Mediators of Inflammation, 2007; 2007: (más artículos en esta revista)

Factor de necrosis tumoral-alfa y la interleucina 6 en lesiones periapicales Humanos

Hindawi Publishing Corporation
Ivana Brekalo Pršo [1], Willy kocjan [1], Hrvoje Šimić [2], Gordana Brumini [3], Sonja Pezelj-Ribarić [1], Josipa Borčić [1], Silvio Ferreri [1], Ivana Miletić Karlović [4 ]

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Resumen

Objetivo. El objetivo de este estudio fue evaluar la presencia de las citocinas factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α) y la interleucina-6 (IL-6) en materia de lesiones periapicales. Sujetos y métodos. Las muestras se obtuvieron a partir de tres grupos de dientes: los dientes sintomáticos, lesiones asintomáticas, y uninflamed periradicular tejidos como control. Resultados. TNF-alfa niveles fueron significativamente mayor en las lesiones sintomáticas en comparación con el control. Grupo asintomáticos con lesiones fueron significativamente mayores concentraciones en comparación con el control. No hubo diferencias significativas en TNF-alfa entre los niveles sintomáticos y asintomáticos lesiones. En el grupo con lesiones sintomáticas, niveles de IL-6 fueron significativamente más altos que en el grupo con lesiones asintomáticas. Los niveles de IL-6 en el grupo sintomático también mostraron significativamente más altos de concentración en comparación con el grupo control. En el grupo asintomático, la IL-6 tenía nivel significativamente mayores concentraciones en comparación con el control. Conclusión. Estos resultados indican que las lesiones sintomáticas representan una etapa inmunológicamente activa de la enfermedad y las lesiones son asintomáticas el punto de que el proceso avanza hacia la curación.

1. INTRODUCCIÓN

Periapical lesiones inflamatorias son una patología frecuente y, en la mayoría de los casos, una consecuencia de la caries dental. Este tipo de lesión se desarrolla como una reacción inmunitaria desencadenada por la presencia de bacterias en el conducto radicular y las toxinas bacterianas en la región periapical [1]. Después de la invasión microbiana de los tejidos periapicales, tanto inespecíficos y las respuestas inmunológicas específicas persisten en los tejidos del propio huésped. Este proceso inflamatorio en última instancia, los resultados en la destrucción del hueso alveolar que rodea el diente. Se caracteriza por la presencia de células inmunocompetentes que producen una amplia variedad de mediadores de la inflamación. TNF-alfa es un mediador soluble y se libera de las células inmunocompetentes en los procesos inflamatorios. TNF-alfa juega un papel importante en la iniciación y la coordinación de los eventos celulares que componen el sistema inmunológico de la respuesta a la infección. Los efectos biológicos del TNF-alfa incluyen la activación de leucocitos, como los linfocitos (T y células B), macrófagos y células natural killer; inducción de la fiebre; fase aguda de proteínas en libertad; de citoquinas y la expresión génica de quimioquinas y la activación de las células del endotelio [2] . IL-6 es una citoquina pleotropic que influye en el antígeno específico de la respuesta inmune y reacciones inflamatorias. Estimula la formación de precursores de osteoclastos formadoras de colonias de granulocitos-unidad de los macrófagos y aumenta el número de osteoclastos en vivo, dando lugar a sistémico aumento de la resorción ósea. Nuevas datos sugieren que la IL-6 también tiene importantes propiedades antiinflamatorias actividades [3]. Junto con la IL-1 y TNF α (que también estimular la IL-6 secreción), que pertenece al grupo de las principales citoquinas proinflamatorias [4].

La respuesta inflamatoria en la persistencia de la lesión apical protege el anfitrión de una mayor invasión microbiana. La vinculación de patógenos vías de infección con el desarrollo de una lesión periapical y la resorción ósea concomitante no se comprenden totalmente. Un gran número de células inmunocompetentes como los macrófagos, T activados y las células B, células plasmáticas y síntesis de todas las clases de inmunoglobulinas están presentes en lesiones periapicales [5].

