como pérdida sensorial y de la función motora. Para el control simulado el nervio ciático de la extremidad posterior derecha fue expuesta quirúrgicamente, pero no se hizo aplastar.

Los animales en tres grupos (n = 6 cada uno) recibieron solución salina normal (0,9% NaCl, 0,5 ml, ip), ASA (50 mg / kg / día, ip) y AAS (100 mg / kg / día, ip), respectivamente, para 14 días después de la cirugía.

Evaluación de la función índice ciático (SFI) [8] y de andar [7] se hizo en el día 0, es decir antes de la cirugía y en los días 1 y 15 después de la cirugía. Los ratones fueron ocupados por el pecho y sus pies estaban detrás pulsado sobre un sello con almohadilla empapada soluble en agua tinta negro. Los ratones fueron inmediatamente permitido a caminar por un camino de limitarse 6 cm de ancho por 30 cm de largo con un abrigo oscuro al final del pasillo dejando sus huellas en el papel que está cortado a las dimensiones y se colocan en el suelo del pasillo. Las pistas fueron evaluados por tres parámetros diferentes: (1) distancia desde el talón hasta el tercer dedo del pie, la longitud de impresión (PL), (2) distancia desde el primer al quinto dedo del pie, los dedos del pie propagación (TS), y (3 ) De distancia del segundo al cuarto dedo del pie, el intermediario dedo del pie propagación (ITS). Las tres mediciones fueron tomadas de la experiencia (E, sufriendo aplastamiento del nervio ciático) y normal (N) extremidades. Usando la fórmula siguiente derivados de Bain et al [9] SFI se calculó como,

-38,3 SFI = [(EPL - NPL) / NPL] + 109,5 [(ETS - NTS) / NTS] + 13,3 [(IET - NIT) / NIT] - 8,8

El SFI se analizó como: Un SFI igual a 100 indica significativo deterioro, mientras que SFI una oscilación en torno a 0 se considera que reflejan la función normal.

Los animales se les permitió caminar sobre una plataforma, así como en un plano inclinado de 2 minutos cada uno. Subjetiva resultados fueron asignados sobre la base del movimiento de las extremidades posteriores y su postura, mientras que ambulating. Los ratones se desplazan, tanto la extremidades posteriores de manera uniforme dado 3, si la extremidad operada se está moviendo con deformidad que recibió 2, marcó como 1 si la extremidad operada rara vez se movía y 0 - cuando no se observó movimiento en el interior de las extremidades posteriores.

Nociceptivo función fue evaluada mediante la observación de la retirada reflejo de la extremidad posterior y vocalización en respuesta a estímulos nocivos como la estimulación mecánica (pizca de prueba) y el pinchazo plantar aspecto de la parte lateral del pie con una aguja [7]. Los animales fueron evaluados diariamente, hasta la recuperación de la función nociceptivo.

Todo el régimen se repitió dos veces y, a continuación, todos los valores de múltiples experimentos fueron promediados. Evaluación estadística se realizó mediante comparaciones múltiples y de Mann-Whitney U test. Los datos se representan como media ± desviación estándar. 'P' valores <0,05 se consideró significativo.

En todos los animales SFI Resultado antes de la cirugía fue 0, Resultado de andar era de tres y nociceptivo función era intacta. A raíz del nervio ciático aplastar a todos los animales, excepto los controles simulado, SFI resultados se convirtieron en 100 y andar resultados se redujeron a 0 y hubo pérdida de función nociceptivo. En el simulacro los controles no se produjeron cambios en las puntuaciones SFI y de andar resultados, mientras que nociceptivo función permanecido intacto.

Hubo una recuperación espontánea de la función sensoriomotoras solución salina normal en los ratones tratados como lo demuestra la reducción en las puntuaciones SFI, la mejora en las puntuaciones de andar y la recuperación de la función nociceptivo (cuadro 1]. No hubo diferencias significativas en los parámetros funcionales, entre los animales tratados con 50 mg / kg / día de AAS y los animales que reciben tratamiento de solución salina normal. Sin embargo los animales tratados con 100 mg / kg / día de AAS mostró reducción estadísticamente significativa en las puntuaciones SFI y el mejoramiento de paso y exhibió una pronta recuperación en función nociceptivo (cuadro 1].

ASA es uno de los más utilizados analgésicos, anti-pyretic y anti-inflamatorio. ASA ejerce estos efectos a través de la inhibición de cyclooxygenases (COX) [6]. Sin embargo los nuevos inhibidores de la COX-independiente de las acciones al igual que ASA, la inhibición de los aminoácidos excitatorios liberación, NF-kappa beta (Nfkb) translocación al núcleo y de expresión inducible de ácido nítrico sintasa (iNOS), después de isquemia cerebral son la proyección de ASA como un prometedor agente neuroprotector para el tratamiento de accidentes cerebrovasculares [10].

Nuestros resultados muestran que el AAS, a anti-inflamatorios dosis, se acelera considerablemente la recuperación funcional después de aplastar los nervios periféricos. A pesar de ASA a 50 mg / kg / día dosis mostró ligeramente superiores recuperación funcional no fue significativo en comparación con solución salina normal tratamiento. De ahí que la acción neuroprotector de ASA siguientes lesiones del nervio periférico que parece ser dependiente de la dosis con el máximo beneficio con el visto 100 mg / kg / día.

A pesar de nuestro estudio preliminar muestra la acción neuroprotector de ASA en las lesiones del nervio periférico, los datos relativos a los mecanismos moleculares que conducen a la acción neuroprotectores todavía falta. No hemos dado el histológico y pruebas moleculares para la acción neuroprotector de ASA. Esto puede ser considerada como una limitación para nuestro estudio. Sobre la base de los informes anteriores, describirá la función de CDK-5 en la regeneración del nervio [5] y el efecto del AAS en CDK-5 [6] se puede suponer que la ASA promueve la regeneración del nervio siguientes lesiones nerviosas periféricas a través de la activación de la CDK-5. Sin embargo ASA también afecta a la síntesis de prostaglandinas, iNOS expresión, Nfkb translocación, mitogen activado proteína (MAP) quinasa vía etc que pueden modular la regeneración del nervio siguientes lesiones nerviosas periféricas. De ahí que la comprensión molecular las vías que conduzcan a la acción neuroprotector de ASA es necesario.

Para concluir nuestro estudio preliminar demuestra que el ácido acetil salicílico acelera la recuperación funcional después de lesiones del nervio periférico y que parece ser un agente prometedor para el tratamiento de lesiones nerviosas periféricas. Otros estudios destinados a comprender los mecanismos moleculares involucrados en la acción neuroprotector de ácido acetil salicílico son obligatorios.

Abreviaturas

1. CDK - quinasas dependientes de Ciclinas

2. ASA - ácido acetil salicílico

3. SFI - ciático función índice

4. PL - longitud Imprimir

5. TS - Toe propagación

6. IT - propagación de intermediación dedo del pie

7. COX - La ciclooxigenasa

8. NFkB - NF-kappa beta

9. iNOS - Inducible óxido nítrico sintasa

10. MAP quinasa - Mitogen proteína quinasa activada

Conflicto de intereses

Los autores declaran que no tienen intereses en conflicto.

Autores de las contribuciones

1. PKTS - Concepto, experimentos, análisis de los datos, preparación del manuscrito

2. PCG - Concepto, experimentos, análisis de los datos

3. BKG - Concepto, experimentos, análisis de los datos

4. MGT - Concepto, análisis de los datos, preparación del manuscrito