Las diversas actividades de IL-6 y TNF-alfa sugieren que estos factores pueden desempeñar un papel importante en la mediación de la inflamación y la respuesta inmune iniciada por infecciones o lesiones [6]. El objetivo de este estudio fue determinar el TNF-alfa e IL-6 en los niveles sintomáticos y asintomáticos lesiones periapicales utilizando un inmunoensayo enzimático (ELISA) en humanos removidos quirúrgicamente lesiones periapicales.

2. Sujetos y métodos

Un total de 45 dientes se incluyeron en este estudio. Los dientes se dividieron en tres grupos. El grupo 1 constaba de 15 lesiones de los dientes que habían sido diagnosticados como sintomático. Los dientes se presentaron en este grupo sobre la base de los siguientes criterios: clínica y radiográfica examen que determinó la existencia de periradicular pathosis la participación de destrucción de hueso cortical y dolorosa sensibilidad a la percusión y / o palpación [5].

Grupo 2 consistió de 15 lesiones de los dientes que habían sido diagnosticados como asintomáticos. El diagnóstico se hizo con base en los criterios siguientes: clínicos y radiográficos examen que determinó la existencia de periradicular pathosis la participación de destrucción de hueso cortical, no leve o sensibilidad a la percusión.

Grupo 3 consistió en uninflamed periradicular tejidos que se obtuvieron a partir de las regiones periapical, de 15 de unerupted incompletamente formadas y terceros molares. Los dientes se incluyen en este grupo tuvo que cumplir con los siguientes criterios: a la historia oral no se confirma la historia de la pulpa del dolor, clínica y radiográfica examen después de asegurar que la extracción de estos dientes no tenían caries.

El examen clínico se realizó de acuerdo a la norma de criterios clínicos. Después de consentimiento informado se habían obtenido y médica, dental y social historias recogidas, los tejidos fueron obtenidos por apicoectomy. El diámetro de las lesiones, determinado por el radiografías, osciló entre 2 mm a 16 mm.

La cirugía se realizó con el paciente bajo anestesia local. Los pacientes que participan en este estudio no había sufrido ninguna de las enfermedades que requieren alguna forma de tratamiento médico, excepto para la cirugía dental. Estos pacientes no reciben los medicamentos incluidos salicilatos, nonsteroid fármacos antiinflamatorios o antibióticos durante aproximadamente 1 mes antes de la cirugía. Después de la escisión de la lesión, cada muestra se dividió en dos. Una sección se ha tomado para la evaluación y el histopatológico fue manchado con hematoxilina y eosina. El exámen histológico reveló que 25 muestras de tejido fueron granulomas compuesto de tejido conectivo colágeno con la variable densidad, infiltrado inflamatorio fundamentalmente de macrófagos, linfocitos, y los grupos de plasmocitos, polymorphonucleocytes y células gigantes, así como la presencia de fibroangioblastic proliferación en grados variables. Tres lesiones fueron diagnosticadas como el tejido cicatrizal. Dos lesiones presentan tejido conectivo variable difusa con infiltrado inflamatorio y la cavidad limitada por la formación continua o discontinua epitelio estratificado escamosa, y, por tanto, se consideraron los quistes inflamatorios. En las muestras de lesiones sintomáticas, hubo una presencia de células polimorfonucleares, más que en lesiones asintomáticas.

Antes de homogeneización cada muestra se pesarán. Para el análisis de citoquinas, el tejido finamente cortados con tijeras y homogeneizada en un vaso triturador de tejidos Teflon con una zambullida. El elutions se realizaron a 4 ° C durante un período de 30 minutos con la mezcla antes de centrifugación durante 2 minutos a 9880 g. Las concentraciones de TNF-alfa e IL-6 se analizaron con un comercial de inmunoensayo enzimático kit (ELISA; I + D, Minneapolis, Minn, EE.UU.). El ensayo se realizó de acuerdo a las instrucciones del fabricante y los resultados se expresan en pg / mL. El límite de detección de TNF-alfa fue de 4,4 pg / mL y 1,4 pg / mL para IL-2, respectivamente. Resultados del contenido de proteínas se expresaron en el registro con 10 pg / ml.

Todos los sujetos fueron informados de los objetivos y los procedimientos de investigación, así como el hecho de que sus datos médicos se utiliza en la investigación. Dentro de la investigación se les garantiza el respeto de su base ética y principios bioéticos de la integridad personal (independencia, la justicia, el bienestar y la seguridad) como Nűrnberg reguladas por el Codex y la versión más reciente de su declaración de Helsinki. Sólo aquellos temas que han dado un permiso por escrito en forma de consentimiento informado se incluyeron.

3. ANALISIS ESTADISTICO

Los datos se presentan como valores medios, rango intercuartil (IQR) y en una escala logarítmica. Los resultados obtenidos se compararon mediante la no paramétrico de Kruskal-Wallis y la prueba de Mann-Whitney como un post-hoc test.

Todos los valores estadísticos se consideraron importantes en el nivel de P .05. El análisis estadístico de los datos se realizó mediante el uso de Statistica para Windows, la liberación 6.1 (StaSoft Inc, Tulsa, Okla, EE.UU.).

4. RESULTADOS

Este estudio cuantificó los niveles de TNF-alfa e IL-6 en sintomáticos y asintomáticos humanos lesiones periapicales. Las lesiones también se clasifican por el tamaño y hallazgos histológicos.

Los niveles de TNF-alfa e IL-6 se midieron en el tratamiento sintomático y asintomático humanos lesiones periapicales, así como en el grupo control, y se presentan como la mediana (IQR) en una escala logarítmica en las figuras 1 y 2. La mediana del valor de TNF-alfa en el grupo sintomático: 4,47 (IQR: 4,44-4,61) pg / ml fue significativamente mayor (P <.001), frente a 3,96 (IQR: 3,86-4,10) pg / mL en el grupo control. La mediana del valor de TNF-alfa en el grupo de asintomáticos: 4,46 (IQR: 4,28-4,60) pg / m también fue significativamente superior (P <.001), frente a 3,96 (IQR: 3,86-4,10) pg / mL en el grupo control . No hubo diferencia significativa en TNF-alfa entre sintomáticos y asintomáticos lesiones: mediana de 4,48 pg / ml frente a 3,91 pg / mL (P = .418). (Figura 1].

5. DISCUSIÓN

Lesiones periapicales suelen ser el resultado de una persistente respuesta inflamatoria inducida por la exposición prolongada de los tejidos periapicales a diversos agentes microbianos, evocando una reacción inmunológica. En este mecanismo de defensa local, diversos mediadores de la inflamación, en particular, las citoquinas inflamatorias IL-6 y TNF-alfa, juegan un complejo y papel central en la regulación de la respuesta inmune.

El complejo inmune está formado por células cuya función principal es reconocer antígenos que penetran en el organismo y para neutralizar y / o destruirlos [7]. IL-6 tiene muchas formas moleculares y cada molécula tiene una función diferente cuando secretada por las células diferentes en distintas situaciones (activada a través de distintos estímulos). Varios estudios han demostrado que tanto humoral y celular las respuestas inmunes juegan un papel importante en la patogénesis de lesiones periapicales [8]. La expresión de citoquinas ha sido investigado en lesiones periapicales, sin embargo, el papel que estas moléculas pueden desempeñar en la patogénesis de la enfermedad no ha sido bien establecida.

Las citoquinas inflamatorias IL-6 y TNF-alfa se han demostrado tener la capacidad de activar la resorción osteoclástica del hueso [9].

Los mediadores que participan en el proceso inflamatorio y la resorción ósea parece ser más compleja. Por lo tanto, humano y los estudios en animales han demostrado la participación activa de otras citocinas, como TNF-alfa, IL-6, IL-3, GM-CSF, IL-11, IL-17, e IL-18, que han demostrado su posible papel en la patogénesis de las enfermedades osteolíticas [9, 10]. Estas citoquinas podría estar actuando sinérgicamente con IL-1, la promoción de activación / diferenciación de los osteoclastos y la producción / secreción de prostaglandinas por muchos tipos celulares, incluyendo fibroblastos y osteoblastos [10]. IL-6 ha sido tradicionalmente considerada como un mediador proinflamatorio, ya que es inducida por la IL-1 y TNF-alfa a principios de la cascada inflamatoria, y porque estimula la expresión aguda de proteínas de fase [3].

Nuestros resultados demuestran la presencia de IL-6 en la gran mayoría de muestras de tejidos y están de acuerdo con los de estudios anteriores [11]. Se ha informado de que el crecimiento quística puede deberse a la estimulación autocrina quiste de la proliferación de las células epiteliales de TNF-alfa e IL-6, y la actividad osteolítica de estas citoquinas, causando la pérdida de hueso local [6]. En este estudio, las concentraciones de IL-6 en las lesiones sintomáticas fueron estadísticamente significativa en correlación con las lesiones asintomáticas y grupo control. Estos resultados sugieren que estas lesiones pueden representar un estado activo de la enfermedad inflamatoria periradicular que ya ha sido confirmada [11, 12]. La concentración plasmática de IL-6 también se ha informado de que son equivalentes a la gravedad de la infección en determinadas condiciones clínico patológicas [12]. Los niveles de IL-6 también han sido medidos en los pacientes con el atípicos en los trastornos dolorosos orofaciales región, y sus niveles fueron significativamente mayores que los del grupo control [13].

Los resultados de los estudios anteriores confirman los resultados obtenidos en este estudio, ya que se ha demostrado en diferentes niveles que la IL-6 es significativamente mayor en ciertas infecciones y condiciones dolorosas. En las investigaciones realizadas hasta la fecha, se ha demostrado que tanto la IL-6 y TNF-alfa se producen en respuesta a organismos infecciosos, in vitro e in vivo. Una vez producido, pueden ejercer una beneficioso o efecto perjudicial, dependiendo de la cantidad en que se producen y el período de tiempo durante el que la producción es sostenida [3].

En nuestro estudio, TNF-alfa e IL-6 fueron detectados en todas las muestras periapical. Mayor concentración de TNF-alfa se detectó en sintomáticos y asintomáticos lesiones, mientras más bajo de TNF-alfa concentración se encontró en muestras saludable. Algo mayor concentración se encontró en las lesiones sintomáticas, pero no hubo diferencias estadísticamente significativas entre el tratamiento sintomático y asintomático. Se encontró diferencia estadísticamente significativa en sintomático y asintomático grupos en comparación con el grupo control, se aprecia claramente que el TNF-alfa es un importante resorción ósea-mediador y sus elevados niveles de largo alcance consecuencias sistémicas. Citoquinas inflamatorias también desempeñar un papel en la modulación del dolor por interferir con nociceptivo transducción, conducción, y la transmisión. Esta modulación puede ser el resultado de la alteración de la tasa de transcripción y post-translacional cambios en las proteínas implicadas en el itinerario de dolor. En el anterior estudio, un importante papel fue asignado a IL-6 en la fisiología de la nocicepción y la fisiopatología del dolor [14]. Debido a este hecho, hemos querido analizar la correlación entre los niveles de citoquinas de tejidos y elementos característicos de las lesiones, tales como síntomas. Las muestras del grupo 1, representan un grupo sintomático. La elevación de IL-6 y TNF-alfa en los niveles de este grupo sugieren que estas lesiones podrían representar un estado activo de la enfermedad inflamatoria periradicular. En el Grupo 2 que es el grupo asintomático, se encontraron significativamente elevados niveles de citoquinas, en comparación con el grupo control. Sin embargo, la diferencia en IL-6 entre este grupo y no los síntomas y el control de los grupos fue estadísticamente significativa. Estos resultados sugieren que la reacción inflamatoria es menos intenso en los tejidos clasificados en el Grupo 2.

Los presentes resultados sugieren que un reto bacteriana crónica de infectados por conducto radicular hace que la expresión de dos citoquinas, TNF-alfa e IL-6, que desempeñan un papel clave en la patogénesis periapical como la resorción ósea potente estimulante mediadores.

Esta investigación fue apoyada por una beca del Ministerio de Ciencia y Tecnología (0062058), la República de Croacia.